The concentration of a purified protein in solution is most conveniently and accurately measured using absorbance spectroscopy. The absorbance, A, is a linear function of the molar concentration, C, according to the Beer-Lambert law: A = epsilon x l x c, where e is the molar absorption coefficient and l is the cell path length. This unit provides protocols for calculation of epsilon for a folded or unfolded protein, making use of the average epsilon values for the three contributing chromophores in proteins (the side chains of Trp, Tyr, and Cys). A basic protocol describes how to measure the concentration of a protein using the calculated epsilon and the Beer-Lambert law. A sensitive method is provided for measuring the concentration of proteins that contain few if any tryptophan or tyrosine residues, and a simple method is provided for estimating total protein concentration in crude extracts.
ความเข้มข้นของโปรตีนในสารละลายส่วนใหญ่สะดวกและถูกต้องการวัดการดูดกลืนแสงสเปกโทรสโกปี น , เป็นฟังก์ชันเชิงเส้นของกรามสมาธิ , C , ตามกฎหมายเบียร์ แลมเบิร์ต : = เอปไซลอน x L x C , E อยู่ไหนโมลมีค่าสัมประสิทธิ์การดูดกลืนแสงและเป็นเส้นทางความยาวของเซลล์ หน่วยนี้มีโปรโตคอลสำหรับการคำนวณของเอปไซลอนสำหรับพับหรือกางออก โปรตีน การใช้ค่าเฉลี่ยสำหรับสามสาเหตุการมีบุตรยากเอปไซลอนโปรตีน ( โซ่ข้างของ TRP , tyr , และภาวะ ) โปรโตคอลพื้นฐานอธิบายวิธีการวัดความเข้มข้นของโปรตีนโดยใช้ค่าเอปไซลอนและกฎหมาย เบียร์ แลมเบิร์ท วิธีที่สำคัญมีไว้เพื่อวัดความเข้มข้นของโปรตีนที่มีน้อยถ้ามีทริปหรือซีนที่ตกค้าง และวิธีง่าย ๆคือให้คำนวณรวมโปรตีนในสารสกัด .
การแปล กรุณารอสักครู่..
