วัฒนธรรมเซลล์<br>เซลล์โมโนนิวเคลียร์ (PBMC) แยกออกจากผู้บริจาคสุขภาพโดยใช้<br>โซลูชั่น lymphoprep™ (Nycomed Pharma AS, ดรัมเมนสวีน, นอร์เวย์).<br><br>สายเซลล์ CCA มนุษย์ CL-6<br>มีวัฒนธรรมใน RPMI1640 กลางเสริมด้วย 10% (v/v) ร้อนซีรั่มทารกในครรภ์ (FBS), และ 1%<br>ของ 100 IU/ ml ของยาปฏิชีวนะ antimycotic โซลูชั่น (Gibco, แกรนด์ไอส์แลนด์, นิวยอร์ก, สหรัฐอเมริกา) ภายใต้บรรยากาศ 5% CO2<br>และความชื้น 95% (37oC)<br><br>PBMC ถูกเพาะเลี้ยงและรักษาไว้เป็น CL-6 เซลล์<br><br>CL-6 และ PBMC ได้สัมผัสกับสารสกัดจากชาติพันธุ์น้ํามันดิบของเหง้า KG, EPMC และ 5-FU ที่<br>ความเข้มข้นต่างๆ เช่น 1.95, 3.9, 7.8, 15.6, 31.25, 62.5, 125, 250, 500 และ 1,000 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรใน 96 ดี<br>แผ่นไมโครไทเตอร์<br><br>กิจกรรมพิษถูกกําหนดโดยใช้ MTT ทดสอบ. สั้น ๆ CL-6 (10,000 เซลล์) และ<br>PBMC (200,000 เซลล์) ถูกชุบในแต่ละดีของแผ่น 96 ดีและบ่มสําหรับ 24 ชั่วโมง.<br><br>เซลล์<br>แต่ละวัสดุทดสอบเป็นเวลา 48 ชั่วโมง<br><br>หลังจากการบ่ม 48 ชั่วโมง, 20 ไมโครลิตร 5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร MTT<br>reagent (Sigma - Aldech, เซนต์หลุยส์, MO, USA) ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละดีและเซลล์ได้ต่อไป<br>บ่มสําหรับเพิ่มเติม 4 ชั่วโมงก่อนที่จะเพิ่ม dimethyl ซัลโฟไซ (DMSO: 100 ไมโครลิตร)<br><br>แผ่น<br>ถูกทิ้งไว้ที่อุณหภูมิห้อง (25 °C) ในห้องมืดเป็นเวลา 15 นาที<br><br>จากนั้นการดูดซึมของ formazan ถูก<br>วัดที่ 570 nm โดย Varioskan แฟลชอ่าน (เทอร์โมฟิชเชอร์วิทยาศาสตร์อิงค์, ร็อคฟอร์ด, IL, USA)<br>สุดท้ายข้อมูลที่ถูกคํานวณโดย CalcuSyn รุ่น 1.1 (Biosoft, เคมบริดจ์สหราชอาณาจักร)<br><br>สารสกัดจาก KG ได้รับการประเมินสําหรับเนื้อหาของสารประกอบเครื่องหมาย ethyl-p-เมท็อกซิซินนาเมต<br>(EPMC) โดยใช้ HPLC<br><br>ค่า IC50 ของวัสดุทดสอบทั้งหมดสําหรับเซลล์ CL-6 และ PBMC จะถูกนําเสนอในรูปที่ 2 การ<br>ค่า IC50 (ค่าเฉลี่ย ± SD) ของ EPMC, สารสกัด KG และการอ้างอิง 5-FU คือ 93.63 ± 22.34, 82.56 ± 24.89<br>และ 19.45 ± 12.37 ไมโครกรัม /มิลลิลิตร ตามลําดับสําหรับ CL-6 และ 96.14 ± 9.82, 227.87 ± 16.54 และ 502.14 ± 11.71μg/ml<br>(รูปที่ 2) ตามลําดับ<br><br>ผลลัพธ์แสดงรายละเอียดความปลอดภัยของ KG บนเซลล์ PBMC ที่มี IC50 สูง<br>ค่าและกิจกรรมยับยั้งปานกลางของกิโลกรัมและสารประกอบ epmc บน cl-6เซลล์<br><br>สอดคล้องกัน<br>ค่าดัชนี selectivity (SI) สําหรับ KG, EPMC และ 5-FU สารบน CL-6 เมื่อเทียบกับการควบคุมปกติ<br>5.36, 1.16 และ 11.71 ตามลําดับ<br><br>สรุปค่า IC50 และ SI ของ KG และ 5-<br>FU จะได้รับในตารางที่ 1 สารประกอบนี้ค่อนข้างเป็นพิษต่อ CL-6 ที่มีค่า IC50 น้อยกว่า<br>กว่า 100 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรซึ่งค่อนข้างโดดเด่นสําหรับโรคมะเร็งทนยาเสพติดสูงชนิดนี้<br><br>อย่างไรก็ตาม<br>การศึกษาโดยใช้สายเซลล์เดียวกัน (มหาวรสิริกุล et al., 2010) รายงานเฉลี่ย IC50 ของ 37.36 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรและ SI ของ<br>2.9 กับสารสกัดจากธาตุธรรมชาติของใบของกิโลกรัมของ<br><br>ในการศึกษาของเราเหง้าแห้งของ KG ได้รับเลือกให้<br>ตรวจสอบและสารสกัดจาก ethanolic ของเหง้ากิโลกรัมมีกิจกรรมที่เป็นพิษปานกลางกับ CCA<br>เซลล์ CL-6 กับ IC50 (ค่าเฉลี่ย ± SD) ของ 93.63 ± 22.34 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรและ SI จาก 5.36
การแปล กรุณารอสักครู่..
