Agrobacterium tumefaciens-mediated

Agrobacterium tumefaciens-mediated genetic transformation is a powerful tool for plant research, but it
can be labor-intensive and time-consuming.Here, we report a protoplast-based approach to study
nucleo-cytoplasmic interactions, such as cytoplasmic male sterility/fertility restoration (CMS/Rf) and
organellar RNA editing.To test the system, we transfected the fertility restorer gene Rf5, which is involved
in the rice HL-CMS/Rf system, into rice protoplasts prepared from the HL-CMS line. As the Rf5 protein
accumulated in the transformed protoplasts, the CMS-associated transcripts were endonucleolytically
cleaved. There were much lower levels of the CMS-associated protein ORFH79 in the transfected protoplasts than in the mock-transfected protoplasts. Next, we used a dsRNA-mediated gene silencing approach
to down-regulate the pentatricopeptide protein gene MPR25, which participates in RNA editing of the
organellar transcript nad5. The editing efficiency of mitochondrial transcripts of nad5 at nucleotide
1580 was much lower in the transfected protoplasts than in the mock-transfected protoplasts. Together,
these results show that protoplast is a simple and efficient system to study interactions between the
nucleus and organelles.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Tumefaciens mediated อโกรแบคทีเรียมแปลงพันธุกรรมเป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพสำหรับโรงงานวิจัย แต่ได้ใช้เวลานาน และ labor-intensiveที่นี่ เรารายงานวิธีการใช้ protoplast ศึกษาโต้ nucleo cytoplasmic เช่น cytoplasmic ชาย sterility/ความ อุดมสมบูรณ์คืน (CMS Rf) และorganellar อาร์เอ็นเอแก้ไขการทดสอบระบบ เรา transfected ยีน restorer อุดมสมบูรณ์ Rf5 ซึ่งเกี่ยวข้องกับในข้าว HL-ซ.ม./Rf ระบบ เป็นโปข้าวเตรียมต้น HL CMS เป็นโปรตีน Rf5สะสมในโปแปรรูป ใบแสดงผลการเชื่อมโยง CMS ได้ endonucleolyticallyแหวก มีมากระดับล่างเกี่ยวข้องซ.ม.โปรตีน ORFH79 ในโป transfected กว่าในโป mock transfected ถัดไป เราใช้ยีน dsRNA mediated ที่ silencing วิธีการลงควบคุมการ pentatricopeptide ยีน MPR25 ซึ่งมีส่วนร่วมในการแก้ไขของอาร์เอ็นเอเสียงบรรยาย organellar nad5 Efficiency แก้ไขของ mitochondrial ใบแสดงผลของ nad5 ที่นิวคลีโอไทด์1580 ต่ำมากในโป transfected กว่าในโป mock transfected ร่วมกันผลเหล่านี้แสดงว่า protoplast เป็นระบบง่ายและ efficient การศึกษาระหว่างนิวเคลียสและ organelles

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Agrobacterium tumefaciens พึ่งการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมเป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพสำหรับการวิจัยพืช แต่ก็
สามารถที่จะใช้แรงงานเข้มข้นและ time-consuming.Here เรารายงานวิธีการใช้โปรโตพลาเพื่อศึกษา
ปฏิสัมพันธ์ Nucleo-นิวเคลียสเช่นหมันนิวเคลียสชาย / ฟื้นฟูความอุดมสมบูรณ์ (CMS / Rf) และ
อาร์เอ็นเอ organellar editing.To ทดสอบระบบเรา transfected Rf5 ยีนเดิมอุดมสมบูรณ์ซึ่งมีส่วนเกี่ยวข้อง
ในข้าว HL-CMS / ระบบ Rf เข้าไป protoplasts ข้าวจัดทำขึ้นจากเส้น HL-CMS ในฐานะที่เป็นโปรตีน Rf5
สะสมใน protoplasts เปลี่ยนจิตบำบัด CMS ที่เกี่ยวข้องถูก endonucleolytically
ตัด มีระดับที่ต่ำกว่ามากของโปรตีน ORFH79 CMS ที่เกี่ยวข้องใน protoplasts transfected กว่าใน protoplasts จำลอง transfected ต่อไปเราจะใช้วิธีการสมรยีน dsRNA พึ่ง
จะลงควบคุม MPR25 ยีนโปรตีน pentatricopeptide ซึ่งมีส่วนร่วมในการแก้ไขอาร์เอ็นเอของ
NAD5 หลักฐาน organellar ประสิทธิภาพในการแก้ไข EF Fi ของจิตบำบัดยลของ NAD5 ที่เบื่อหน่าย
1580 เป็นที่ต่ำกว่ามากใน protoplasts transfected กว่าใน protoplasts จำลอง transfected ร่วมกัน
ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่าโปรโตพลาเป็นไฟที่ง่ายและ EF ระบบเพียงพอที่จะศึกษาปฏิสัมพันธ์ระหว่าง
นิวเคลียสและ organelles

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

Agrobacterium tumefaciens ) การถ่ายทอดทางพันธุกรรมเป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพสำหรับการวิจัยพืช แต่มันสามารถใช้แรงงาน และ time-consuming.here
เรารายงานโปรตามแนวการศึกษา
นิวคลีโอพบปฏิสัมพันธ์ เช่น ไซโตเพศผู้เป็นหมัน / ฟื้นฟูความอุดมสมบูรณ์ ( CMS / RF ) และ
rna แก้ไข organellar เพื่อทดสอบระบบ เรา transfected ความอุดมสมบูรณ์ดังเดิม rf5 ยีน ,ซึ่งเกี่ยวข้องกับ
ในข้าว hl-cms / RF ระบบเอนไซม์ในข้าวที่เตรียมจาก hl-cms บรรทัด เป็นโปรตีน rf5
สะสมในแปลงเอนไซม์ , CMS ที่เป็น endonucleolytically
transcripts ของ . มีที่ต่ำกว่าระดับของ CMS ที่ orfh79 โปรตีนใน transfected เหมาะสมกว่าในเยาะเย้ย transfected พลาสต์ . ต่อไปเราใช้ dsRNA โดยยีนไซเลนซิงเข้าหา
เพื่อลงควบคุม pentatricopeptide โปรตีนยีน mpr25 ซึ่งมีส่วนร่วมในการแก้ไขของ
organellar หลักฐาน nad5 RNA การแก้ไขประสิทธิภาพของการถ่ายทอดยีนของ EF ที่ nad5 นิวคลีโอไทด์
977 ต่ำกว่ามากใน transfected เหมาะสมกว่าในเยาะเย้ย transfected พลาสต์ . ด้วยกัน
พบว่าโปรโตพลาสต์เป็นง่ายและ EF จึง cient ระบบเพื่อศึกษาปฏิสัมพันธ์ระหว่าง
นิวเคลียสและออร์แกเนลล์ .