The extraction of AFs from meat and egg samples was performed according to the method with some modifications. About 15 g sample was blended (20 min) with 50 ml of acetonitrileewater (45:05) and then sample was centrifuged for 5 min at 3000 rpm at the room temperature. Then 10 ml filtratewas diluted with 10 ml of deionized water and purified using an immunoaffinity column at a rate of 3e4 drops/s and washed with water (2 ml) twice at the same flow rate. Final elution was accomplished by passing 1.0 ml of methanol. Finally, the residue was evaporated with nitrogen stream at 40 C. After evaporation 100 ml TFA was added to derivatize AFB1 and AFG1. The samples were placed in the dark place (15 min) at room temperature with caps were on the vials. Then, 400 ml of acetonitrileewater (1:9, v/v) mixture was added to the vials. A 20 ml portion of the solution was subjected to LC analysis. The HPLC system used in present study was a Shimadzu (LC-10A series, Kyoto, Japan) equipped with fluorescence detector (RF-530). The chromatographic column was C18 Supelco Column (4.6 250 mm, 5 mm; Discovery, HS, Bellefonte,USA). The reverse phase mode with a mobile phase of acetonitrilee methanolewater (20:20:60, v/v/v) was used at a flow rate of 1 ml/
min. The wavelength of fluorescence detector was set at 360 (excitation) and 440 nm (emission).
สกัด AFS จากตัวอย่างเนื้อสัตว์และไข่ที่ได้รับการดำเนินการตามวิธีการด้วยการปรับเปลี่ยนบางอย่าง ประมาณ 15 กรัมตัวอย่างได้รับการผสม (20 นาที) 50 มิลลิลิตร acetonitrileewater (45:05) และจากนั้นกลุ่มตัวอย่างที่ได้รับการหมุนเหวี่ยงเวลา 5 นาทีที่ 3000 รอบต่อนาทีที่อุณหภูมิห้อง แล้ว 10 ml filtratewas เจือจางด้วย 10 ml ของน้ำกลั่นปราศจากไอออนและบริสุทธิ์โดยใช้คอลัมน์ immunoaffinity ในอัตรา 3E4 หยด / วินาทีและล้างด้วยน้ำ (2 มิลลิลิตร) สองครั้งที่อัตราการไหลเดียวกัน ชะสุดท้ายก็ประสบความสำเร็จโดยผ่าน 1.0 มิลลิลิตรของเมทานอล สุดท้ายที่เหลือได้รับการระเหยที่มีกระแสไนโตรเจนที่ 40 องศาเซลเซียส หลังจากการระเหย 100 ml TFA ถูกบันทึกอยู่ใน derivatize AFB1 และ AFG1 กลุ่มตัวอย่างที่อยู่ในที่มืด (15 นาที) ที่อุณหภูมิห้องที่มีหมวกอยู่บนขวด จากนั้น 400 มิลลิลิตร acetonitrileewater (1: 9 v / v) ส่วนผสมถูกบันทึกอยู่ในขวด ส่วน 20 มิลลิลิตรของการแก้ปัญหาที่ถูกยัดเยียดให้การวิเคราะห์ LC เป็นระบบ HPLC ที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ (ชุด LC-10A, เกียวโต, ญี่ปุ่น) Shimadzu พร้อมกับเครื่องตรวจจับแสง (RF-530) คอลัมน์โครมาเป็นคอลัมน์ C18 Supelco (4.6 250 มม, 5 มม? ค้นพบ HS, เบลลาฟอน, USA) โหมดขั้นตอนการย้อนกลับกับเฟสเคลื่อนที่ของ methanolewater acetonitrilee (20:20:60, v / v / v) ถูกนำมาใช้ในอัตราการไหล 1 มล /
นาที ความยาวคลื่นของเครื่องตรวจจับแสงตั้งอยู่ที่ 360 (การกระตุ้น) และ 440 นาโนเมตร (ปล่อย)
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
การสกัดของ AFS จากเนื้อและไข่ตัวอย่างการปฏิบัติตามวิธีการ มีการปรับเปลี่ยน ตัวอย่างประมาณ 15 กรัม ผสม ( 20 นาที ) กับ 50 มิลลิลิตร acetonitrileewater ( 45:05 ) จากนั้นศึกษาระดับ 5 นาทีที่ 3 , 000 รอบต่อนาทีที่อุณหภูมิห้อง .แล้ว 10 filtratewas มล. เจือจางด้วย 10 ml ของน้ำบริสุทธิ์คล้ายเนื้อเยื่อประสานและใช้ immunoaffinity คอลัมน์ในอัตรา 3e4 หยด / s และล้างด้วยน้ำ ( 2 มล. ) สองครั้งที่อัตราการไหลเท่ากัน ( สุดท้ายได้ โดยผ่าน 1.0 มิลลิลิตรของเมทานอล สุดท้ายที่เหลือคือระเหยกับกระแสไนโตรเจน 40 C หลังจากการระเหย 100 มล. เติม derivatize กรดไขมันและสาร afg1 .ตัวอย่างถูกวางไว้ในที่มืด ( 15 นาที ) ที่อุณหภูมิห้องด้วยตัวพิมพ์ใหญ่ในขวดนั่น แล้ว acetonitrileewater 400 มิลลิลิตร ( 1 : 9 V / V ) ส่วนผสมก็เพิ่มยามา ส่วน 20 มิลลิลิตรของสารละลายภายใต้การวิเคราะห์ของ LC . พบระบบที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ คือ ชิมัตสึ ( lc-10a ชุด , เกียวโต , ญี่ปุ่น ) อุปกรณ์ตรวจจับการเรืองแสง ( rf-530 )คอลัมน์ คือ คอลัมน์โครมาโตก c18 supelco ( 4.6 250 มม. 5 มม. ; การค้นพบ , HS bellefonte , USA ) กลับเฟสด้วยโหมดระยะเคลื่อนที่ของ acetonitrilee methanolewater ( 20:20:60 , V / V / V ) คือใช้ที่อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาที เครื่องตรวจจับการเรืองแสง
แสงไว้ที่ 360 ( กระตุ้น ) และ nm 440 ( มลพิษ )
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)