IntroductionMumps is a highly conta

Introduction
Mumps is a highly contagious acute communicable viral disease transmitted by oropharyngeal secretions. In the pre-vaccine era, nearly all persons had serological evidence of infection by age 15 (Meyer, 1962, Mortimer, 1978 and Philip et al., 1959). Although the disease is often mild, typically manifesting as swollen salivary glands, the virus is highly neurotropic, with viral invasion into the cerebrospinal fluid in more than half of clinical cases (Bang and Bang, 1943), producing clinically apparent meningitis and encephalitis in 1–15% of cases (Levitt et al., 1970 and Brown et al., 1948). Although usually benign and self-limiting, mumps virus infection can lead to permanent neurological damage and deafness.

Within a decade of the 1967 licensure of mumps vaccine in the U.S., the number of reported cases declined by more than 90%, with a 99% reduction in disease incidence by the end of the 1990’s. However, in 2006 a massive mumps outbreak occurred in the U.S. with over 6500 cases reported (Anderson and Seward, 2008). Large mumps outbreaks have continued since this time, not only in the US, but also in numerous other countries where the disease had previously been under control. These events have renewed interest in mumps virus, particularly in regard to development of new, more effective vaccines. However, much of what is known about the virus is based on preparations from crude cell lysates or supernatants, which contain significant levels of host cell debris, including biologically active cellular and viral proteins, which can influence in vitro and in vivo virus characterization studies, e.g., stimulation of innate and adaptive immune responses or interference with virus binding to its cellular receptor. Attempts to concentrate and purify mumps virus, such as use of sucrose gradients or column purification, have been successful, however, such methods dramatically impact virus viability. In this report, we describe a protocol for efficiently concentrating cell culture supernatants by filtration followed by purification on a potassium tartrate step gradient to produce virus stocks of approximately 1 × 108 plaque forming units of virus per milliliter at a purity of 99.9% in terms of pfu/ng total protein relative to the input material.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แนะนำคางทูมเป็นโรคติดต่ออย่างเฉียบพลันติดต่อไวรัสส่ง โดย oropharyngeal หลั่ง ในยุคก่อนวัคซีน เกือบทุกคนมีหลักฐานการปิเปตทางวิทยาของการติดเชื้อตามอายุ 15 (Meyer, 1962 มอร์ 1978 และฟิลิป et al. 1959) แม้ว่าโรคจะรุนแรง เผยมักจะเป็นต่อมน้ำลายบวม ไวรัสเป็น neurotropic สูง มีไวรัสบุกเข้าสันหลังมากกว่าครึ่งหนึ่งของกรณีคลินิก (บางและบาง 1943), ผลิตทางคลินิกชัดเจนเยื่อหุ้มสมองอักเสบและสมองอักเสบใน 1-15% (ข่าว et al. 1970 และน้ำตาล et al. 1948) แต่มักจะใจดี และจำกัดด้วยตนเอง การติดเชื้อไวรัสคางทูมสามารถนำไปสู่ความเสียหายทางระบบประสาทถาวรและหูหนวกภายในทศวรรษ licensure 1967 คางทูมวัคซีนในสหรัฐ จำนวนรายงานกรณีปฏิเสธ โดยมากกว่า 90%, 99% ลดอุบัติการณ์โรคปลายปี 1990 อย่างไรก็ตาม ในปี 2549 การระบาดใหญ่โรคคางทูมเกิดขึ้นในสหรัฐอเมริกากับ 6500 กว่ากรณีรายงาน (แอนเดอร์สันและเซวาร์ด 2008) ระบาดของโรคคางทูมขนาดใหญ่ได้อย่างต่อเนื่องตั้งแต่เวลานี้ ไม่เพียงแต่ ในสหรัฐอเมริกา แต่ยังอยู่ ในหลายประเทศที่โรคนี้ก่อนหน้านี้ได้ภายใต้การควบคุม เหตุการณ์เหล่านี้ได้ทำการต่ออายุสนใจในไวรัสคางทูม โดยเฉพาะอย่างยิ่งในเรื่องการพัฒนาวัคซีนใหม่ มีประสิทธิภาพมากขึ้น อย่างไรก็ตาม มากของสิ่งที่เรียกว่าเกี่ยวกับไวรัสอยู่บนเตรียมจากเซลล์ดิบ lysates หรือ supernatants ซึ่งประกอบด้วยระดับนัยสำคัญของเศษเซลล์โฮสต์ รวมถึงมือถือที่ใช้งานทางชีวภาพ และ โปรตีนไวรัส ซึ่งสามารถมีอิทธิพลต่อการศึกษาไวรัสในหลอดทดลอง และในสัตว์ทดลองคุณลักษณะ เช่น กระตุ้นการตอบสนองภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติ และปรับเปลี่ยนหรือรบกวนไวรัสผูกกับตัวรับของเซลล์ ความพยายามที่จะเข้มข้น และบริสุทธิ์ไวรัสคางทูม เช่นใช้การไล่ระดับสีน้ำตาลซูโครสหรือคอลัมน์ทำให้บริสุทธิ์ ประสบความสำเร็จ อย่างไรก็ตาม วิธีการดังกล่าวอย่างมากส่งผลกระทบต่อชีวิตไวรัส ในรายงานนี้ เราอธิบายโพรโทคอสำหรับประสิทธิภาพมุ่ง supernatants วัฒนธรรมเซลล์ โดยการกรองตาม ด้วยบริสุทธิ์ตามโพแทสเซียม tartrate ขั้นตอนการผลิตไวรัสหุ้นที่ประมาณ 1 × 108 ปูนขึ้นรูปหน่วยไวรัสต่อมิลลิเมตรที่มีความบริสุทธิ์ 99.9% ในแง่ของโปรตีนทั้งหมด pfu/ng สัมพันธ์ดิบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทนำ
คางทูมเป็นโรคไวรัสเฉียบพลันสูงติดต่อติดต่อส่งโดยหลั่ง oropharyngeal ในยุคก่อนวัคซีนเกือบทุกคนมีหลักฐานความชุกของโรคติดเชื้อโดยอายุ 15 ปี (เมเยอร์ปี 1962 Mortimer 1978 และฟิลิป et al., 1959) แม้ว่าโรคมักจะไม่รุนแรงมักจะเผยต่อมน้ำลายบวมไวรัสเป็นอย่างสูงที่ประสาทมีการบุกรุกของเชื้อไวรัสเข้าไปในน้ำไขสันหลังในมากกว่าครึ่งหนึ่งของผู้ป่วยทางคลินิก (บางบัวทองและ Bang, 1943), การผลิตเยื่อหุ้มสมองอักเสบที่ชัดเจนทางคลินิกและโรคไข้สมองอักเสบใน 1 -15% ของกรณี (Levitt et al., 1970 สีน้ำตาลและ et al., 1948) แม้ว่าปกติจะใจดีและตนเอง จำกัด คางทูมการติดเชื้อไวรัสสามารถนำไปสู่ความเสียหายทางระบบประสาทอย่างถาวรและหูหนวก. ภายในทศวรรษของปี 1967 ประกาศนียบัตรวัคซีนคางทูมในสหรัฐอเมริกาจำนวนผู้ป่วยรายงานลดลงกว่า 90% โดยมี 99% ในการลดอุบัติการณ์การเกิดโรคในตอนท้ายของปี 1990 อย่างไรก็ตามในปี 2006 การระบาดของโรคคางทูมขนาดใหญ่ที่เกิดขึ้นในสหรัฐอเมริกาที่มีมากกว่า 6500 รายงานกรณี (เดอร์สันและเอิร์ด 2008) การระบาดของโรคคางทูมขนาดใหญ่ได้อย่างต่อเนื่องตั้งแต่เวลานี้ไม่เพียง แต่ในสหรัฐอเมริกา แต่ยังอยู่ในประเทศอื่น ๆ อีกมากมายที่เป็นโรคที่ได้รับก่อนหน้านี้ภายใต้การควบคุม เหตุการณ์เหล่านี้มีความสนใจในไวรัสคางทูมโดยเฉพาะอย่างยิ่งในเรื่องการพัฒนาของใหม่วัคซีนมีประสิทธิภาพมากขึ้น แต่มากของสิ่งที่เป็นที่รู้จักกันเกี่ยวกับไวรัสจะขึ้นอยู่กับการเตรียมการจาก lysates เซลล์น้ำมันดิบหรือ supernatants ซึ่งมีระดับอย่างมีนัยสำคัญของเศษเซลล์โฮสต์รวมทั้งโปรตีนของเซลล์และไวรัสใช้งานทางชีวภาพซึ่งสามารถมีอิทธิพลในหลอดทดลองและในการศึกษาลักษณะไวรัสร่างกาย เช่นการกระตุ้นการตอบสนองของภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติและการปรับตัวหรือการรบกวนกับไวรัสที่มีผลผูกพันที่จะรับโทรศัพท์มือถือของตน ความพยายามในการที่จะมีสมาธิและชำระคางทูมไวรัสเช่นการใช้การไล่ระดับสีน้ำตาลซูโครสหรือฟอกคอลัมน์ได้รับความสำเร็จ แต่วิธีการดังกล่าวอย่างมากส่งผลกระทบต่อการมีชีวิตไวรัส ในรายงานฉบับนี้เราจะอธิบายโปรโตคอลสำหรับการได้อย่างมีประสิทธิภาพมุ่งเน้น supernatants เพาะเลี้ยงเซลล์โดยการกรองตามด้วยการทำให้บริสุทธิ์ในการไล่ระดับสีขั้นตอนโพแทสเซียม tartrate การผลิตหุ้นไวรัสประมาณ 1 × 108 แผ่นโลหะขึ้นรูปหน่วยของเชื้อไวรัสต่อมิลลิลิตรที่มีความบริสุทธิ์ 99.9% ในแง่ของ PFU / ng โปรตีนญาติรวมกับวัสดุการป้อนข้อมูล

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แนะนำโรคคางทูมเป็นสูงติดต่อโรคติดต่อเฉียบพลันโรคไวรัสที่ส่งโดย oropharyngeal หลั่ง . ในยุคก่อนฉีดวัคซีน คนเกือบทั้งหมดมีหลักฐานมากของการติดเชื้อโดยอายุ 15 ( ในปี 1962 Mortimer , 1978 และฟิลิป   et al . , 1959 ) แม้ว่าโรคมักไม่รุนแรง มักจะเผยบวมต่อมน้ำลาย ไวรัสเป็นอย่างสูง neurotropic กับไวรัสบุกรุกเข้าไปในน้ำไขสันหลังในมากกว่าครึ่งหนึ่งของกรณีที่ทางคลินิก ( ปังปัง 1943 ) , การผลิตเยื่อหุ้มสมองและสมองอักเสบในทางการแพทย์ชัดเจน 1 – 15 % กรณี ( เลวิตต์ et al . , 1970 รึเปล่า และ ไหมสีน้ำตาล et al . , 2004 ) ถึงแม้ว่าโดยปกติเนื้องอกและตนเองจำกัดการติดเชื้อไวรัสคางทูม , สามารถนำไปสู่ความเสียหายทางระบบประสาทถาวร และหูหนวกภายในทศวรรษ 2510 อนุญาตของโรคคางทูมวัคซีนในสหรัฐอเมริกา จำนวนรายงานคดีลดลงกว่า 90% , ด้วย 99% ลดอุบัติการณ์โรคโดยการสิ้นสุดของปี อย่างไรก็ตาม ในปี 2549 ใหญ่คางทูมระบาดที่เกิดขึ้นในสหรัฐฯ กว่า 6 , 500 ราย ( Anderson และซีเวิร์ด , 2008 ) การระบาดของโรคคางทูมขนาดใหญ่อย่างต่อเนื่องนับตั้งแต่เวลา นี้ไม่เพียง แต่ในสหรัฐอเมริกา แต่ในประเทศอื่น ๆ มากมาย โรคที่เคยได้อยู่ภายใต้การควบคุม เหตุการณ์เหล่านี้ได้มีการต่ออายุความสนใจในไวรัสคางทูม โดยเฉพาะอย่างยิ่งในเรื่องของการพัฒนาใหม่ วัคซีนมีประสิทธิภาพมากขึ้น แต่มากของสิ่งที่เป็นที่รู้จักกันเกี่ยวกับไวรัสจะขึ้นอยู่กับการเตรียมจาก lysates ดิบเซลล์หรือ supernatants ซึ่งประกอบด้วยระดับนัยสำคัญของโฮสต์ที่ใช้งานทางชีวภาพเศษเซลล์ รวมทั้งเซลล์และไวรัสโปรตีนที่สามารถมีอิทธิพลในหลอดทดลองและในสัตว์ทดลอง ไวรัส การศึกษา เช่น การกระตุ้นการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติและการปรับตัวหรือการรบกวนกับไวรัสผูกพัน มือถือของรีเซพเตอร์ พยายามที่จะมีสมาธิและชำระไวรัสคางทูม เช่นใช้น้ำตาลทรายหรือฟอกไล่สีคอลัมน์ได้สำเร็จ อย่างไรก็ตาม วิธีการดังกล่าวอย่างมากผลกระทบของไวรัส ในรายงานฉบับนี้เราจะอธิบายขั้นตอนให้มีประสิทธิภาพ มุ่งเน้น supernatants เซลล์โดยการกรองตามด้วยโพแทสเซียมทาร์เทรตบริสุทธิ์ในขั้นตอนการผลิตไวรัสหุ้นประมาณ 1  ×  108 หน่วยต่อมิลลิลิตรจุลินทรีย์สร้างไวรัสที่บริสุทธิ์ 99.9% ในแง่ของพีเอฟยู / NG รวมโปรตีนที่สัมพันธ์กับวัสดุที่นำเข้า