Clostridium botulinum, an obligate

Clostridium botulinum, an obligate anaerobic spore-forming bacterium, produces seven antigenic variants of botulinum toxin that are distinguished serologically and termed "serotypes". Botulinum toxin blocks the release of acetylcholine at neuromuscular junctions resulting in flaccid paralysis. The potential lethality of the disease warrants a fast and accurate means of diagnosing suspected instances of food contamination or human intoxication. Currently, the Food and Drug Administration (FDA)-accepted assay to detect and type botulinum neurotoxins (BoNTs) is the mouse protection bioassay. While specific and sensitive, this assay requires the use of laboratory animals, may take up to four days to achieve a diagnosis, and is unsuitable for high-throughput analysis. We report here a two-step PCR assay that identifies all toxin types, that achieves the specificity of the mouse bioassay while surpassing it in equivalent sensitivity, that has capability for high-throughput analysis, and that provides quantitative results within hours. The first step of our assay consists of a conventional PCR that detects the presence of C. botulinum regardless of the neurotoxin type. The second step uses quantitative PCR (qPCR) technology to determine the specific serotype of the neurotoxin.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เชื้อ clostridium botulinum เป็น obligate ไม่ใช้ขึ้นรูปสปอร์แบคทีเรีย สร้างตัวแปร antigenic เจ็ดสารพิษ botulinum ที่แตกต่าง serologically และเรียกว่า "serotypes" สารพิษ botulinum บล็อกของ acetylcholine ที่ junctions กล้ามเกิดอัมพาตอ่อนแอ Lethality ศักยภาพของโรควอร์แรนต์หมายถึงรวดเร็ว และแม่นยำวิเคราะห์กรณีสงสัยปนเปื้อนอาหารหรือมนุษย์ intoxication ปัจจุบัน อาหารและยา FDA ยอมรับการวิเคราะห์เพื่อตรวจสอบ และพิมพ์ botulinum neurotoxins (BoNTs) มี bioassay ป้องกันเมาส์ ในขณะที่บาง และละเอียดอ่อน ทดสอบนี้ต้องใช้ห้องปฏิบัติการสัตว์ อาจใช้เวลาถึง 4 วันเพื่อให้ได้การวินิจฉัย และเหมาะสมสำหรับการวิเคราะห์อัตราความเร็วสูง เรารายงานนี่เป็นสองขั้นตอน PCR assay ที่ระบุชนิดของสารพิษทั้งหมด ที่ได้รับ specificity ของ bioassay เมาส์ใน ขณะที่ surpassing ในความไวเทียบเท่า มีความสามารถในการวิเคราะห์อัตราความเร็วสูง ที่แสดงผลลัพธ์เชิงปริมาณภายในชั่วโมง ขั้นตอนแรกของการทดสอบของเราประกอบด้วย PCR แบบเดิมที่ตรวจพบของ C. botulinum neurotoxin ใบ ขั้นตอนสองใช้เทคโนโลยี PCR (qPCR) เชิงปริมาณเพื่อกำหนด serotype เฉพาะของ neurotoxin

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Clostridium botulinum ซึ่งเป็นแบคทีเรียที่สร้างสปอร์แบบไม่ใช้ออกซิเจนภาระผลิตเจ็ดสายพันธุ์ที่กลายพันธุ์ของ botulinum พิษที่มีความโดดเด่นทางน้ำเหลืองและเรียกว่า "สายพันธุ์" Botulinum บล็อกการเปิดตัวของสารพิษ acetylcholine ที่ทางแยกประสาทและกล้ามเนื้อทำให้เกิดอัมพาตอ่อนแอ ตายที่อาจเกิดขึ้นของโรคใบสำคัญแสดงสิทธิที่เป็นวิธีที่รวดเร็วและแม่นยำของการวินิจฉัยกรณีที่สงสัยว่าปนเปื้อนอาหารหรือพิษของมนุษย์ ขณะนี้คณะกรรมการอาหารและยา (FDA) -accepted ทดสอบการตรวจสอบและพิมพ์ neurotoxins botulinum (BoNTs) เป็นชีวภาพป้องกันเมาส์ ในขณะที่เฉพาะเจาะจงและที่สำคัญการทดสอบนี้ต้องใช้สัตว์ทดลองที่อาจใช้เวลาถึงสี่วันเพื่อให้บรรลุการวินิจฉัยและไม่เหมาะสมสำหรับการวิเคราะห์สูง throughput เรารายงานที่นี่สองขั้นตอนการทดสอบ PCR ที่ระบุชนิดของสารพิษทั้งหมดที่ประสบความสำเร็จในความจำเพาะของหนูทดลองในขณะที่เหนือกว่าในความไวเทียบเท่าที่มีความสามารถในการวิเคราะห์สูง throughput และที่ให้ผลเชิงปริมาณภายในไม่กี่ชั่วโมง ขั้นตอนแรกของการทดสอบของเราประกอบไปด้วย PCR แบบเดิมที่ตรวจพบการปรากฏตัวของ C. botulinum โดยไม่คำนึงถึงประเภท neurotoxin ขั้นตอนที่สองใช้วิธี PCR เชิงปริมาณ (qPCR) เทคโนโลยีเพื่อตรวจสอบ serotype ที่เฉพาะเจาะจงของ neurotoxin

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สีลบ , หรือสร้างสปอร์ anaerobic แบคทีเรียผลิตแอนติเจนของสารพิษ Botulinum เจ็ดสายพันธุ์ที่โดดเด่นและคนที่เรียกว่า " ภูมิ " สารพิษ Botulinum บล็อกรุ่นของ acetylcholine ที่เป็นผลในการเป็นอัมพาตและ junctions รัฐ .โดย Lethality ศักยภาพของโรคได้อย่างรวดเร็วและถูกต้องตามวิธีการ การวินิจฉัยกรณีสงสัยว่าปนเปื้อน หรือจากมนุษย์ ขณะนี้องค์การอาหารและยา ( FDA ) -- ได้รับการยอมรับการทดสอบเพื่อตรวจสอบชนิดโบทูลินัมที่ ( bonts ) เป็นเมาส์ป้องกันไม่ ในขณะที่เฉพาะเจาะจง และละเอียดอ่อน วิธีนี้ต้องใช้สัตว์ทดลองอาจใช้เวลาถึงสี่วันเพื่อให้ได้การวินิจฉัยโรค และไม่เหมาะสมสำหรับการวิเคราะห์ช่วย . เรารายงานที่นี่มีสอง PCR assay ที่ระบุประเภทสารพิษทั้งหมดที่ใช้ความจำเพาะของวิธีที่เหนือกว่าในความไวของเมาส์ขณะที่เทียบเท่า ที่มีความสามารถในการวิเคราะห์ช่วย และให้ปริมาณภายในชั่วโมงขั้นตอนแรกของการทดสอบของเราประกอบด้วยแบบ PCR ตรวจจับค โบทูลินั่ม โดยไม่คำนึงถึงประเภทของยาพิษ ขั้นตอนที่ 2 ใช้เทคนิคเชิงปริมาณ ( qpcr ) เทคโนโลยีการตรวจสอบโดยเฉพาะของยาพิษ