Edwardsiella ictaluri is a Gram-neg

Edwardsiella ictaluri is a Gram-negative facultative intracellular pathogen causing enteric septicemia of catfish (ESC). We have shown recently that tricarboxylic acid cycle (TCA) and one-carbon (C1) metabolism are involved in E. ictaluri pathogenesis. However, the effect of multiple mutations in these pathways is unknown. Here, we report four novel E. ictaluri mutants carrying double gene mutations in TCA cycle (EiΔmdhΔsdhC, EiΔfrdAΔsdhC), C1 metabolism (EiΔglyAΔgcvP), and both TCA and C1 metabolism pathways (EiΔgcvPΔsdhC). In-frame gene deletions were constructed by allelic exchange and mutants’ virulence and vaccine efficacy were evaluated using in vivo bioluminescence imaging (BLI) as well as end point mortality counts in catfish fingerlings. Results indicated that all the double gene mutants were attenuated compared to wild-type (wt) E. ictaluri. There was a 1.39-fold average reduction in bioluminescence, and hence bacterial numbers, from all the mutants except for EiΔfrdAΔsdhC at 144 h post-infection. Vaccination with mutants was very effective in protecting channel catfish against subsequent infection with virulent E. ictaluri 93-146 strain. In particular, immersion vaccination resulted in complete protection. Our results provide further evidence on the importance of TCA and C1 metabolism pathways in bacterial pathogenesis.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Edwardsiella ictaluri เป็นแกรมลบเซลล์เชื้อโรคที่ก่อให้เกิดภาวะโลหิตเป็นพิษตามอำเภอใจลำไส้ของปลาดุก (ESC) เราได้แสดงให้เห็นเร็ว ๆ นี้ว่าวงจรกรด tricarboxylic (TCA) และคาร์บอน (C1) การเผาผลาญอาหารมีส่วนร่วมในการเกิดโรคอี ictaluri อย่างไรก็ตามผลกระทบของการกลายพันธุ์ในหลาย ๆ ทางเดินเหล่านี้ไม่เป็นที่รู้จัก ที่นี่เรารายงานสี่นวนิยายอี ictaluri การกลายพันธุ์ของยีนกลายพันธุ์แบกคู่ในรอบ TCA (EiΔmdhΔsdhC, EiΔfrdAΔsdhC), การเผาผลาญอาหาร C1 (EiΔglyAΔgcvP) และทั้งสอง TCA C1 และวิถีการเผาผลาญอาหาร (EiΔgcvPΔsdhC) ในกรอบการลบยีนที่ถูกสร้างขึ้นโดยการแลกเปลี่ยน allelic และความรุนแรงก​​ลายพันธุ์และการรับรู้ความสามารถฉีดวัคซีนได้รับการประเมินโดยใช้การถ่ายภาพในร่างกายชีวิตเรืองแสง (BLI) เช่นเดียวกับจุดสิ้นสุดการนับอัตราการตายในลูกปลาดุก ผลการศึกษาพบว่าทุกการกลายพันธุ์ของยีนคู่ถูกยับยั้งเมื่อเทียบกับป่าประเภท (น้ำหนัก) อี ictaluri มีลดลงเฉลี่ย 1.39 เท่าในชีวิตเรืองแสงได้และจำนวนแบคทีเรียด้วยเหตุจากการกลายพันธุ์ทั้งหมดยกเว้นสำหรับEiΔfrdAΔsdhCที่ 144 ชั่วโมงหลังการติดเชื้อ การฉีดวัคซีนที่มีการกลายพันธุ์เป็นที่มีประสิทธิภาพมากในการปกป้องช่องดุกที่ตามมาจากการติดเชื้อที่มีความรุนแรงอี ictaluri 93-146 สายพันธุ์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งการฉีดวัคซีนแช่ผลในการป้องกันที่สมบูรณ์ ผลของเราให้หลักฐานเพิ่มเติมเกี่ยวกับความสำคัญของการ TCA C1 และวิถีการเผาผลาญอาหารในการเกิดโรคจากเชื้อแบคทีเรีย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

edwardsiella ictaluri เป็นแกรมลบ ก่อให้เกิดโลหิตเป็นพิษต่อเซลล์เชื้อโรคอยปลาดุก ( ESC ) เราได้แสดงให้เห็นเมื่อเร็ว ๆนี้ว่าวัฏจักรกรด tricarboxylic ( TCA ) และคาร์บอน ( C1 ) การเผาผลาญอาหารที่เกี่ยวข้องใน ictaluri พยาธิกำเนิด . อย่างไรก็ตาม ผลของการกลายพันธุ์ในหลาย ๆ แนวทางเหล่านี้ไม่เป็นที่รู้จัก ที่นี่เรารายงานสี่นวนิยายเช่นictaluri มนุษย์กลายพันธุ์พกคู่ยีนกลายพันธุ์ในรอบ TCA ( EI Δ MDH Δ SDHC , EI Δ frda Δ SDHC ) C1 เมแทบอลิซึม ( EI Δ glya Δ gcvp ) , และทั้งสองและการเผาผลาญเซลล์ C1 TCA ( EI Δ gcvp Δ SDHC )ในกรอบของยีนลบถูกสร้างโดยตรา allelic โรคและประสิทธิภาพของวัคซีนกลายพันธุ์ ' และประเมินการใช้ฤทธิ์ในไบโอลูมิเนสเซนภาพ ( BLI ) รวมทั้งสิ้นนับจุดตายในปลาดุก ลูกปลา . ผลการวิจัยพบว่า ทุกคู่มียีนกลายพันธุ์เป็นเมื่อเทียบกับยา ( WT ) เช่น ictaluri . มีการลดลงเฉลี่ยในไบโอลูมิเนสเซน 1.39-fold ,ดังนั้นแบคทีเรียตัวเลขจากสายพันธุ์ทั้งหมดยกเว้นไม่Δ frda Δ SDHC ที่ 144 ชั่วโมงหลังการติดเชื้อ วัคซีนกับโคโลนีมีประสิทธิภาพมากในการปกป้องปลาดุกอุยกับการติดเชื้อรุนแรงตามมาด้วยเช่น ictaluri 93-146 สายพันธุ์ โดยเฉพาะวัคซีนป้องกันการแช่ผลสมบูรณ์ผลของเราให้หลักฐานเพิ่มเติมเกี่ยวกับความสำคัญของ TCA ในแบคทีเรียและการเผาผลาญเซลล์ C1
เกิด .