Oocyte CollectionAfter ovariectomy,

Oocyte Collection
After ovariectomy, the ovaries were immersed in PBS
and transported to the laboratory in an incubator at
39°C. The number of visible small (≤3mm) and large
(>3mm) follicles on each ovary was determined, and
cumulus oocyte complexes were isolated by opening
each visible follicle with a scalpel blade and flushing it
2 to 3 times with oocyte collection medium (Grazul-
Bilska et al., 2003, 2005; Luther et al., 2005). Under a
stereomicroscope, cumulus oocyte complexes were recovered
from each dish and transferred to a petri dish
containing fresh collection medium without heparin.
Cumulus oocyte complexes were then evaluated and
categorized as healthy or atretic based on their morphology
(Thompson et al., 1995). All cumulus oocyte
complexes were then washed 3 times in maturation
medium [TCM-199 containing 10% fetal bovine serum,
ovine FSH (5
g/mL; oFSH-RP-1; NIAMDD-NIH,
Bethesda, MD), ovine LH (5
g/mL; oLH-26; NIADDKNIH),
estradiol-17β (1
g/mL; Sigma, St. Louis, MO),
glutamine (2 mM; Sigma), sodium pyruvate (0.25 mM;
Sigma), epidermal growth factor (10 ng/mL; Sigma),
and penicillin/streptomycin (100 units of penicillin/mL
and 100
g of streptomycin/mL; Gibco, Grand Island,
NY)]

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

คอลเลกชัน oocyteหลังจาก ovariectomy รังไข่ถูกแช่อยู่ใน PBSและขนย้ายไปปฏิบัติในการบ่มเพาะวิสาหกิจที่39 องศาเซลเซียส จำนวนขนาดเล็กมองเห็นได้ (≤3mm) และขนาดใหญ่(> 3mm) กำหนดรูขุมขนในแต่ละรังไข่ และคอมเพล็กซ์ลัส oocyte ถูกแยกต่างหาก โดยการเปิดแต่ละ follicle เห็นเบลด scalpel และลบรายการนั้น2-3 ครั้งกับ oocyte คอลเลกชันปานกลาง (Grazul-Bilska และ al., 2003, 2005 ลูเธอร์ et al., 2005) ภายใต้การstereomicroscope, oocyte ลัสคอมเพล็กซ์ได้รับการกู้คืนจากอาหารแต่ละจานให้จานเพาะเชื้อและประกอบด้วยการเรียกเก็บเงินสดปานกลางไม่ มีเฮพารินคอมเพล็กซ์ oocyte ลัสได้ประเมินแล้ว และแบ่งเป็นสุขภาพ หรือ atretic ตามสัณฐานวิทยาของพวกเขา(ทอมป์สันและ al., 1995) Oocyte ลัสทั้งหมดสิ่งอำนวยความสะดวกที่ถูกล้างแล้ว 3 ครั้งในพ่อแม่ปานกลาง [TCM 199 มี 10% ครรภ์วัวซีรั่มFSH แพะ (5 g/mL; oFSH-RP-1 NIAMDD-NIHเบเทสดา MD), แพะ LH (5 g/mL; oLH-26 NIADDKNIH),estradiol-17β (1 g/mL ซิกมา St. Louis, MO),glutamine (2 mM ซิกมา), โซเดียม pyruvate (0.25 mMซิกมา), epidermal ปัจจัยการเจริญเติบโต (10 ng/mL ซิกมา),และ streptomycin ยาเพนนิซิลลิน (100 หน่วย/มลยาเพนนิซิลลินและ 100 กรัมของ streptomycin/mL Gibco แกรนด์เกาะNY)]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การเก็บไข่หลังจาก ovariectomy ที่รังไข่ถูกแช่อยู่ในพีบีเอสและส่งไปยังห้องปฏิบัติการในศูนย์บ่มเพาะที่39 ° C จำนวนที่มองเห็นขนาดเล็ก (≤3mm) และขนาดใหญ่(> 3mm) ในรูขุมรังไข่แต่ละคนถูกกำหนดและคิวมูลัสคอมเพล็กซ์เซลล์ที่แยกได้โดยการเปิดแต่ละรูขุมขนที่มองเห็นได้ด้วยใบมีดผ่าตัดและล้างมัน2 ถึง 3 ครั้งมีขนาดกลางเซลล์คอลเลกชัน (Grazul -.. Bilska et al, 2003, 2005; ลูเทอร์, et al, 2005) ภายใต้สเตอริโอ, คิวมูลัสคอมเพล็กซ์ไข่หายจากแต่ละจานและโอนไปยังจานเพาะเชื้อที่มีคอลเลกชันขนาดกลางสดโดยไม่ต้องเฮ. Cumulus คอมเพล็กซ์ไข่ได้รับการประเมินแล้วและแบ่งออกเป็นสุขภาพหรือatretic ขึ้นอยู่กับลักษณะทางสัณฐานวิทยาของพวกเขา(ทอมป์สัน et al., 1995) เซลล์คิวมูลัสทั้งหมดคอมเพล็กซ์ถูกล้างแล้ว 3 ครั้งในการเจริญเติบโตปานกลาง[TCM-199 ที่มีซีรั่มวัวของทารกในครรภ์ 10% FSH แกะ (5 กรัม / มิลลิลิตร; oFSH-RP-1; NIAMDD-NIH, Bethesda, MD) แกะ LH ( 5 กรัม / มิลลิลิตร; oLH-26; NIADDKNIH) estradiol-17β (1 กรัม / มิลลิลิตร; ซิกเซนต์หลุยส์), glutamine (2 มิลลิ; ซิกม่า) ไพรูโซเดียม (0.25 มิลลิ; ซิกม่า) ผิวหนัง ปัจจัยการเจริญเติบโต (10 นาโนกรัม / มิลลิลิตร; ซิก) และยาปฏิชีวนะ / streptomycin (100 หน่วยของยาปฏิชีวนะ / มิลลิลิตรและ100 กรัม streptomycin / mL? Gibco แกรนด์ไอส์แลนด์นิวยอร์ก)]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โอโอไซต์คอลเลกชัน
หลังตัดรังไข่ รังไข่ถูกแช่ใน PBS
และส่งตัวไปปฏิบัติการในตู้อบที่
39 องศา ตัวเลขที่มองเห็น ขนาดเล็ก ( ≤ 3mm ) และขนาดใหญ่ ( > 3
) รูขุมขนแต่ละรังไข่ถูกกำหนดและแยกไข่
Cumulus เชิงซ้อนโดยการเปิดรูขุมขนด้วย
แต่ละที่มองเห็นได้ มีดและใบมีดล้าง
2 ถึง 3 ครั้ง ด้วยการเก็บไข่ ( -
grazul ขนาดกลางbilska et al . , 2003 , 2005 ; ลูเธอร์ et al . , 2005 ) ภายใต้
stereomicroscope , Cumulus เชิงซ้อนที่พบไข่
จากแต่ละจานและโอนไปยังจานเพาะเชื้อ
ที่มีขนาดกลาง คอลเลกชันสดโดยไม่ต้องผ่าน heparin .
Cumulus เชิงซ้อนนำมาประเมินและ
ประเภทสุขภาพ หรือ atretic ตามสัณฐาน
( Thompson et al . , 1995 ) ทั้งหมดไข่
สำลีเชิงซ้อนแล้วล้าง 3 ครั้งในการขนาดกลาง [
tcm-199 ที่มีซีรั่มวัว 10% fetal
ovine FSH ( 5
g / ml ; ofsh-rp-1 ; niamdd-nih
, Bethesda , MD ) ovine LH ( 5
g / ml ; olh-26 ; niaddknih )
estradiol-17 บีตา ( 1
g / ml ; ซิกม่า , เซนต์ หลุยส์ โม ) ,
กลูตามีน ( 2 มม. ; Sigma ) , โซเดียมไพรูเวท ( 0.25 mm ;
Sigma ) , epidermal growth factor ( 10 ng / ml ; Sigma )
เพนนิซิลิน ( และ streptomycin 100 หน่วย / ยา / ml และ streptomycin 100

กรัม / มิลลิลิตร ; gibco
เกาะแกรนด์ , นิวยอร์ก , ) ]