Immobilized metal ion affinity chro

Immobilized metal ion affinity chromatography (IMAC) is widely used for the purification of many different
His6-tagged recombinant proteins. On the one hand, it is a powerful technique but on the other
hand it has its disadvantages. In this report, we present the development of a unique ssDNA aptamer
for the purification of His3-tagged recombinant proteins. Our study shows that stability of the His3-
tag/H3T aptamer complex can be controlled by the sodium ion concentration. Based on this feature, we
demonstrate that H3T aptamer resin was successfully employed for the purification of three out of four
tested His3-tagged recombinant proteins from an E. coli total protein extract using imidazole-free buffers.
Finally, we show that the purity of His3-tagged proteins is superior when purified with the help of the
H3T aptamer in comparison with Ni-NTA resinhed with the help
of the His-tag/IMAC system.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตรึงไอออนโลหะความสัมพันธ์ Chromatography (IMAC) ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายสำหรับการทำให้บริสุทธิ์ของที่แตกต่างกันหลาย
โปรตีน His6 ติดแท็ก ในมือข้างหนึ่งก็เป็นเทคนิคที่มีประสิทธิภาพ แต่ในอีก
มือก็มีข้อเสียของมัน ในรายงานฉบับนี้เรานำเสนอการพัฒนาของ aptamer ssDNA ที่ไม่ซ้ำกัน
สำหรับการทำให้บริสุทธิ์ของ His3 ติดแท็กโปรตีน การศึกษาของเราแสดงให้เห็นว่าเสถียรภาพของ His3-
Tag / H3T aptamer ซับซ้อนสามารถควบคุมได้โดยความเข้มข้นของโซเดียมไอออน ขึ้นอยู่กับคุณลักษณะนี้เรา
แสดงให้เห็นว่าเรซิน H3T aptamer ถูกจ้างมาประสบความสำเร็จในการทำให้บริสุทธิ์ของสามในสี่
ทดสอบโปรตีน His3 แท็กจากเชื้อ E. coli สารสกัดจากโปรตีนรวมใช้บัฟเฟอร์ imidazole ฟรี.
สุดท้ายเราแสดงให้เห็นว่าความบริสุทธิ์ของ His3 ติดแท็กโปรตีนจะดีกว่าเมื่อบริสุทธิ์ด้วยความช่วยเหลือของ
aptamer H3T ในการเปรียบเทียบกับ Ni-NTA resinhed ด้วยความช่วยเหลือ
ของแท็กของเขา / ระบบ IMAC

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การตรึงโลหะไอออน affinity chromatography ( iMac ) ถูกใช้อย่างกว้างขวางสำหรับการทำให้บริสุทธิ์ของที่แตกต่างกันมากhis6 แท็กโปรตีนรีคอมบิแนนท์ . ในมือข้างหนึ่ง มันเป็นเทคนิคที่มีประสิทธิภาพ แต่ในอื่น ๆมือมันมีข้อเสียของมัน ในรายงานนี้ได้เสนอการพัฒนา aptamer ssdna เฉพาะสำหรับการทำให้บริสุทธิ์ของ his3 แท็กโปรตีนรีคอมบิแนนท์ . การศึกษาของเราแสดงให้เห็นว่าเสถียรภาพของ his3 -แท็ก / h3t aptamer ซับซ้อนสามารถควบคุมได้โดยโซเดียมไอออนเข้มข้น . ขึ้นอยู่กับคุณลักษณะ นี้ เราแสดงให้เห็นว่า h3t aptamer เรซินได้ใช้สำหรับการทำให้บริสุทธิ์ของทั้งสามออกจากสี่ทดสอบ his3 แท็กรีคอมบิแนนท์โปรตีนจากเชื้อ E . coli รวมโปรตีนสกัดโดยใช้อิมิดาโซลบัฟเฟอร์ฟรีสุดท้ายเราแสดงให้เห็นว่าความบริสุทธิ์ของ his3 แท็กโปรตีนจะดีกว่า เมื่อบริสุทธิ์ ด้วยความช่วยเหลือของh3t aptamer เปรียบเทียบกับผมค้าขาย resinhed ด้วยความช่วยเหลือของของเขาแท็ก / iMac ระบบ