Lyophilized protein was resuspended

Lyophilized protein was resuspended in either 100 or 250 mM
phosphate buffer in H2O or 100 mM phosphate in D2O. 10% v:v
D2O was added to the H2O samples. Protein concentration varied
from ~0.6 mM to ~3 mM (final volume of ~300 μL). Sample pH
ranged between 7.1 and 7.5. Iron reduction was performed by
adding 3- to 13-fold excess sodium dithionite (DT, Sigma-Aldrich).
Alternatively, freshly purified protein was concentrated, exchanged
in the appropriate buffer, and used without lyophilization.
Cyanomet CtrHb was generated by adding a 5-fold excess of potassium
cyanide (KCN) to ferric holoprotein solutions

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โปรตีน lyophilized ถูก resuspended ใน 100 หรือ 250 mMบัฟเฟอร์ฟอสเฟตใน H2O หรือ 100 มม.ฟอสเฟตใน D2O 10% v: vD2O ถูกเพิ่มเข้าไปตัวอย่าง H2O ความเข้มข้นของโปรตีนที่แตกต่างกันจาก mM ~0.6 ~ 3 มม. (ปริมาตรสุดท้ายของ μL ~ 300) ตัวอย่างค่า pHอยู่ในช่วงระหว่าง 7.1 7.5 ลดเหล็กถูกดำเนินการโดยเพิ่ม 3 - ให้ 13 - fold เกินโซเดียม dithionite (DT ซิก Aldrich)โปรตีนบริสุทธิ์สดเข้มข้น หรือ แลกเปลี่ยนในบัฟเฟอร์ที่เหมาะสม และใช้ โดย lyophilizationCyanomet CtrHb ถูกสร้างขึ้น โดยเพิ่มเกิน 5-fold ของโพแทสเซียมไซยาไนด์ (KCN) เพื่อแก้ปัญหา holoprotein เฟอร์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โปรตีนแห้งถูก resuspended ทั้ง 100 หรือ 250 มิลลิ
ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ใน H2O หรือฟอสเฟต 100 มิลลิเมตรใน D2O 10% V: V
D2O ถูกบันทึกอยู่ในตัวอย่าง H2O ความเข้มข้นของโปรตีนที่แตกต่างกัน
จาก ~ 0.6 มม ~ 3 มิลลิ (เล่มสุดท้ายของ ~ 300 ไมโครลิตร) ตัวอย่างค่า pH
อยู่ระหว่าง 7.1 และ 7.5 ลดเหล็กได้รับการดำเนินการโดย
การเพิ่ม 3 ถึง 13 เท่าโซเดียมส่วนเกินไดไทโอ (DT, Sigma-Aldrich).
อีกทางเลือกหนึ่งของโปรตีนบริสุทธิ์สดเข้มข้นแลกเปลี่ยน
ในบัฟเฟอร์ที่เหมาะสมและใช้โดยไม่ lyophilization.
Cyanomet CtrHb ถูกสร้างขึ้นโดยการเพิ่ม 5 ส่วนเกินเท่าของโพแทสเซียม
ไซยาไนด์ (คณะ) เพื่อแก้ปัญหา holoprotein ferric

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โปรตีนโปรตีนเป็น resuspended ทั้ง 100 หรือ 250 mm
ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ใน H2O หรือ 100 mM ฟอสเฟตใน d2o % V 10 : v
d2o คือเพิ่ม h2o ตัวอย่าง ความเข้มข้นของโปรตีนที่แตกต่างกัน
~ 0.6 มม. ~ 3 มม. ( เล่มสุดท้ายของ ~ 300 μ L ) ตัวอย่างมีค่าอยู่ระหว่าง pH
7.1 และ 7.5 . การกระทำโดยการเพิ่มเหล็ก
3 - 13 พับไดไธโอไนท์โซเดียมส่วนเกิน ( DT , Sigma อัลดริช ) .
อีกวิธีหนึ่งคือสดโปรตีนข้น แลกเปลี่ยน
ในบัฟเฟอร์ที่เหมาะสม และใช้โดยปราศจากเอนไซม์
cyanomet ctrhb ถูกสร้างขึ้น โดยการเพิ่มส่วนของโพแทสเซียมไซยาไนด์ ( ผู้อื่น
kcn ) holoprotein โซเฟอร์ริค