2.3. Determination of CML in model muffins
The CML measuring method employed here is adapted from Peng et al. (2010). Following defatting, protein reduction, hydrolysis, and derivatization using o-phthaldialdehyde, CML determination was performed using a Waters Alliance high-performance liquid chromatography (HPLC System 600, Milord, MA, USA) with a fluorescence detector (Waters 474). The HPLC system was equipped with a Waters Sun Fire C18 column (150 × 4.6 mm, 5 μm; Milord, MA, USA). The flow rate was 1.0 ml/min and the injection volume was 10 μl. The mobile phases were acetate buffer and acetonitrile (9:1, v/v) (solvent A) and 50% acetonitrile (solvent B). Detection was at 340 nm (excitation) and 455 nm (emission). The peaks for CML-derivatives in the muffin samples were confirmed by comparison with an authentic sample of CML provided by PolyPeptide Laboratories France SAS (Strasbourg, France). Identified compounds were quantified using the external standard calibration procedure. The limit of detection (LOD) was 0.42 ng, the limit of quantification (LOQ) was 1.29 ng, the recovery of the analyte compared to the internal standard was ∼100% (SD = 10.03%), and the repeatability (method precision) was 3.65% (coefficient of variations).
2.3. Determination of CML in model muffins
The CML measuring method employed here is adapted from Peng et al. (2010). Following defatting, protein reduction, hydrolysis, and derivatization using o-phthaldialdehyde, CML determination was performed using a Waters Alliance high-performance liquid chromatography (HPLC System 600, Milord, MA, USA) with a fluorescence detector (Waters 474). The HPLC system was equipped with a Waters Sun Fire C18 column (150 × 4.6 mm, 5 μm; Milord, MA, USA). The flow rate was 1.0 ml/min and the injection volume was 10 μl. The mobile phases were acetate buffer and acetonitrile (9:1, v/v) (solvent A) and 50% acetonitrile (solvent B). Detection was at 340 nm (excitation) and 455 nm (emission). The peaks for CML-derivatives in the muffin samples were confirmed by comparison with an authentic sample of CML provided by PolyPeptide Laboratories France SAS (Strasbourg, France). Identified compounds were quantified using the external standard calibration procedure. The limit of detection (LOD) was 0.42 ng, the limit of quantification (LOQ) was 1.29 ng, the recovery of the analyte compared to the internal standard was ∼100% (SD = 10.03%), and the repeatability (method precision) was 3.65% (coefficient of variations).
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.3 ความมุ่งมั่นของ CML ในมัฟฟินรูปแบบ
วิธีการวัด CML ลูกจ้างที่นี่จะดัดแปลงมาจากเป็งและคณะ (2010) ต่อไปนี้การสูญเสียไขมันลดโปรตีนไฮโดรไลซ์และอนุพันธ์โดยใช้ o-phthaldialdehyde กำหนด CML ได้รับการดำเนินการโดยใช้น้ำพันธมิตรที่มีประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography (HPLC ระบบ 600, Milord, MA, USA) กับเครื่องตรวจจับการเรืองแสง (น้ำ 474) ระบบ HPLC พร้อมกับคอลัมน์ไฟน้ำอาทิตย์ C18 (150 × 4.6 มิลลิเมตร, 5 ไมครอน; Milord, MA, USA) อัตราการไหลเป็น 1.0 มล. / นาทีและปริมาณการฉีดคือ 10 ไมโครลิตร ขั้นตอนถือเป็นบัฟเฟอร์อะซิเตทและ acetonitrile (9: 1, v / v) (ตัวทำละลาย) และ 50% acetonitrile (ตัวทำละลาย B) การตรวจสอบอยู่ที่ 340 นาโนเมตร (กระตุ้น) และ 455 นาโนเมตร (ปล่อยก๊าซเรือนกระจก) สำหรับยอด CML อนุพันธ์ในตัวอย่างมัฟฟินได้รับการยืนยันโดยการเปรียบเทียบกับตัวอย่างที่แท้จริงของ CML ให้โดย Polypeptide ห้องปฏิบัติการ France SAS (Strasbourg, ฝรั่งเศส) สารประกอบระบุถูกวัดโดยใช้ขั้นตอนการสอบเทียบมาตรฐานภายนอก ขีด จำกัด ของการตรวจสอบ (LOD) เป็น 0.42 ศึกษา, ขีด จำกัด ของปริมาณ (LOQ) เป็น 1.29 ศึกษา, การฟื้นตัวของการวิเคราะห์เปรียบเทียบกับมาตรฐานภายในเป็น ~100% (SD = 10.03%) และการทำซ้ำ (แม่นยำวิธี) เป็น 3.65% (ค่าสัมประสิทธิ์ของการเปลี่ยนแปลง)
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.3 ความมุ่งมั่นของ CML ในมัฟฟินแบบ
CML วัดใช้วิธีการนี้ดัดแปลงมาจาก Peng et al . ( 2010 ) ต่อไปนี้ defatting โปรตีนลดการย่อย และการใช้ o-phthaldialdehyde CML ซัล , ตรวจสอบโดยใช้วิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ( พันธมิตรน้ำ 2 ระบบ 600 , นายท่าน , MA , USA ) กับการตรวจจับ ( น้ำมัน )ระบบ HPLC เป็นอุปกรณ์ที่มีน้ำ Sun Fire คอลัมน์ C18 150 × 4.6 มม. , 5 μ M ; นายท่าน , MA , USA ) อัตราการไหลเท่ากับ 1.0 มิลลิลิตร / นาทีและปริมาณการฉีดได้ 10 μลิตร ระยะเคลื่อนที่เป็นบัฟเฟอร์อะซิเตท และไน ( 9 : 1 v / v ) ( ตัวทำละลาย ) และ 50% ไน ( ตัวทำละลาย B ) ตรวจจับอยู่ที่ 340 nm ( กระตุ้น ) และ 455 nm ( มลพิษ )ยอดสำหรับ CML อนุพันธ์ในมัฟฟินจำนวนยืนยันโดยการเปรียบเทียบกับตัวอย่างจริงของ CML โดย polypeptide ห้องปฏิบัติการฝรั่งเศส SAS ( Strasbourg , ฝรั่งเศส ) ระบุปริมาณสารที่ใช้สำหรับการสอบเทียบมาตรฐาน ขีดจำกัดของการตรวจหา ( LOD ) คือ 0.42 NG , ขีด จำกัด ของปริมาณ ( loq ) คือ 1.18 NG ,การฟื้นตัวของครูเมื่อเทียบกับมาตรฐานภายใน∼ 100% ( SD = 10.03 % ) และกาล ( วิธีการที่แม่นยำ ) คือ 3.65 % ( ค่าสัมประสิทธิ์ของความผันแปร )
การแปล กรุณารอสักครู่..
