Previous studies revealed that glio

Previous studies revealed that glioblastoma multiforme (GBM), the highest grade of astrocytoma, has many supplied vessels and destroy blood brain barrier of adjacent vessels. In addition, hypoxia and acidosis in glioma could up-regulate the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF), a key angiogenic factor that regulate the expression of cellular factors in angiogenesis. In adult, VEGF is low in both neuron and glial cell, while VEGFR is found in endothelial cell. However, the VEGF and VEGFR-2 are up-regulated in glioma cells. For gene expression level, VEGF and VEGFR -2 are regulated by nuclear factor activated T cells (NFAT). NFAT is a transcription factor, which is regulated by calcium-dependent proteins such as calcineurin, calmodulin, and calbindin. These proteins activate NFAT via dephosphorylation resulting in nuclear translocation to bind to targeting DNA sequence. This study aim to demonstrate whether NFAT could regulate the angiogenesis by modulation of VEGF and VEGFR-2 expression in glioma cell lines. Rat C6 cell lines were cultured and divided into 4 groups included calcium influx inducer (ionomycin) treatment, intracellular calcium chelator (BAPTA-AM) treatment, calcineurin inhibitor (cyclosporin A), and control. These groups were determined expression level and localization of VEGF, VEGFR-2, and dephosphorylated-NFAT using western blotting and immunocytochemistry, respectively. In addition, the mRNA expression of VEGF and VEGFR-2 were measured by realtime reverse transcription polymerase chain reaction (realtime RT-PCR) to compare expression between protein and mRNA level.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การศึกษาก่อนหน้านี้เปิดเผยว่า glioblastoma multiforme (GBM), เกรดสูงสุดของ astrocytoma มีเรือให้มาก และทำลายอุปสรรคสมองเลือดของเรือที่อยู่ติดกัน นอกจากนี้ hypoxia และ acidosis ใน glioma สามารถขึ้นควบคุมค่าของหลอดเลือดบุผนังหลอดเลือดเจริญเติบโตปัจจัย (VEGF), ตัว angiogenic คีย์ที่ควบคุมค่าของปัจจัย angiogenesis โทรศัพท์มือถือ ในผู้ใหญ่ VEGF มีน้อยในเซลล์ประสาทและเซลล์ glial ในขณะที่ VEGFR มีอยู่ในเซลล์บุผนังหลอดเลือด อย่างไรก็ตาม VEGF และ VEGFR-2 ได้กำหนดขึ้นใน glioma เซลล์ ในระดับยีนนิพจน์ VEGF และ VEGFR -2 ถูกควบคุม โดยปัจจัยนิวเคลียร์ใช้ T เซลล์ (NFAT) NFAT เป็นปัจจัย transcription ซึ่งจะถูกกำหนด โดยขึ้นอยู่กับแคลเซียมโปรตีนเช่น calcineurin, calmodulin และ calbindin โปรตีนเหล่านี้เปิดใช้งาน NFAT ผ่าน dephosphorylation ในการสับเปลี่ยนนิวเคลียร์ไปผูกกับเป้าหมายลำดับดีเอ็นเอ นี้มุ่งศึกษาเพื่อสาธิตว่า NFAT สามารถควบคุมการ angiogenesis โดยเอ็ม VEGF และ VEGFR 2 นิพจน์ในบรรทัด glioma เซลล์ รายการเซลล์ C6 หนูมีอ่าง และแบ่งออกเป็น 4 กลุ่มรวมแคลเซียมอีก inducer (ionomycin) รักษา แคลเซียม intracellular chelator (ชัชชัย-AM) รักษา calcineurin ผล (cyclosporin A), และการควบคุม กลุ่มเหล่านี้ถูกกำหนดนิพจน์ระดับและแปล VEGF, VEGFR-2, dephosphorylated-NFAT ใช้ blotting วิธีเวสเทิร์น และ immunocytochemistry ตามลำดับ นอกจากนี้ นิพจน์ mRNA VEGF และ VEGFR-2 ถูกวัด โดยเรียลไทม์ transcription กลับพอลิเมอเรสปฏิกิริยาลูกโซ่ (เรียลไทม์ RT-PCR) เพื่อเปรียบเทียบนิพจน์ระหว่างระดับ mRNA และโปรตีน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ศึกษาก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่า multiforme glioblastoma (GBM) สูงสุดที่ระดับของ astrocytoma มีเรือให้มาจำนวนมากและทำลายอุปสรรคเลือดสมองของเรือที่อยู่ติดกัน นอกจากนี้การขาดออกซิเจนและดิสก์ใน Glioma สามารถขึ้นควบคุมการแสดงออกของปัจจัยการเจริญเติบโตของหลอดเลือดหลอดเลือด (VEGF) เป็นปัจจัยเส้นเลือดสำคัญที่ควบคุมการแสดงออกของปัจจัยโทรศัพท์มือถือในเจเนซิส ในผู้ใหญ่ VEGF อยู่ในระดับต่ำทั้งในเซลล์ประสาทและเซลล์ glial ขณะ VEGFR พบในเซลล์บุผนังหลอดเลือด อย่างไรก็ตาม VEGF และ VEGFR-2 จะขึ้นควบคุมในเซลล์ Glioma สำหรับระดับการแสดงออกของยีน, VEGF และ VEGFR -2 ถูกควบคุมโดยปัจจัยนิวเคลียร์เปิดใช้งานทีเซลล์ (NFAT) NFAT เป็นปัจจัยถอดความซึ่งถูกควบคุมโดยโปรตีนแคลเซียมขึ้นเช่น calcineurin, calmodulin และ calbindin โปรตีนเหล่านี้เปิดใช้งานผ่านทาง NFAT dephosphorylation ผลในการโยกย้ายนิวเคลียร์ที่จะผูกกับกำหนดเป้​​าหมายลำดับดีเอ็นเอ จุดมุ่งหมายของการศึกษาครั้งนี้แสดงให้เห็นว่าสามารถควบคุม NFAT เจเนซิสโดยปรับ VEGF และ VEGFR-2 การแสดงออกในเซลล์ Glioma หนู C6 เซลล์เพาะเลี้ยงและแบ่งออกเป็น 4 กลุ่มรวม inducer ไหลบ่าเข้ามาแคลเซียม (ionomycin) การรักษาธาตุแคลเซียมภายในเซลล์ (BAPTA-AM) การรักษายับยั้ง calcineurin (cyclosporin A) และการควบคุม กลุ่มคนเหล่านี้ได้รับการพิจารณาระดับการแสดงออกและการแปลของ VEGF, VEGFR-2 และ dephosphorylated-NFAT ใช้ซับตะวันตกและ immunocytochemistry ตามลำดับ นอกจากนี้การแสดงออกของ VEGF และ VEGFR-2 ถูกวัดโดยถอดความเรียลไทม์กลับโพลิเมอร์ปฏิกิริยาลูกโซ่ (เรียลไทม์ RT-PCR) เพื่อเปรียบเทียบการแสดงออกระหว่างโปรตีนและระดับ mRNA

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การศึกษาก่อนหน้านี้พบว่า เซลส์ multiforme ( GBM ) เกรดสูงสุดของชาวโปรตุเกส มีมากจัดเรือและทำลายอุปสรรคเลือดสมองของเส้นเลือดที่อยู่ติดกัน นอกจากนี้ การขาดออกซิเจนและกรดในเซลส์จะขึ้นควบคุมการแสดงออกในเซลล์บุผนังหลอดเลือดปัจจัยการเจริญเติบโต ( การศึกษา ) , คีย์ angiogenic ปัจจัยที่ควบคุมการแสดงออกขององค์ประกอบของเซลล์ในเจเนซิส ในผู้ใหญ่การศึกษาต่ำ ทั้งใน glial เซลล์ประสาท และเซลล์ ในขณะที่ vegfr พบในเซลล์เยื่อบุหลอดเลือด . อย่างไรก็ตาม การศึกษา และ vegfr-2 เป็นเซลส์คาเซลล์ ระดับการแสดงออกของยีนและการศึกษา , vegfr - 2 ถูกควบคุมโดยปัจจัยนิวเคลียร์กระตุ้นเซลล์ T ( nfat ) nfat เป็นถอดความปัจจัยซึ่งถูกควบคุมโดย แคลเซียม โปรตีน เช่น แคลซินิวรินแคลโมดูลิน ) , และ calbindin .โปรตีนเหล่านี้เปิดใช้งาน nfat ผ่านดีฟอ ฟริเลชันที่เกิดนิวเคลียร์โยกย้ายไปผูกกับเป้าหมายลำดับ DNA การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อแสดงให้เห็นว่า nfat สามารถควบคุมโดยการปรับของเจเนซิสและการแสดงออกในการศึกษา vegfr-2 เซลส์เซลล์เส้น หนู C6 เซลล์เพาะเชื้อ แบ่งออกเป็น 4 กลุ่ม ได้แก่ แคลเซียม น้ำเอนไซม์ ( ionomycin ) การรักษาภายในเซลล์ด้วยแคลเซียมคีเลเตอร์ ( bapta-am ) การรักษา แคลซินิวริน inhibitor ( โรงงาน ) และการควบคุม กลุ่มเหล่านี้ได้รับการพิจารณาระดับของการศึกษาการแสดงออกและการ vegfr-2 , และ dephosphorylated nfat ใช้ Western blotting และ immunocytochemistry ตามลำดับ นอกจากนี้การศึกษาการแสดงออกของ mRNA และวัดจาก vegfr-2 Realtime ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสแบบย้อนกลับ ( Realtime RT-PCR ) เปรียบเทียบการแสดงออกของโปรตีนและยีนระหว่างระดับ .