PCR thermocycling (conducted in TPr

PCR thermocycling (conducted in TProfessional standard thermocycler; Biometra GmbH) conditions were as follows: 95 °C for 5 min; 35 cycles of 95 °C for 60 s, 56–62 °C (depending on Tm of the primer pair) for 45 s and 72 °C for 45 s; and a final step of 72 °C for 5 min.
Then 5 μl aliquots of the amplicons were digested with 5 U of the appropriate restriction endonuclease in a 10 μl reaction volume at 37 °C for 3 h. A 5 μl aliquot from each of the reaction mixture was analyzed by 3% agarose gel-electrophoresis, and the DNA fragments were stained with ethidium bromide and visualized under UV light.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เทอร์โม゚ PCR (ดำเนินการใน TProfessional มาตรฐาน thermocycler Biometra GmbH) เงื่อนไขมีดังนี้: 95 ° C เป็นเวลา 5 นาที รอบ 35 95 ° c 60 s, 56-62 ° C (ขึ้นอยู่กับ Tm ของคู่ไพรเมอร์) สำหรับ s และ 72 ° C สำหรับ 45 45 s และขั้นสุดท้ายของ 72 ° C เป็นเวลา 5 นาที แล้ว 5 aliquots μl ของ amplicons ถูกย่อยสลาย ด้วย 5 U ของ endonuclease จำกัดที่เหมาะสมในโวลุ่มปฏิกิริยา μl 10 ที่ 37 ° C เป็นเวลา 3 ชม Μl 5 ทั้งจากของผสมปฏิกิริยาถูกวิเคราะห์ โดย 3% agarose เจอิ และชิ้นส่วนดีเอ็นเอถูกย้อม ด้วยโบรไมด์ ethidium ดู และภายใต้แสงยูวี

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

PCR thermocycling (ดำเนินการใน TProfessional thermocycler มาตรฐาน Biometra GmbH) เงื่อนไขมีดังนี้ 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที; 35 รอบจาก 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 60 วินาที, 56-62 ° C (ขึ้นอยู่กับ Tm คู่ไพรเมอร์) 45 และ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 45 วินาที และขั้นตอนสุดท้ายของ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที.
แล้ว 5 aliquots ไมโครลิตรของ amplicons ถูกย่อยด้วย 5 U ของ endonuclease ข้อ จำกัด ที่เหมาะสมในปริมาณ 10 ไมโครลิตรปฏิกิริยาที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 ชั่วโมง หาร 5 ไมโครลิตรจากแต่ละผสมปฏิกิริยาถูกวิเคราะห์โดย 3% agarose เจลอิเลคและชิ้นส่วนดีเอ็นเอถูกย้อมด้วย ethidium bromide และมองเห็นภายใต้แสงยูวี