Cell counting is a common technique

Cell counting is a common technique in cellular and molecular biology research applications,
such as cell culture maintenance, cell plating, cell growth and cell doubling time
determinations, as well as cell proliferation and cytotoxicity measurements. Many commonly
employed cell counting methods exhibit limitations that influence resulting accuracy
or versatility. For example, the trypan blue method typically underestimates cell
numbers in culture, and the Lowry protein assay can be influenced by cell cycle. An urgent
need exists for a method of cell counting that is both accurate and versatile. This work
intended to explore an adaptation of the methylene blue assay to overcome the existing
limitations of the procedure, enabling application to a broader range of cell densities and
various cell culture plates. This new methylene blue assay was found to be more efficient,
accurate and sensitive. A linear relationship (r
2 > 0.99) was established between cell number
and absorbance at 570 nm wavelength when the new methylene blue assay was applied
to three cell lines (HepG2, Caco-2, and MCF-7) plated in a broad range of cell densities
(5 · 104 to 2.5 · 106
) in four different types of culture plates (6-, 12-, 24-, and 96-well plates).
Growth curves were determined using both the trypan blue and methylene blue methods.
At each time point in the HepG2 growth curve, the cell count obtained using the trypan blue
assay was statistically significantly lower than that obtained using the methylene blue
assay (p < 0.05). The same was true for the Caco-2 growth curve at all time points
(p < 0.05) except at the 0 h. The methylene blue method proposed in this paper may serve
as a direct, automated counting method for cells grown in any type of culture plates. This
assay has clear advantages over traditional methods and is a powerful tool for any application
requiring a versatile, efficient, and accurate method of cell counting, such as bioavailability
and cytotoxicity assays, and more basic experiments such as cell growth curve or
doubling time determination, especially in the research of natural products, bioactive compounds,
phytochemicals, functional foods and nutraceuticals

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การนับเซลล์เป็นเทคนิคทั่วไปในเซลล์และอณูชีววิทยาวิจัยประยุกต์เช่นการบำรุงรักษาวัฒนธรรมของเซลล์ เซลล์ชุบ เติบโตของเซลล์ และเซลล์เสแสร้งครั้งวิเคราะห์ปริมาณ ตลอดจนการวัดเซลล์เจริญเติบโตและเป็นพิษ หลายทั่วไปส่วนเซลล์จำกัดจัดแสดงวิธีการที่มีอิทธิพลต่อความแม่นยำของผลการตรวจนับหรือความคล่องตัว ตัวอย่างเช่น วิธี trypan blue ปกติ underestimates เซลล์ตัวเลขในวัฒนธรรม และการ Lowry โปรตีน assay สามารถแก้ไขได้ โดยรอบเซลล์ การเร่งด่วนต้องมีอยู่สำหรับวิธีการนับเซลล์ที่มีทั้งถูกต้อง และหลากหลาย งานนี้วัตถุประสงค์เพื่อสำรวจการปรับตัวของทดสอบเมทิลีสีน้ำเงินจะเอาชนะที่มีอยู่ข้อจำกัดของกระบวนการ การเปิดใช้งานการประยุกต์ของความหนาแน่นของเซลล์ และวัฒนธรรมต่าง ๆ เซลล์แผ่น พบทดสอบเมทิลีฟ้าใหม่นี้จะมีประสิทธิภาพมากขึ้นแม่นยำ และมีความสำคัญ ความสัมพันธ์เชิงเส้น (r2 > 0.99) ก่อตั้งขึ้นระหว่างหมายเลขของเซลล์และค่าที่ยาวคลื่น 570 nm เมื่อทดสอบบลูเมทิลีใหม่ถูกนำไปใช้รายการสามเซลล์ (HepG2, Caco-2 และ MCF-7) ชุบในหลากหลายของความหนาแน่นของเซลล์(· 5 · 104 2.5 106) ในสี่ประเภทของวัฒนธรรมแผ่น (6- 12- 24- และจาน 96 หลุม)กราฟการเติบโตถูกใช้ทั้ง trypan blue และวิธีเมทิลีสีน้ำเงินเวลาแต่ละจุดในโค้ง HepG2 เติบโต การนับจำนวนเซลล์ที่ใช้ trypan blueทดสอบได้อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติต่ำกว่าที่ใช้เมทิลีสีน้ำเงินทดสอบ (p < 0.05) เดียวกันเป็นจริงสำหรับกราฟการเติบโต Caco-2 ในทุกเวลา(p < 0.05) ยกเว้นที่ 0 h วิธีเมทิลีสีน้ำเงินที่นำเสนอในเอกสารนี้อาจให้บริการเป็นตรง อัตโนมัตินับวิธีสำหรับเซลล์ที่เติบโตในทุกประเภทของวัฒนธรรมแผ่น นี้ทดสอบมีข้อได้เปรียบที่ชัดเจนกว่าวิธีการดั้งเดิม และเป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพสำหรับโปรแกรมประยุกต์ใด ๆต้องใช้วิธีการหลากหลาย มีประสิทธิภาพ และต้องการตรวจนับเซลล์ เช่นการดูดซึมและ assays เป็นพิษ และการทดลองพื้นฐานเช่นกราฟการเติบโตของเซลล์ หรือจะกำหนดเวลา โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการวิจัยผลิตภัณฑ์ธรรมชาติ สารออกฤทธิ์ทางชีวภาพสารอาหารจากพืช อาหารทำงานและสิน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

นับเซลล์เป็นเทคนิคทั่วไปในการใช้งานการวิจัยทางชีววิทยาของเซลล์และโมเลกุล
เช่นการบำรุงรักษาการเพาะเลี้ยงเซลล์, ชุบเซลล์เจริญเติบโตของเซลล์และเซลล์เสแสร้งเวลา
พิจารณาเช่นเดียวกับการเพิ่มจำนวนเซลล์และการวัดความเป็นพิษ หลายคนทั่วไป
ลูกจ้างข้อ จำกัด วิธีการนับเซลล์จัดแสดงที่มีอิทธิพลส่งผลให้เกิดความถูกต้อง
หรือความเก่งกาจ ตัวอย่างเช่นวิธีฟ้า Trypan มักจะดูถูกเซลล์
ตัวเลขในวัฒนธรรมและการทดสอบโปรตีนโลว์รีย์สามารถได้รับอิทธิพลจากวัฏจักรของเซลล์ เร่งด่วน
จำเป็นที่จะต้องมีอยู่สำหรับวิธีการนับเซลล์ที่มีทั้งที่ถูกต้องและอเนกประสงค์ งานนี้
มีจุดมุ่งหมายเพื่อสำรวจการปรับตัวของการทดสอบสีฟ้าเมทิลีนที่จะเอาชนะที่มีอยู่
ข้อ จำกัด ของขั้นตอนการเปิดใช้งานการประยุกต์ใช้กับช่วงกว้างของความหนาแน่นของเซลล์และ
จานเพาะเลี้ยงเซลล์ต่างๆ ใหม่นี้ทดสอบสีฟ้าเมทิลีนก็พบว่ามีประสิทธิภาพมากขึ้น
ที่ถูกต้องและมีความละเอียดอ่อน ความสัมพันธ์เชิงเส้น (R
2> 0.99) ก่อตั้งขึ้นระหว่างจำนวนเซลล์
และการดูดกลืนแสงที่ 570 นาโนเมตรความยาวคลื่นใหม่เมื่อทดสอบสีฟ้าเมทิลีนถูกนำมาใช้
ถึงสามสายพันธุ์เซลล์ (HepG2, Caco-2 และ MCF-7) ชุบในความหลากหลายของ ความหนาแน่นของเซลล์
(5 · 104-2.5 · 106
) ในสี่ประเภทที่แตกต่างกันของแผ่นเปลือกโลกวัฒนธรรม (6-, 12, 24, และแผ่น 96 หลุม)
เส้นโค้งการเจริญเติบโตได้รับการพิจารณาโดยใช้ทั้งสีฟ้าและ Trypan เมทิลีนวิธีการสีฟ้า
ในแต่ละจุดเวลาในอัตราการเจริญเติบโต HepG2 นับเซลล์ที่ได้รับโดยใช้สีฟ้า Trypan
การทดสอบทางสถิติอย่างมีนัยสำคัญต่ำกว่าที่ได้ใช้เมทิลีนสีฟ้า
ทดสอบ (p <0.05) เดียวกันเป็นจริงสำหรับ Caco-2 การเจริญเติบโตของเส้นโค้งที่ทุกจุดเวลา
(p <0.05) ยกเว้นที่ 0 ชั่วโมง วิธีการสีฟ้าเมทิลีนที่นำเสนอในบทความนี้อาจจะทำหน้าที่
เป็นตรงวิธีการนับอัตโนมัติสำหรับเซลล์ที่ปลูกในรูปแบบของแผ่นวัฒนธรรมใด ๆ นี้
การทดสอบมีข้อได้เปรียบที่ชัดเจนกว่าวิธีการแบบดั้งเดิมและเป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพสำหรับโปรแกรมใด ๆ
ที่ต้องใช้วิธีการที่หลากหลายและมีประสิทธิภาพและถูกต้องของการนับเซลล์เช่นการดูดซึม
และเป็นพิษต่อการตรวจและการทดลองขั้นพื้นฐานมากขึ้นเช่นอัตราการเจริญเติบโตของเซลล์หรือ
การกำหนดเวลาเป็นสองเท่า โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการวิจัยของผลิตภัณฑ์ธรรมชาติ, สารออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่
phytochemicals อาหารทำงานและผลิตภัณฑ์เสริมอาหาร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การนับจำนวนเซลล์เป็นเทคนิคทั่วไปในระดับเซลล์และโมเลกุลการใช้งานวิจัยชีววิทยาเช่นการบำรุงรักษา , การเพาะเลี้ยงเซลล์ผิวเซลล์ เซลล์เจริญเติบโต และเซลล์ เพิ่มเวลาใช้เช่นเดียวกับการต่อเซลล์และการวัด . หลายโดยทั่วไปใช้นับเซลล์วิธีการแสดงข้อจำกัดที่มีอิทธิพลต่อผลความถูกต้องหรือความคล่องตัว ตัวอย่างเช่น ไตรแพนสีฟ้าวิธีโดยปกติ underestimates เซลล์ตัวเลขในวัฒนธรรม และโลว์รีย์โปรตีน assay สามารถได้รับอิทธิพลจากวัฏจักรของเซลล์ เร่งด่วนต้องมีวิธีการนับเซลล์ที่เป็นทั้งถูกต้อง และเอนกประสงค์ งานนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาการปรับตัวของเมธิลีนบลู assay เพื่อเอาชนะที่มีอยู่ข้อจำกัดของกระบวนการให้ใช้ช่วงของความหนาแน่นเซลล์จานเพาะเลี้ยงเซลล์ต่าง ๆ นี้สีฟ้าใหม่ assay พบว่ามีประสิทธิภาพมากขึ้นถูกต้อง และที่สําคัญ ความสัมพันธ์เชิงเส้น ( อาร์2 > 0.99 ) ก่อตั้งขึ้นระหว่างเซลล์จำนวนค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่นและ 570 นาโนเมตรเมื่อสีฟ้าใหม่โดยประยุกต์สามเส้นเซลล์มะเร็งตับ caco-2 , และ mcf-7 ) ชุบในช่วงกว้างของเซลล์ลดลง5 ด้วย 2.5 ด้วย 106 104) ใน 4 ประเภทที่แตกต่างกันของแผ่นวัฒนธรรม ( 6 - 12 - 24 - และ 96 ดีจาน )เส้นโค้งการเจริญเติบโต คือ การพิจารณาทั้ง 4 วิธีการไตรแพนสีฟ้าและสีน้ำเงินในแต่ละจุดเวลาในการเจริญเติบโตของเซลล์มะเร็งตับ โค้ง นับได้โดยใช้ไตรแพนสีฟ้าการทดสอบอย่างมีนัยสำคัญน้อยกว่าที่ได้รับโดยใช้เมทิลีนบลูการทดสอบทางสถิติ ( P < 0.05 ) เดียวกันเป็นจริงสำหรับเส้นโค้งการเติบโต caco-2 จุดตลอดเวลาอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ ( P < 0.05 ) ยกเว้นที่ 0 H , เมทิลีนบลูในกระดาษนี้อาจใช้วิธีเสนอโดยตรงโดยอัตโนมัตินับวิธีสำหรับเซลล์ที่ปลูกในชนิดของแผ่นวัฒนธรรมใด ๆ นี้โดยมีข้อดีที่ชัดเจนกว่าวิธีแบบดั้งเดิม และเป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพสำหรับโปรแกรมใด ๆให้หลากหลายมีประสิทธิภาพและวิธีการที่ถูกต้องของการเซลล์นับ เช่นความเป็นพิษและเลือด และเพิ่มเติมพื้นฐานการทดลอง เช่น เส้นโค้งการเจริญเติบโตของเซลล์หรือเพิ่มการกำหนดเวลา โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการวิจัยผลิตภัณฑ์ธรรมชาติ , สารออกฤทธิ์ทางชีวภาพ ,การทำงานและ nutraceuticals phytochemicals , อาหาร