give off variety of genotoxic compounds.
Direct toxic effects can occur from the contaminants such as petroleum hydrocarbon, heavy metals and
pesticides once released to the environment [3]. Carcinogenic and oxidative potential of metal pollution are
considered hazardous to biological system [4] and the exposure of pollutants may directly and/or indirectly affect
the populations and communities abundances with the presence of the toxicants [3]. Mn is one of the common metal
found in the aquatic environment as it may exist in different forms either as compound, or complexes with organic
compounds. It is very difficult to be removed from the water body since it will only precipitate out if the pH is
raised to 10.0 [5]. Mn persists in the environments and has raise concern on how elevated Mn affects the aquatic life
as there are not as many information on their toxicity towards aquatic organism compared to other metals.
Acanthamoeba sp. is a common protist that is found in diverse environment, including aquatic environment. Due to
its ubiquitousness, their properties of being a single cell organism with their uncovered cell wall of trophozoites
makes them sensitive to any change in the environment [6,7]. Thus, this study evaluates the cytotoxicity and
genotoxicity effect of Mn on this free-living amoebae by observation based on their morphological characteristics.
The objectives of this study is to determine the IC50 value of Mn towards Acanthamoeba sp. and to observe
morphological changes in Acanthamoeba sp. as well as genotoxicity evaluation of Mn after exposed to
Acanthamoeba sp. DNA.
2. Materials and method
2.1 MTT (2 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5 diphenyl tetrazolium bromide) assay to determine the IC50 value of Mn
on Acanthamoeba sp.
Acanthamoeba sp. (environmental isolate) was used in all experiments. The trophozoites were maintained in
axenic conditions in 4% protease-yeast-glucose medium and were subcultured every 4 days. MTT assay by
Mossman [8] was used in this study to determine the IC50 value of Mn on Acanthamoeba sp.
2.2 Morphological observation of Acanthamoeba treated with Mn by light and scanning electron microscopy.
For morphological observation of Acanthamoeba after exposure to Mn, the amoeba were first seeded in a sixwell
plate and incubated at 37qC in the absence and presence of Mn at their IC50 concentration. After 24h of
incubation, the morphological changes of Acanthamoeba were observed under light microscopy. Scanning electron
microscopy observation was carried out following the method by Fatimah et al. [9].
2.3 Mode of cell death determination by fluorescence microscopy - Acridine orange/ propidium iodide (AO/PI)
give off variety of genotoxic compounds.Direct toxic effects can occur from the contaminants such as petroleum hydrocarbon, heavy metals andpesticides once released to the environment [3]. Carcinogenic and oxidative potential of metal pollution areconsidered hazardous to biological system [4] and the exposure of pollutants may directly and/or indirectly affectthe populations and communities abundances with the presence of the toxicants [3]. Mn is one of the common metalfound in the aquatic environment as it may exist in different forms either as compound, or complexes with organiccompounds. It is very difficult to be removed from the water body since it will only precipitate out if the pH israised to 10.0 [5]. Mn persists in the environments and has raise concern on how elevated Mn affects the aquatic lifeas there are not as many information on their toxicity towards aquatic organism compared to other metals.Acanthamoeba sp. is a common protist that is found in diverse environment, including aquatic environment. Due toits ubiquitousness, their properties of being a single cell organism with their uncovered cell wall of trophozoitesmakes them sensitive to any change in the environment [6,7]. Thus, this study evaluates the cytotoxicity andgenotoxicity effect of Mn on this free-living amoebae by observation based on their morphological characteristics.The objectives of this study is to determine the IC50 value of Mn towards Acanthamoeba sp. and to observemorphological changes in Acanthamoeba sp. as well as genotoxicity evaluation of Mn after exposed toAcanthamoeba sp. DNA.2. Materials and method2.1 MTT (2 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5 diphenyl tetrazolium bromide) assay to determine the IC50 value of Mnon Acanthamoeba sp.Acanthamoeba sp. (environmental isolate) was used in all experiments. The trophozoites were maintained inaxenic conditions in 4% protease-yeast-glucose medium and were subcultured every 4 days. MTT assay byMossman [8] was used in this study to determine the IC50 value of Mn on Acanthamoeba sp.2.2 Morphological observation of Acanthamoeba treated with Mn by light and scanning electron microscopy.For morphological observation of Acanthamoeba after exposure to Mn, the amoeba were first seeded in a sixwellplate and incubated at 37qC in the absence and presence of Mn at their IC50 concentration. After 24h ofincubation, the morphological changes of Acanthamoeba were observed under light microscopy. Scanning electronmicroscopy observation was carried out following the method by Fatimah et al. [9].2.3 Mode of cell death determination by fluorescence microscopy - Acridine orange/ propidium iodide (AO/PI)
การแปล กรุณารอสักครู่..

ให้ออกความหลากหลายของสารประกอบ genotoxic.
พิษโดยตรงสามารถเกิดขึ้นได้จากการปนเปื้อนเช่นปิโตรเลียมไฮโดรคาร์บอน,
โลหะหนักและสารกำจัดศัตรูพืชได้รับการปล่อยตัวครั้งเพื่อสิ่งแวดล้อม[3] สารก่อมะเร็งที่มีศักยภาพและออกซิเดชันของมลพิษโลหะถือว่าเป็นอันตรายต่อระบบอวัยวะ [4] และความเสี่ยงของสารมลพิษอาจโดยตรงและ / หรือโดยอ้อมส่งผลกระทบต่อประชากรและชุมชนอนุภาคที่มีการปรากฏตัวของสารพิษที่[3] Mn เป็นหนึ่งในโลหะที่พบบ่อยพบในสิ่งแวดล้อมทางน้ำในขณะที่มันอาจมีอยู่ในรูปแบบที่แตกต่างกันไม่ว่าจะเป็นสารประกอบเชิงซ้อนหรือมีอินทรีย์สาร มันเป็นเรื่องยากมากที่จะถูกลบออกจากร่างกายของน้ำเพราะมันจะเกิดการตกตะกอนว่าพีเอชจะยกขึ้นไป 10.0 [5] Mn ยังคงอยู่ในสภาพแวดล้อมและมีการระดมความกังวลเกี่ยวกับวิธีการยกระดับล้านส่งผลกระทบต่อสัตว์น้ำที่มีข้อมูลไม่มากเท่าที่เป็นพิษต่อสัตว์น้ำเมื่อเทียบกับโลหะอื่นๆ . Acanthamoeba SP เป็นโพรทิสต์ทั่วไปที่พบในสภาพแวดล้อมที่มีความหลากหลายรวมทั้งสิ่งแวดล้อมทางน้ำ เนื่องจากubiquitousness ของคุณสมบัติของการเป็นสิ่งมีชีวิตเซลล์เดียวกับมือถือของพวกเขาค้นพบกำแพง trophozoites ทำให้พวกเขามีความไวต่อการเปลี่ยนแปลงใด ๆ ในสภาพแวดล้อม [6,7] ดังนั้นการศึกษานี้ประเมินความเป็นพิษและgenotoxicity ผลของ Mn นี้อะมีบาชีวิตฟรีโดยอยู่บนพื้นฐานของการสังเกตลักษณะทางสัณฐานวิทยาของพวกเขา. วัตถุประสงค์ของการศึกษาครั้งนี้คือการกำหนดค่า IC50 ของ Mn ต่อ Acanthamoeba SP และจะสังเกตเห็นการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาใน Acanthamoeba SP เช่นเดียวกับการประเมินพันธุกรรมของ Mn หลังจากสัมผัสกับAcanthamoeba SP ดีเอ็นเอ. 2 วัสดุและวิธีการ2.1 MTT (2 3 [4,5-dimethylthiazol-2-YL] -2,5 diphenyl tetrazolium โบรไมด์) ทดสอบเพื่อตรวจสอบค่า IC50 ของ Mn ใน Acanthamoeba Sp. Acanthamoeba SP (แยกสิ่งแวดล้อม) ถูกนำมาใช้ในการทดลองทั้งหมด trophozoites ถูกเก็บรักษาไว้ในสภาพaxenic ในสื่อน้ำย่อยยีสต์กลูโคส 4% และได้รับการเลี้ยงทุก 4 วัน ทดสอบ MTT โดยMossman [8] ถูกนำมาใช้ในการศึกษาครั้งนี้เพื่อกำหนดค่า IC50 ของ Mn ใน Acanthamoeba Sp. 2.2 การสังเกตทางสัณฐานวิทยาของ Acanthamoeba รับการรักษาด้วย Mn ด้วยแสงและการสแกนกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน. สำหรับการสังเกตลักษณะทางสัณฐานวิทยาของ Acanthamoeba หลังจากที่สัมผัสกับ Mn, อะมีบา เมล็ดแรกใน sixwell แผ่นและบ่มที่ 37qC ในกรณีที่ไม่มีและการปรากฏตัวของแมงกานีสที่มีความเข้มข้น IC50 ของพวกเขา หลังจาก 24 ชั่วโมงของการบ่มการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาของAcanthamoeba ถูกตั้งข้อสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์ อิเล็กตรอนแบบส่องกราดกล้องจุลทรรศน์สังเกตได้ดำเนินการดังต่อไปนี้โดยวิธีการ Fatimah et al, . [9] 2.3 โหมดของการกำหนดการตายของเซลล์โดยใช้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง - acridine ส้ม / ไอโอไดด์ propidium (AO / PI)
การแปล กรุณารอสักครู่..
