Hemolymph (500 lL) was individually

Hemolymph (500 lL) was individually withdrawn from the ventral sinus cavity of healthy P. monodon shrimp using a 1-mL syringe containing 500 lL ice-cold anticoagulant solution (0.45 M NaCl, 0.1 M glucose, 26 mM citric acid, 30 mM trisodium citrate, 10 mM EDTA; pH 4.6). Hemocytes were immediately collected by centrifugation at 800g for 10 min at 4 C and the obtained hemocyte pellet was immediately washed twice and homogenized in 100 lL cacodylate buffer (10 mM sodium cacodylate, 10 mM CaCl2; pH 7.0) before being centrifuged at 25,000g for 20 min at 4 C. The shrimp hemocyte lysate supernatant (SHLS) was harvested, adjusted to a protein content of 1 mg/mL and subsequently used as a source of the PO enzyme for preparation of the active melanization reaction products. 2.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Hemolymph (500 จะ) ถูกถอนแยกจากโพรงไซนัส ventral ของกุ้ง P. monodon สุขภาพที่ใช้เข็มฉีดยา 1 mL ที่ประกอบด้วย 500 จะฉ่ำ anticoagulant โซลูชัน (0.45 M NaCl, 0.1 M กลูโคส กรดซิตริก 26 มม. 30 มม. trisodium ซิเตรต 10 mM EDTA; pH 4.6) Hemocytes ถูกรวบรวม โดย centrifugation ที่ 800g ใน 10 นาทีที่ 4 C ทันที และเม็ด hemocyte ได้รับทันทีล้างสองครั้ง และ homogenized เป็นกลุ่มในบัฟเฟอร์ cacodylate จะ 100 (cacodylate โซเดียม 10 มม. 10 มม. CaCl2; pH 7.0) ก่อนการ centrifuged ที่ 25000 g สำหรับ 20 นาทีที่ 4 ค กุ้ง hemocyte lysate supernatant (SHLS) ถูกเก็บเกี่ยว ปรับโปรตีนของ 1 mg/mL และในเวลาต่อมาใช้เป็นแหล่งของเอนไซม์ PO สำหรับการเตรียมผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยา melanization ใช้งานอยู่ 2

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เลือด (500 lL) ถูกถอดถอนบุคคลออกจากโพรงไซนัสท้องของกุ้งกุลาดำ P. สุขภาพดีโดยใช้เข็มฉีดยา 1 มิลลิลิตรที่มี 500 lL การแก้ปัญหาการแข็งตัวของเลือดเย็น (0.45 M NaCl 0.1 M กลูโคส 26 มิลลิกรดซิตริก, 30 มิลลิ Trisodium ซิเตรต, EDTA 10 มมค่า pH 4.6) เซลล์เม็ดเลือดที่ถูกเก็บรวบรวมได้ทันทีโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 800 กรัมเป็นเวลา 10 นาทีที่อุณหภูมิ 4 C และเม็ดเม็ดเลือดได้ถูกล้างทันทีสองครั้งและหดหายใน 100 lL บัฟเฟอร์ cacodylate (10 มิลลิ cacodylate โซเดียม 10 มม CaCl2; ค่า pH 7.0) ก่อนที่จะถูกหมุนเหวี่ยงที่ 25,000g สำหรับ 20 นาทีที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสใสเม็ดเลือดกุ้ง lysate (Shls) ได้รับการเก็บเกี่ยวการปรับให้ปริมาณโปรตีน 1 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรและนำมาใช้เป็นแหล่งของเอนไซม์ PO สำหรับการเตรียมการใช้งานผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยา melanization 2

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เลือด ( 500 จะ ) คือแบบถอนตัวจากล่างโพรงจมูกต่อกุ้งกุลาดำ กุ้ง โดยใช้เข็มที่มี 1-ml 500 จะเย็นเลือด โซลูชั่น ( 0.45 M NaCl 0.1 เมตรกลูโคส 26 มม. , กรดซิตริก , 30 มม. ไตรโซเดียมซิเตรต 10 mM EDTA ; pH 4.6 )เม็ดเลือดได้ทันทีจำนวน 3 ที่ 800 g 10 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส และได้ hemocyte เม็ดทันทีล้างสองครั้งและบด 100 จะจากนั้นนำบัฟเฟอร์ ( 10 มม. 10 มม. จากนั้นนำโซเดียม , ผลิต ; pH 7.0 ) ก่อนที่จะถูกไฟฟ้าที่ 25000g สำหรับ 20 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส กุ้ง hemocyte lysate น่าน ( shls ) เก็บเกี่ยว ,ปรับให้โปรตีนเท่ากับ 1 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรและต่อมาใช้เป็นแหล่งของเอนไซม์โปสำหรับการเตรียมใช้งาน melanization ปฏิกิริยาของผลิตภัณฑ์ 2 .