In this study, we investigated the anti-allergic action of mulberry fruit extract (MFE) or MFE in combination with naringinase (MFEN) in IgE-activated RBL-2H3 cells, and investigated the mechanisms responsible for the anti-allergic effects of MFEN. β-hexosaminidase release assay was used to measure the amount of β-hexosaminidase released from the cells, and ELISA was used to measure the levels of tumor necrosis factor-a (TNF-a). We found that MFE significantly reduced the release of β-hexosaminidase (IC50, 10.59 mg/ml) and TNF-a (IC50, 4.87 mg/ml). Moreover, MFEN enhanced the inhibitory effects on the release of β-hexosaminidase (IC50, 123.10 μg/ml) and TNF-a (IC50, 65.01 μg/ml). Furthermore, MFEN had no cytotoxicity at the concentration range used to exert the anti-allergic effects. In addition, we evaluated the effects of MFEN on the formation of pro-inflammatory lipid mediators, such as prostaglandin D2 (PGD2), leukotriene C4 (LTC4) and leukotriene B4 (LTB4) using enzyme immunoassay (EIA) kits. MFEN markedly reduced the formation of PGD2 (IC50, 6.47 μg/ml) and LTC4 (IC50, 0.31 μg/ml), but not LTB4 (IC50, 25.75 μg/ml). In mechanistic analyses, we measured the phosphorylation of Syk, Lyn and Fyn by immunoblot analysis. MFEN significantly inhibited the phosphorylation of Syk, but not that of Lyn or Fyn. MFEN also suppressed the phosphorylation of phospholipase C (PLC)?1/2, protein kinase C (PKC)d, linker for activation of T cells (LAT), extracellular signal-regulated protein kinase (ERK)1/2, JNK, GRB2-associated binding protein 2 (Gab2), phosphoinositide-3-kinase (PI3K), Akt, cytosolic phospholipase A2 and 5-lipoxygenase, as well as the expression of cyclooxygenase-2. In conclusion, these results suggest that MFEN exerts potent inhibitory effects on allergic response through the suppression of the activation of the FceRI signaling cascade. Our data demonstrating the anti-allergic effects of MFEN may provide further insight into the therapeutic application of MFEN or its use as a functional food.
ในการศึกษานี้ เราตรวจสอบการดำเนินการป้องกันการแพ้ของสารสกัดจากผลไม้ (MFE) หรือร่วมกับ naringinase (MFEN) ในเซลล์ IgE เรียกใช้ RBL - 2 H 3, MFE และกลไกที่รับผิดชอบผลป้องกันการแพ้ของ MFEN ตรวจสอบ Β-hexosaminidase รุ่นทดสอบที่ใช้วัดจำนวนของβ-hexosaminidase ออกจากเซลล์ และ ELISA ที่ใช้วัดระดับของอัตราการตายเฉพาะส่วนของเนื้องอกได้ (TNF-a) เราพบว่า MFE ของβ-hexosaminidase (IC50, 10.59 mg/ml) และ TNF เป็น (IC50, 4.87 mg/ml) อย่างมีนัยสำคัญลดลง นอกจากนี้ MFEN เพิ่มผลลิปกลอสไขของβ-hexosaminidase (IC50, 123.10 μg/ml) และ TNF เป็น (IC50, 65.01 μg/ml) นอกจากนี้ MFEN มี cytotoxicity ไม่ที่ช่วงความเข้มข้นที่ใช้ออกแรงผลป้องกันการแพ้ นอกจากนี้ เราสามารถประเมินผลกระทบของ MFEN ในการก่อตัวของไขมันโปอักเสบอักเสบ เช่น prostaglandin D2 (PGD2), leukotriene C4 (LTC4) และ leukotriene B4 (LTB4) ใช้เอนไซม์ immunoassay (EIA) ชุด MFEN ลดการก่อตัวของ PGD2 อย่างเด่นชัด (IC50, 6.47 μg/ml) และ LTC4 (IC50, 031 μg/ml), แต่ไม่ LTB4 (IC50, 25.75 μg/ml) ในการวิเคราะห์กลไกการทำ เราวัด phosphorylation Syk, Lyn และ Fyn โดยวิเคราะห์ immunoblot MFEN อย่างมีนัยสำคัญห้าม phosphorylation ของ Syk แต่ที่ของ Lyn Fyn MFEN ยังถูกระงับ phosphorylation ของ phospholipase C (PLC) ? 1/2 โปรตีน kinase C (PKC) d ตัวเชื่อมโยงข้อมูลการเปิดใช้งานของ T เซลล์ (ลาด), extracellular ควบคุมสัญญาณโปรตีน kinase (ERK) 1/2, JNK ผูกสัมพันธ์ GRB2 โปรตีน 2 (Gab2), phosphoinositide-3-kinase (PI3K), Akt, cytosolic phospholipase A2 และ 5 lipoxygenase ตลอดจนค่าของ cyclooxygenase-2 ในสรุป ผลลัพธ์เหล่านี้แนะนำว่า MFEN exerts ผลลิปกลอสไขมีศักยภาพตอบสนองแพ้ผ่านทางปราบปรามการเรียกใช้ FceRI ที่สัญญาณทั้งหมด ข้อมูลของเราเห็นผลป้องกันการแพ้ของ MFEN อาจให้เพิ่มเติมความเข้าใจในการประยุกต์ใช้ยา MFEN หรือการใช้เป็นอาหารฟังก์ชัน
การแปล กรุณารอสักครู่..
ในการศึกษานี้เราตรวจสอบการกระทำที่ต้านการแพ้ของสารสกัดจากผลไม้หม่อน (MFE) หรือ MFE ร่วมกับ naringinase (MFEN) ใน IgE เปิดใช้งานเซลล์ RBL-2H3 และกลไกการตรวจสอบที่มีความรับผิดชอบสำหรับผลต้านการแพ้ของ MFEN β-hexosaminidase ปล่อยทดสอบถูกใช้ในการวัดปริมาณของβ-hexosaminidase ปล่อยออกมาจากเซลล์และเอลิซาถูกนำมาใช้ในการวัดระดับของเนื้อร้ายเนื้องอกปัจจัย (TNF-) เราพบว่าลดลงอย่างมีนัยสำคัญ MFE ปล่อยของβ-hexosaminidase (IC50, 10.59 mg / ml) และ TNF-(IC50, 4.87 mg / ml) นอกจากนี้ MFEN เพิ่มการยับยั้งในการเปิดตัวของβ-hexosaminidase (IC50, 123.10 mg / ml) และ TNF-(IC50, 65.01 mg / ml) นอกจาก MFEN ไม่มีพิษที่ช่วงความเข้มข้นที่ใช้ในการออกแรงผลต้านการแพ้ นอกจากนี้เรายังมีการประเมินผลกระทบของการ MFEN เกี่ยวกับการก่อตัวของไขมันไกล่เกลี่ย pro อักเสบเช่น prostaglandin D2 (PGD2) leukotriene C4 (LTC4) และ leukotriene B4 (LTB4) โดยใช้เอนไซม์ immunoassay (EIA) ชุด MFEN อย่างเห็นได้ชัดลดการก่อตัวของ PGD2 (IC50, 6.47 mg / ml) และ LTC4 (IC50 0.31 mg / ml) แต่ไม่ LTB4 (IC50, 25.75 mg / ml) ในการวิเคราะห์กลไกเราวัด phosphorylation ของ Syk, Lyn และ Fyn โดยการวิเคราะห์ immunoblot MFEN ยับยั้งอย่างมีนัยสำคัญของฟอสโฟ Syk แต่ไม่ว่าของลินหรือ Fyn MFEN ยังระงับ phosphorylation ของ phospholipase C (มหาชน) 1/2, โปรตีนไคเนส C (PKC) D, ลิงเกอร์เพื่อกระตุ้นการทำงานของเซลล์ T (LAT) สารโปรตีนไคเนสสัญญาณควบคุม (ERK) 1/2, JNK, GRB2 ที่เกี่ยวข้องผูกพันโปรตีน 2 (Gab2) phosphoinositide-3-ไคเนส (PI3K) Akt, A2 phospholipase cytosolic และ 5 lipoxygenase รวมทั้งการแสดงออกของ cyclooxygenase-2 ในการสรุปผลเหล่านี้แสดงให้เห็นว่า MFEN ออกแรงผลยับยั้งที่มีศักยภาพในการตอบสนองต่อการแพ้ผ่านการปราบปรามการกระตุ้นการทำงานของน้ำตก FceRI การส่งสัญญาณ ข้อมูลของเราแสดงให้เห็นถึงผลต้านการแพ้ของ MFEN อาจให้ข้อมูลเชิงลึกเพิ่มเติมลงในโปรแกรมการรักษาของ MFEN หรือใช้เป็นอาหารทำงาน
การแปล กรุณารอสักครู่..
การศึกษาการป้องกันการแพ้จากสารสกัดผลหม่อน ( mfe ) หรือ mfe ร่วมกับนารินจิเนส ( mfen ) ใน rbl-2h3 IgE กระตุ้นเซลล์ และศึกษากลไกที่รับผิดชอบในการป้องกันการแพ้ผลของ mfen . บีตา - การทดสอบปล่อย hexosaminidase ถูกใช้ในการวัดปริมาณบีตา - hexosaminidase ออกจากเซลล์แล้ว ) ที่ใช้วัดระดับของเนื้องอกเนื้อร้าย factor-a ( tnf-a ) เราพบว่า mfe ลดรุ่นของบีตา - hexosaminidase ( ic50 10.59 , มิลลิกรัม / มิลลิลิตร ) และ tnf-a ( ic50 4.87 , mg / ml ) นอกจากนี้ mfen เพิ่มผลการยับยั้งในรุ่นของบีตา - hexosaminidase ( ic50 123.10 , μกรัม / มิลลิลิตร ) และ tnf-a ( ic50 65.01 , μ g / ml ) นอกจากนี้mfen ไม่มีความเป็นพิษต่อเซลล์ที่ระดับความเข้มข้นที่ใช้ออกแรงต้านแพ้ช่วงพิเศษ นอกจากนี้ เราประเมิน ผลของ mfen ต่อการก่อตัวของไขมัน pro-inflammatory mediators เช่นโปรสตาแกลนดิน D2 ( pgd2 ) , ลิวโคไตรอีน C4 ( ltc4 ) และ leukotriene B4 ( ltb4 ) โดยใช้เอนไซม์ Immunoassay ( EIA ) ชุด mfen อย่างชัดเจน ลดการก่อตัวของ pgd2 ( ic50 6.47 , μกรัม / มิลลิลิตร ) และ ltc4 ( ic50 , 0 .31 μ g / ml ) แต่ไม่ ltb4 ( ic50 25.75 , μ g / ml ) ในการวิเคราะห์กลไก เราก็วัดฟอสโฟริเลชันของ syk ลินฟิน , และโดยการวิเคราะห์มมูโนบล็ . mfen อย่างมีนัยสำคัญยับยั้งปฏิกิริยาฟอสโฟรีเลชันของ syk แต่ไม่ใช่ลินหรือฟิน . mfen ยังสามารถ ฟอสโฟริเลชันของ phospholipase C ( PLC ) 1 / 2 , โปรตีน kinase C ( PKC ) D , สนามกอล์ฟสำหรับการกระตุ้นเซลล์ T ( ลาดพร้าว )และสัญญาณควบคุมโปรตีนไคเนส ( กา ��� ) 1 / 2 jnk grb2 โปรตีน , ที่ 2 ( gab2 ) phosphoinositide-3-kinase ( pi3k ) akt cytosolic 5-lipoxygenase phospholipase A2 และ ตลอดจนการแสดงออกของ cyclooxygenase-2 . สรุปผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า mfen exerts แรงผลการยับยั้งการแพ้ผ่านการเปิดใช้งานของ fceri สัญญาณน้ำตก . ข้อมูลแสดงให้เห็นถึงผลของ mfen Anti แพ้อาจให้ข้อมูลเชิงลึกเพิ่มเติมลงในโปรแกรมการรักษาของ mfen หรือใช้เป็นอาหารเสริมสุขภาพ
การแปล กรุณารอสักครู่..