The protein solubilization of the films was determined according
to the method described by Mauri and Añón [36], with certain
modifications. Pieces of films (E50 mg) were weighed and placed
in a tube containing 1 ml of water or buffer. Five different buffer
systems, all at pH 7.5, were used: (a) 0.1 M phosphate buffer
containing 0.1 M NaCl (PB Buffer); (b) PBD Buffer: PB Buffer plus
0.1% (w/v) sodium dodecyl sulfate (SDS; Anedra, Argentina);
(c) PBU Buffer: PB Buffer plus 6 M urea (Riedel-deHaën, Germany);
(d) PBDU Buffer: PB Buffer plus 0.1% (w/v) SDS and 6 M urea, and
(e) PBDUM buffer: PB Buffer plus 0.1% (w/v) SDS, 6 M urea, and
2.5% (v/v) mercaptoethanol (ME, Sigma-Aldrich, Germany). After
the tubes were shaken for 24 h at 20 1C, the suspensions were
centrifuged at 9000g for 20 min and the protein content in the
supernatant determined by the Bradford assay [37]. Standard
curves with bovine-serum albumin (Sigma-Aldrich Chemical Co.,
St. Louis, MO, USA) were constructed for each buffer. For each type
of film, at least two samples from four independent film preparations
were solubilized. The content of solubilizable protein was
expressed as a percent of the total amount of protein in the film, as
measured by the Kjeldahl method (Association of Official Agricultural
Chemists [AOAC] 920.53)
ละลายโปรตีนของภาพยนตร์ที่ได้รับการกำหนดขึ้นมาตาม
วิธีที่อธิบายโดย Mauri และอานนท์ [36] มีบางอย่าง
การปรับเปลี่ยน ชิ้นส่วนของภาพยนตร์ (E50 มก.) ได้รับการชั่งน้ำหนักและวางไว้
ในหลอดที่มี 1 มิลลิลิตรของน้ำหรือบัฟเฟอร์ ห้าบัฟเฟอร์ที่แตกต่างกัน
ของระบบทั้งหมดที่พีเอช 7.5, ถูกนำมาใช้ (ก) 0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์
ความเข้มข้น 0.1 M NaCl (PB บัฟเฟอร์); (ข) PBD บัฟเฟอร์: PB บัฟเฟอร์บวก
0.1% (w / v) โซเดียมโดเดซิลซัลเฟต (SDS; Anedra, อาร์เจนตินา);
(c) PBU บัฟเฟอร์: PB บัฟเฟอร์บวก 6 M ยูเรีย (Riedel-Dehaen, เยอรมนี);
(ง) PBDU บัฟเฟอร์: PB บัฟเฟอร์บวก 0.1% (w / v) SDS และ 6 M ยูเรียและ
(จ) บัฟเฟอร์ PBDUM: PB บัฟเฟอร์บวก 0.1% (w / v) SDS, 6 M ยูเรียและ
2.5% (v / v) mercaptoethanol (ME, Sigma-Aldrich, เยอรมนี) หลังจากที่
หลอดถูกเขย่าเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่ 20 1C, สารแขวนลอยถูก
หมุนเหวี่ยงที่ 9000g เป็นเวลา 20 นาทีและปริมาณโปรตีนใน
สารละลายที่กำหนดโดยการทดสอบแบรดฟอ [37] มาตรฐาน
เส้นโค้งที่มีอัลบูมิวัวซีรั่ม (Sigma-Aldrich Chemical Co. ,
เซนต์หลุยส์, MO, USA) ถูกสร้างขึ้นสำหรับแต่ละบัฟเฟอร์ สำหรับแต่ละประเภท
ของภาพยนตร์อย่างน้อยสองตัวอย่างจากสี่เตรียมภาพยนตร์อิสระ
ถูกละลาย เนื้อหาของโปรตีน solubilizable ถูก
แสดงเป็นร้อยละของจำนวนเงินทั้งหมดของโปรตีนในภาพยนตร์เรื่องนี้เป็น
วัดโดยวิธี Kjeldahl (สมาคมอย่างเป็นทางการเกษตร
เคมี [AOAC] 920.53)
การแปล กรุณารอสักครู่..

การสกัดโปรตีนจากภาพยนตร์ที่ถูกกำหนดตาม
วิธีการอธิบายโดยเมารีและñó [ 36 ] , มีการปรับเปลี่ยนแน่นอน
ชิ้นส่วนของภาพยนตร์ ( e50 mg ) มีน้ำหนักและอยู่ในหลอดบรรจุ
1 มิลลิลิตรของน้ำ หรือ บัฟเฟอร์ 5 ระบบบัฟเฟอร์
ที่แตกต่างกันทั้งหมดที่ pH 7.5 , ใช้ ( ) 0.1 M phosphate buffer
ที่มี 0.1 M NaCl ( PB บัฟเฟอร์ ) ; ( b ) น้ำบัฟเฟอร์ : PB บัฟเฟอร์บวก
01% ( w / v ) โซเดียมโดเดซิลซัลเฟต ( SDS ; anedra , อาร์เจนตินา ) ;
( C ) pbu บัฟเฟอร์ : PB บัฟเฟอร์ พลัส 6 M ยูเรีย ( เดล deha . N , เยอรมนี ) ;
( D ) pbdu บัฟเฟอร์ : PB บัฟเฟอร์บวก 0.1% ( w / v ) SDS และ 6 M ยูเรีย และ
( E ) pbdum บัฟเฟอร์ : PB บัฟเฟอร์บวก 0.1% ( w / v ) t , 6 M ยูเรียและ
2.5 % ( v / v ) mercaptoethanol ( ฉัน ซิกม่า Aldrich , เยอรมัน ) หลังจาก
ท่อสั่นสะเทือนเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 20 c ,
สารแขวนลอยคือระดับที่ 9000g เป็นเวลา 20 นาทีและปริมาณโปรตีนใน
น่านกำหนดโดย Bradford assay [ 37 ] เส้นโค้งมาตรฐาน
กับอัลบูมิน ( ซิกม่า Aldrich Chemical Co . ,
St . Louis , MO , USA ) ได้ถูกสร้างขึ้นสำหรับแต่ละบัฟเฟอร์
ของฟิล์มแต่ละชนิด อย่างน้อย 2 คน จากสี่อิสระการเตรียมฟิล์ม
ถูกสร้าง . เนื้อหาของโปรตีน solubilizable
แสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ของยอดรวมของโปรตีนในหนัง ,
วัดโดยวิธีเจลดาห์ล ( สมาคมทางการเกษตร
นักเคมี [ ไม่ ] 920.53 )
การแปล กรุณารอสักครู่..
