2. Materials and methods2.1. Animal

2. Materials and methods
2.1. Animals and sample collection
This study was conducted with two adult female Amazonian
manatees (Ti-057 and Ti-060) initially housed in
two round pools (10 m
×
2.5 m depth; 196 m3) in the Laboratory
of Aquatic Mammals at the National Institute of
Amazonian Research (INPA, Manaus, AM, Brazil). Both animals
were over 25 years old and had already conceived at
least one calf each in captivity. The animals were fed with
forage grass (Brachiaria mutica), lettuce, cabbage, and other
vegetables at a level greater than or equal to 8% of their
body weight per day. Water from artesian wells circulated
through the pools constantly, and the water temperature
varied between 27 ◦C and 29 ◦C.
Considering the possible existence of reproductive
seasonality in the species, salivary samples were collected
daily for 12 consecutive weeks between March and June
for two consecutive years. To facilitate the sample collection
procedure, the animals were kept in two holding pools
(3.5 m
×
2.5 m
×
1.5 m depth; 13 m3) for the entire experimental
period, and all sample collections were conducted
between 0800 and 0900 h. For sample collection, the pool
was drained, and the saliva (∼0.5 mL) was collected from
the oral mucosa using a metal spoon. Samples visually contaminated
with feces were discarded. All samples were
frozen at
−20 ◦C until assayed.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. สัตว์และเก็บตัวอย่างการศึกษานี้ได้ดำเนินการกับผู้ใหญ่หญิงสองแอมะซอนmanatees (ตี้-057 และตี้-060) แห่งแรกสองรอบสระว่ายน้ำ (10 เมตร×ความลึก 2.5 เมตร 196 m3) ในห้องปฏิบัติการของน้ำเลี้ยงลูกด้วยนมที่ สถาบันแห่งชาติแอมะซอนงานวิจัย (INPA เมโนส น. บราซิล) สัตว์ทั้งสองมีอายุกว่า 25 ปี และรู้สึกได้แล้วที่อย่างน้อยหนึ่งลูกแต่ละกุม สัตว์ถูกเลี้ยงด้วยอาหารสัตว์ (Brachiaria mutica) หญ้า ผักกาดหอม กะหล่ำปลี และอื่น ๆผักในระดับมากกว่า หรือเท่ากับ 8% ของพวกเขาน้ำหนักตัวต่อวัน น้ำจากบ่อบาดาลที่หมุนเวียนไปสระว่ายน้ำตลอดเวลา และอุณหภูมิน้ำแตกต่างกันระหว่าง 27 ◦C และ 29 ◦Cพิจารณาอยู่เป็นไปได้ของการสืบพันธุ์seasonality ในสปีชีส์ salivary ตัวอย่างถูกเก็บรวบรวมเป็นประจำทุกวันติดต่อกัน 12 สัปดาห์ระหว่างเดือนมีนาคมถึงมิถุนายนสองปีติดต่อกัน เพื่อเก็บตัวอย่างขั้นตอน สัตว์ถูกเก็บไว้ในสระถือสอง(3.5 เมตร×2.5 m×ความลึก 1.5 m 13 m3) สำหรับทดลองทั้งหมดรอบระยะเวลา และคอลเลกชันตัวอย่างทั้งหมดได้ดำเนินการระหว่าง 0800 และ 0900 h สำหรับเก็บตัวอย่าง สระว่ายน้ำได้ระบายออก และน้ำลาย (มล ∼0.5) รวบรวมจากmucosa ปากใช้ช้อนโลหะ ตัวอย่างที่เห็นปนเปื้อนกับอุจจาระถูกละทิ้ง ตัวอย่างทั้งหมดได้แช่แข็งที่−20 ◦C จน assayed

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 สัตว์และเก็บตัวอย่าง
นี้ศึกษาได้ดำเนินการกับสอง Amazonian ผู้ใหญ่หญิง
manatees (Ti-057 และ Ti-060) ที่ตั้งครั้งแรกใน
รอบสองสระว่ายน้ำ (10 เมตร
×
2.5 เมตรความลึก; 196 m3) ในห้องปฏิบัติการ
เลี้ยงลูกด้วยนมน้ำที่สถาบันแห่งชาติ ของ
อเมซอนการวิจัย (INPA มาเนาส์, AM, บราซิล) สัตว์ทั้งสอง
มีมานานกว่า 25 ปีและตั้งครรภ์แล้วที่
อย่างน้อยหนึ่งน่องแต่ละในกรง สัตว์ที่ถูกเลี้ยงด้วย
หญ้าอาหารสัตว์ (Brachiaria Mutica), ผักกาดหอมกะหล่ำปลีและอื่น ๆ
ผักในระดับที่มากกว่าหรือเท่ากับ 8% ของ
น้ำหนักตัวต่อวัน น้ำจากบ่อบาดาลหมุนเวียน
ผ่านสระว่ายน้ำอย่างต่อเนื่องและอุณหภูมิของน้ำ
ที่แตกต่างกันระหว่าง 27 ◦Cและ 29 ◦C.
พิจารณาการดำรงอยู่เป็นไปได้ของการสืบพันธุ์
ตามฤดูกาลชนิดตัวอย่างน้ำลายถูกเก็บ
ในชีวิตประจำวันเป็นเวลา 12 สัปดาห์ติดต่อกันระหว่างเดือนมีนาคมและมิถุนายน
สอง ปีติดต่อกัน เพื่ออำนวยความสะดวกการเก็บตัวอย่าง
ขั้นตอนสัตว์ที่ถูกเก็บไว้ในสองสระว่ายโฮลดิ้ง
(3.5 เมตร
×
2.5 เมตร
×
1.5 เมตรความลึก 13 M3) สำหรับการทดลองทั้ง
ระยะเวลาและคอลเลกชันตัวอย่างทั้งหมดถูกดำเนินการ
ระหว่าง 0800 และ 0900 ชั่วโมง สำหรับการเก็บตัวอย่าง, สระว่ายน้ำ
ได้ถูกระบายออกและน้ำลาย (~0.5 มิลลิลิตร) ถูกเก็บรวบรวมจาก
เยื่อบุช่องปากโดยใช้ช้อนโลหะ ตัวอย่างที่ปนเปื้อนสายตา
กับอุจจาระถูกโยนทิ้ง ตัวอย่างทั้งหมดถูก
แช่แข็งที่
-20 ◦Cจน assayed

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . สัตว์และ
การเก็บตัวอย่างเพื่อศึกษาด้วยสองพะยูน Amazonian
หญิงผู้ใหญ่และ ti-057 ti-060 ) ตอนแรกตั้งอยู่ในประเภทสองรอบ ( 10
m

m × 2 ความลึก แต่ M3 ) ในห้องปฏิบัติการ
สัตว์น้ำเลี้ยงลูกด้วยนมที่สถาบันวิจัย Amazonian
( inpa มาเนาส์ , บราซิล , เป็น ) ทั้งสัตว์
มากกว่า 25 ปี และได้รู้สึกใน
อย่างน้อยหนึ่งน่องแต่ละในการเป็นเชลย สัตว์ที่เลี้ยงด้วยหญ้าอาหารสัตว์ ( หญ้าขน Brachiaria
) , ผักกาดหอม , กะหล่ำปลี , ผัก
ในระดับมากกว่าหรือเท่ากับร้อยละ 8 ของพวกเขา
น้ำหนักตัว ต่อวัน น้ำจากบ่อน้ำบาดาลหมุนเวียน
ผ่านสระน้ำตลอดเวลา และอุณหภูมิของน้ำมีค่าระหว่าง 27 ◦
c และ 29 ◦ C .

พิจารณาการดำรงอยู่ที่เป็นไปได้ของการสืบพันธุ์ฤดูกาลในการเก็บตัวอย่างน้ำลายชนิด
ทุกวัน เป็นเวลา 12 สัปดาห์ติดต่อกันระหว่างเดือนมีนาคมและมิถุนายน
สำหรับสองปีติดต่อกัน เพื่อความสะดวกในการเก็บตัวอย่าง
ขั้นตอน สัตว์ถูกสองถือสระ
( 3.5 m

m
2 ××
1.5 ม. ลึก ; 13 m3 ) สำหรับระยะเวลาทดลอง
ทั้งหมดและรวบรวมตัวอย่างทั้งหมดจำนวน
ระหว่าง 0800 0900 . และตัวอย่างคอลเลกชันสระว่ายน้ำ
เป็นระบาย และน้ำลาย ( ∼ 0.5 ml ) เก็บรวบรวมข้อมูลจากเซลล์เยื่อบุช่องปาก
ใช้ช้อนโลหะ ตัวอย่างการปนเปื้อนกับอุจจาระ
ถูกละทิ้ง . ตัวอย่างทั้งหมดจะถูกแช่แข็ง

− 20 ◦ C จนซีรั่ม .