Determination of the dissociation c

Determination of the dissociation constant, Kd, or associa- tion constant, Ka, of the binding between a protein and ligand is an important analytical methodology that should be included in the fourth-year undergraduate and first-year graduate courses. The measurement enables researchers in biochemistry or chemi- cal biology to assess the strength of protein-ligand interactions, which can be used to evaluate effects of substrates, inhibitors, or effectorsonenzymesor receptors.The dissociationorassociation constant can be assessed by measuring the change in physical properties such as absorbance or fluorescence (1). In the past, only a few lessons oriented to teach students how to measure Kd of protein and ligand based on the change of physical properties have been developed and published: the binding of 8-anilino-1- naphtalenesulfonic acid and bovine serum albumin (2), caffeine and human serum albumin (3), 4,6-diamidino-2-phenylindole and DNA (4),2-p-toludinylnapthalene-6-sulfonate and calmo- dulin (5), ethidium bromide and DNA (6), and methyl orange and BSA (7). The binding affinity based on fluorescence signal is used in references 2-6 and only reference 7 measures the value based on UV-vis spectroscopy. Generally, the signal from ab- sorption spectroscopy is low when compared to that of fluore- scence. However, spectrophotometers are widely available in the teaching laboratories; therefore, more experiments demonstrat- ing how to measure binding affinity based on absorption signal are needed.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กำหนดค่าคง dissociation, Kd หรือสเตรชันแอซโซเซีย คง Ka ของเชื่อมระหว่างโปรตีนและลิแกนด์เป็นวิธีวิเคราะห์สำคัญที่ควรรวมอยู่ในระดับปริญญาตรีสี่ปีและหลักสูตรระดับบัณฑิตศึกษาปีแรก การประเมินช่วยให้นักวิจัยในวิชาชีวเคมีชีววิทยา chemi cal เพื่อประเมินความแข็งแรงของลิแกนด์โปรตีนโต้ ซึ่งสามารถใช้เพื่อประเมินผลของพื้นผิว inhibitors หรือ effectorsonenzymesor receptorsค่าคง dissociationorassociation สามารถถูกประเมิน โดยวัดการเปลี่ยนแปลงคุณสมบัติทางกายภาพเช่น absorbance หรือ fluorescence (1) ในอดีต เฉพาะกี่เรียนเน้นการสอนนักเรียนวัด Kd ของโปรตีนและลิแกนด์ที่ตามการเปลี่ยนแปลงของคุณสมบัติทางกายภาพได้ถูกพัฒนา และเผยแพร่: รวม 8-anilino-1-naphtalenesulfonic กรด และวัว serum albumin (2), คาเฟอีน และมนุษย์ serum albumin (3), 4,6-diamidino-2-phenylindole และดีเอ็นเอ (4), 2-p-toludinylnapthalene-6-sulfonate และ calmo-dulin (5), โบรไมด์ ethidium และดีเอ็นเอ (6และ methyl ส้มและบีเอสเอ (7) ความเกี่ยวข้องผูกพันตามสัญญาณ fluorescence ใช้ในอ้างอิง 2-6 และ 7 วัดค่าตามก UV-vis อ้างอิงเฉพาะ ทั่วไป สัญญาณจาก ab-ดูดกจะต่ำเมื่อเปรียบเทียบกับ fluore scence อย่างไรก็ตาม spectrophotometers มีแพร่หลายในห้องปฏิบัติการเรียนการสอน ดังนั้น เพิ่มเติมทดลอง demonstrat กำลังต้องการวิธีการวัดความสัมพันธ์ผูกตามสัญญาณการดูดซึม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การกำหนดแยกออกจากกันอย่างต่อเนื่อง Kd หรือเป็นองค์กรการคงกาของผูกพันระหว่างโปรตีนและลิแกนด์เป็นวิธีการวิเคราะห์ที่สำคัญที่ควรจะรวมอยู่ในระดับปริญญาตรีชั้นปีและในปีแรกหลักสูตรบัณฑิตศึกษา วัดช่วยให้นักวิจัยในชีวเคมีชีววิทยาหรือ cal chemi- เพื่อประเมินความแข็งแรงของการมีปฏิสัมพันธ์โปรตีนแกนด์ซึ่งสามารถใช้ในการประเมินผลกระทบของพื้นผิว, สารยับยั้งหรือ effectorsonenzymesor receptors.The dissociationorassociation คงสามารถได้รับการประเมินโดยการวัดการเปลี่ยนแปลงคุณสมบัติทางกายภาพ เช่นการดูดกลืนแสงหรือเรืองแสง (1) ในอดีตที่ผ่านมาเพียงไม่กี่บทเรียนที่มุ่งเน้นการสอนนักเรียนวิธีการวัด Kd ของโปรตีนและลิแกนด์ขึ้นอยู่กับการเปลี่ยนแปลงของคุณสมบัติทางกายภาพที่ได้รับการพัฒนาและเผยแพร่: ผูกพันของ 8 anilino-1- กรด naphtalenesulfonic และวัวอัลบูมิซีรั่ม (2 ), คาเฟอีนและซีรั่มอัลบูมิมนุษย์ (3), 4,6-diamidino-2-phenylindole และดีเอ็นเอ (4), 2-P-toludinylnapthalene-6-ซัลโฟเนตและ calmo- ดับลิน (5), โบรไมด์ ethidium และดีเอ็นเอ (6) และสีส้มเมธิลและบีเอสเอ (7) ผูกพันใกล้ชิดขึ้นอยู่กับสัญญาณการเรืองแสงที่ใช้ในการอ้างอิงที่ 2-6 และมีเพียงอ้างอิง 7 มาตรการค่าขึ้นอยู่กับสเปคโทร UV-Vis โดยทั่วไปสัญญาณจากสเปกโทรสโกดูดซับ AB- อยู่ในระดับต่ำเมื่อเทียบกับที่ของ fluore- scence แต่สเปกมีอยู่อย่างแพร่หลายในห้องปฏิบัติการการเรียนการสอน; ดังนั้นการทดลองเพิ่มเติม demonstrat- ไอเอ็นจีวิธีการวัดความใกล้ชิดผูกพันขึ้นอยู่กับสัญญาณการดูดซึมที่มีความจำเป็น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การหาค่าคงที่ของการ KD หรือสมาคม - คงที่ tion กาของการผูกระหว่างโปรตีนและเกิดเป็นสำคัญ วิเคราะห์วิธีการที่ควรจะรวมอยู่ใน ระดับปริญญาตรี ชั้นปีที่ 1 และชั้นปีที่ 4 หลักสูตรระดับบัณฑิตศึกษา . วัดที่ช่วยให้นักวิจัยทางชีวเคมีหรือเคมี - แคลชีววิทยาเพื่อประเมินความแข็งแรงของลิแกนด์ปฏิสัมพันธ์ของโปรตีนซึ่งสามารถใช้ในการประเมินผลของพื้นผิว สารยับยั้ง หรือ effectorsonenzymesor ตัวรับ . dissociationorassociation คงที่สามารถประเมินโดยการวัดการเปลี่ยนแปลงสมบัติทางกายภาพ เช่น ค่าการดูดกลืนแสงหรือเรืองแสง ( 1 ) ในอดีตเพียงไม่กี่บทเรียนเน้นการสอนนักเรียนวิธีการวัด kD โปรตีนและลิแกนด์ขึ้นอยู่กับการเปลี่ยนแปลงของสมบัติทางกายภาพได้รับการพัฒนาและเผยแพร่ : ผูกพันของ 8-anilino-1 - กรด naphtalenesulfonic และอัลบูมิน ( 2 ) , คาเฟอีนและแอลบูมินเซรั่มของมนุษย์ ( 3 ) และ ( 4 ) 4,6-diamidino-2-phenylindole ดีเอ็นเอ 2-p-toludinylnapthalene-6-sulfonate calmo - และ ดูลิน ( 5 )โบรไมด์คู่และดีเอ็นเอ ( 6 ) และเมทิล ( สีส้มและ ( 7 ) . affinity ผูกพันตามการส่งสัญญาณที่ใช้ในการอ้างอิง 2-6 และอ้างอิง 7 วัดค่าจาก UV VIS spectroscopy . ทั่วไป สัญญาณจาก AB - ดูดซับสเปกโทรสโกปีเป็นน้อยเมื่อเทียบกับที่ของ fluore - ฉาก . อย่างไรก็ตาม spectrophotometers มีอย่างกว้างขวางในการสอนห้องปฏิบัติการ ; ดังนั้นอีกการทดลอง demonstrat - ing วิธีการวัดความใกล้ชิดผูกพันตามสัญญาณการดูดกลืน
ที่จําเป็น