Purification of elastinPurification

Purification of elastin
Purification of the highly stable and insoluble cross-linked elastin was performed grossly by solubilization and removal of all other proteins.
The tissue samples were processed following the procedure of Ritz-Timme et al. [28], which, in brief, includes the following steps: specimens were washed in 15% NaCl/protease inhibitor solution overnight, defatted in ethanol/ether for 15 min, again washed in excess aqua dest. (each step at 4°C), then freeze-dried overnight and stored at −20°C before further purification. The tissue samples were weighed and suspended in formic acid (5 ml per 100 mg tissue) containing excess CNBr (200 mg in 10 ml of 98% formic acid) and shaken at room temperature for 5 h. After

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทำให้บริสุทธิ์ของอีลาสตินทำให้บริสุทธิ์ของมั่นคงสูง และไม่ละลายน้ำ cross-linked สติดำเนินการ grossly solubilization และกำจัดโปรตีนอื่น ๆตัวอย่างเนื้อเยื่อที่ถูกประมวลผลตามขั้นตอนของริทซ์ Timme et al. [28], ซึ่ง สังเขป มีขั้นตอนต่อไปนี้: ชิ้นงานทดสอบถูกล้างใน 15% NaCl/โป รติเอสยับยั้งค้างคืน สกัดน้ำมันในเอทานอล/อีเธอร์ 15 นาที ล้างในกิน้ำส่วนเกินอีก ด้วย (แต่ละขั้นตอนที่ 4° C), ชนิดแห้งค้างคืนแล้ว และเก็บไว้ที่ −20 ° C ก่อนฟอกเพิ่มเติม ชั่งน้ำหนักตัวอย่างเนื้อเยื่อ และระงับในกรดฟอร์มิก (5 ml ต่อเนื้อเยื่อ 100 มิลลิกรัม) ที่ประกอบด้วยส่วนเกิน CNBr (200 มิลลิกรัมของกรดฟอร์มิก 98% 10 ml) และเขย่าที่อุณหภูมิห้องสำหรับ 5 หลัง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การทำให้บริสุทธิ์ของอีลาสติน
ทำให้บริสุทธิ์ของ cross-linked อีลาสตินมีความเสถียรสูงและไม่ละลายน้ำได้ดำเนินการโดยไม่มีการลดการละลายและการกำจัดของโปรตีนอื่น ๆ ทั้งหมด.
กลุ่มตัวอย่างเนื้อเยื่อที่ถูกประมวลผลต่อไปนี้ขั้นตอนของ The Ritz-Timme et al, [28] ซึ่งในช่วงสั้น ๆ รวมถึงขั้นตอนต่อไปนี้: ตัวอย่างถูกล้างใน 15% โซเดียมคลอไรด์ / วิธีการแก้ปัญหาสารยับยั้งเอนไซม์โปรติเอค้างคืนโปรตีนจากเอทานอล / อีเทอร์นาน 15 นาทีล้างอีกครั้งในปลายทางของน้ำส่วนเกิน (แต่ละขั้นตอนที่ 4 ° C) แล้วแห้งในชั่วข้ามคืนและเก็บไว้ที่ -20 ° C ก่อนที่บริสุทธิ์ต่อไป กลุ่มตัวอย่างเนื้อเยื่อถูกชั่งน้ำหนักและระงับในกรด (5 มิลลิลิตรต่อเนื้อเยื่อ 100 มิลลิกรัม) ที่มีส่วนเกิน CNBr (200 มก. 10 มล. 98% กรด) และเขย่าที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 5 ชั่วโมง หลังจาก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผลิตอีลาสตินการทำให้บริสุทธิ์ของน้ำและมีเสถียรภาพสูง อีลาสติน ทำให้เกิดการประณามโดยการสกัดและการกำจัดโปรตีนอื่น ๆทั้งหมดเนื้อเยื่อตัวอย่างและวิเคราะห์ตามกระบวนการของฝ่าย timme et al . [ 28 ] ซึ่งในบทสรุป รวมถึงขั้นตอนต่อไปนี้ : ทำการซัก 15 % NaCl / โปรเตอร์ โซลูชั่น ข้ามคืน สกัดเอธานอล / อีเธอร์ 15 นาที อีกครั้ง ซัดเกินควาเตเดสท์ . ( แต่ละขั้นตอนที่ 4 ° C ) แล้วแห้งข้ามคืน และที่เก็บรักษาที่อุณหภูมิ 20 ° C −ก่อนบำบัดต่อไป เนื้อเยื่อตัวอย่างหนัก และพักงานในกรด ( 5 มิลลิลิตร ต่อ 100 มิลลิกรัม ประกอบด้วย cnbr เนื้อเยื่อส่วนเกิน ( 200 มิลลิกรัมใน 10 ml ของ 98% กรด ) และหวั่นไหวที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 5 ชั่วโมง หลังจาก