Although this resistance is mainly

Although this resistance is mainly associated with mutations in the rdxA and frxA genes, the question of whether metronidazole resistance is caused by the inacti- vation of frxA alone is still debated. Furthermore, it is unclear whether there are other mutations involved in addition to the two genes that are associated with resistance. A metronidazole-resistant strain was cultured from the metronidazole-susceptible H. pylori strain 26695-1 by exposure to low concentrations of metronidazole. The genome sequences of both susceptible and resis- tant H. pylori strains were determined by Illumina next-generation sequencing, from which putative candidate resistance muta- tions were identified. Natural transformation was used to introduce PCR products containing candidate mutations into the sus- ceptible parent strain 26695-1, and the metronidazole MIC was determined for each strain. Mutations in frxA (hp0642), rdxA (hp0954), and rpsU (hp0562) were confirmed by the Sanger method. The mutated sequence in rdxA was successfully transformed into strain 26695-1, and the transformants showed resistance to metronidazole. The transformants containing a single mutation in rdxA showed a low MIC (16 mg/liter), while those containing mutations in both rdxA and frxA showed a higher MIC (48 mg/ liter). No transformants containing a single mutation in frxA or rpsU were obtained. Next-generation sequencing was used to identify mutations related to drug resistance. We confirmed that the mutations in rdxA are mainly associated with metronida- zole resistance, and mutations in frxA are able to enhance H. pylori resistance only in the presence of rdxA mutations. Moreover, mutations in rpsU may play a role in metronidazole resistance.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แม้ว่าความต้านทานนี้ส่วนใหญ่เกี่ยวข้องกับการกลายพันธุ์ในยีน rdxA และ frxA คำถามที่ว่า metronidazole ต้านทานเกิดจาก inacti-หนดสงของ frxA คนเดียวเป็นยังถกเถียงกัน นอกจากนี้ มันไม่ชัดเจนว่ามีพันธุ์อื่นที่เกี่ยวข้องนอกเหนือจากสองยีนที่เกี่ยวข้องกับความต้านทาน สายพันธุ์ทน metronidazole มีอ่างจาก H. metronidazole อ่อนแอจนเครียด 26695-1 โดยแสงความเข้มข้นต่ำของ metronidazole ลำดับพันธุทั้งอ่อนแอและสายพันธุ์จน H. resis tant ถูกกำหนด โดยลำดับรุ่น Illumina จากผู้ที่อ้างว่าฝาระบุต้านมุทุกระดับ ใช้การเปลี่ยนแปลงธรรมชาติเพื่อแนะนำผลิตภัณฑ์ PCR ที่ประกอบด้วยการกลายพันธุ์เป็นสายพันธุ์หลัก sus ceptible 26695-1 และ metronidazole MIC ถูกกำหนดสำหรับแต่ละสายพันธุ์ ใน frxA (hp0642), rdxA (hp0954), และ rpsU (hp0562) ได้รับการยืนยัน โดยวิธี Sanger ลำดับที่กลายพันธุ์ใน rdxA เรียบร้อยแล้วแปรสภาพพันธุ์ 26695-1 และ transformants แสดงให้เห็นว่าความต้านทานการ metronidazole Transformants ที่ประกอบด้วยการกลายพันธุ์เดียวใน rdxA พบว่าไมโครโฟนต่ำ (16 มิลลิกรัม/ลิตร), ขณะที่ ประกอบด้วยการกลายพันธุ์ rdxA และ frxA พบไมค์สูง (48 มิลลิกรัม/ลิตร) Transformants ไม่ประกอบด้วยกลายพันธุ์เดียวใน frxA หรือ rpsU รับ ลำดับรุ่นถูกใช้เพื่อระบุพันธุ์ที่เกี่ยวข้องกับการดื้อยา เรายืนยันว่า กลายพันธุ์ใน rdxA ส่วนใหญ่เกี่ยวข้องกับความต้านทาน metronida zole และใน frxA สามารถเพิ่มความต้านทานจน H. เฉพาะใน rdxA พันธุ์ นอกจากนี้ ใน rpsU อาจเล่นบทบาทในความต้านทาน metronidazole

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แม้ว่าต้านทานนี้จะเกี่ยวข้องส่วนใหญ่กับการกลายพันธุ์ใน rdxA และ frxA ยีนคำถามที่ว่าต้านทาน metronidazole เกิดจาก vation inacti- ของ frxA เพียงอย่างเดียวยังคงถกเถียงกัน นอกจากนี้มันยังไม่ชัดเจนว่ามีการกลายพันธุ์อื่น ๆ ที่เกี่ยวข้องนอกจากนี้ยังมีสองยีนที่เกี่ยวข้องกับการต่อต้าน สายพันธุ์ metronidazole ทนเป็นที่เพาะเลี้ยงจาก metronidazole-อ่อนแอ H. pylori ความเครียด 26695-1 จากการสัมผัสกับความเข้มข้นต่ำ metronidazole ลำดับจีโนมของทั้งสองอ่อนแอและ resis- tant H. pylori สายพันธุ์ที่ได้รับการพิจารณาโดยลำดับ Illumina รุ่นต่อไปจากการที่ผู้สมัครต้านทานสมมุติ tions muta- ถูกระบุ การเปลี่ยนแปลงธรรมชาติถูกใช้ในการแนะนำผลิตภัณฑ์ PCR ที่มีการกลายพันธุ์ผู้สมัครเข้าสู่ sus- ceptible ปกครองความเครียด 26695-1 และ MIC metronidazole ถูกกำหนดสำหรับแต่ละสายพันธุ์ การกลายพันธุ์ใน frxA (hp0642) rdxA (hp0954) และ rpsU (hp0562) ได้รับการยืนยันโดยวิธีแซงเจอร์ ลำดับกลายพันธุ์ใน rdxA ก็กลายประสบความสำเร็จในสายพันธุ์ 26695-1 และ transformants แสดงให้เห็นความต้านทานต่อการ metronidazole transformants ที่มีการกลายพันธุ์เดียวใน rdxA แสดงให้เห็นว่า MIC ต่ำ (16 mg / ลิตร) ในขณะที่ผู้ที่มีการกลายพันธุ์ทั้งในและ rdxA frxA แสดงให้เห็นว่าไมค์ที่สูงขึ้น (48 มก. / ลิตร) ไม่มี transformants ที่มีการกลายพันธุ์เดียวใน frxA หรือ rpsU ที่ได้รับ รุ่นต่อไปลำดับได้ถูกใช้ในการระบุการกลายพันธุ์ที่เกี่ยวข้องกับการดื้อยา เรายืนยันว่าการกลายพันธุ์ใน rdxA ที่มีความเกี่ยวข้องส่วนใหญ่มีความต้านทาน zole metronida- และการกลายพันธุ์ใน frxA สามารถที่จะเพิ่มความต้านทานเชื้อ H. pylori เพียง แต่ในการปรากฏตัวของการกลายพันธุ์ rdxA นอกจากนี้ยังมีการกลายพันธุ์ใน rpsU อาจมีบทบาทสำคัญในการต่อต้าน metronidazole

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แม้ว่าต้านทานนี้ส่วนใหญ่เกี่ยวข้องกับการกลายพันธุ์ในยีนและ rdxa frxa คำถามว่าโซลต้านทานเกิดจาก inacti - vation ของ frxa คนเดียวยังถกเถียงกัน นอกจากนี้ ยังไม่เป็นที่แน่ชัดว่ามีกลุ่มอื่นที่เกี่ยวข้องนอกเหนือไปจากสองยีนที่เกี่ยวข้องกับการต้านทาน สายพันธุ์ที่ทนเลี้ยงต่อจากโซลโซลเฮลิโคแบคเตอร์ ไพโลไร เมื่อย 26695-1 โดยแสงความเข้มข้นต่ำของเมโทรนิดาโซล . ลำดับจีโนมของทั้งไวและรีซิซเฮลิโคแบคเตอร์ ไพโลไร สายพันธุ์ - จึงถูกกำหนดโดย Illumina ลำดับรุ่นต่อไป ซึ่งผู้สมัครซึ่งต้านทานมุตะ - ใช้งานมีการระบุ . การเปลี่ยนแปลงธรรมชาติถูกใช้เพื่อแนะนำผลิตภัณฑ์ PCR ที่มีการกลายพันธุ์ ผู้สมัครเป็นผู้ปกครอง ceptible SUS - ความเครียด 26695-1 และเมโทรนิดาโซล ไมค์ถูกกำหนดสำหรับแต่ละสายพันธุ์ การกลายพันธุ์ใน frxa ( hp0642 ) rdxa ( hp0954 ) และ rpsu ( hp0562 ) ได้รับการยืนยันโดยวิธีแซงเกอร์ . ลำดับใน rdxa กลายพันธุ์ได้กลายเป็นความเครียด 26695-1 และพลาสมิดพบความต้านทานต่อเมโทรนิดาโซล . พลาสมิดที่มีการกลายพันธุ์ใน rdxa พบไมค์ต่ำ ( 16 มิลลิกรัมต่อลิตร ) ในขณะที่ผู้ที่มีความผิดปกติทั้งในและ rdxa frxa มี MIC สูงกว่า ( 48 มิลลิกรัม / ลิตร ) ไม่มีพลาสมิดที่มีการกลายพันธุ์ใน frxa หรือ rpsu ที่ได้รับ รุ่นต่อไปที่ใช้เพื่อระบุลำดับยีนที่เกี่ยวข้องกับยา เรายืนยันว่า การกลายพันธุ์ใน rdxa เป็นส่วนใหญ่ที่เกี่ยวข้องกับ metronida - โซเล่ความต้านทานและการกลายพันธุ์ใน frxa สามารถเพิ่มความต้านทานในการปรากฏตัวของเฮลิโคแบคเตอร์ ไพโลไร rdxa การกลายพันธุ์เท่านั้น นอกจากนี้การกลายพันธุ์ใน rpsu อาจมีบทบาทในโซลต้านทาน