Preparation of RIGS kit. A novel fo

Preparation of RIGS kit.
A novel format (Fig. 1) was designed for RIGS kit, so that it enables the detection of TSWV on a single strip.
The colloidal-gold-conjugated solution of antisera raised against TSWV was mixed in equal quantities and applied on 26 × 1.7 cm conjugate pads (Standard 14) and dried under dry air for 10-15 min. TSWV IgG-BSA conjugate was diluted in 20 mM sodium phosphate buffer, (pH 8.0) containing 1% sucrose to a final concentration of 2 mg/ml and applied as a 0.5 mm thick, 26 cm line, centrally at 1.25 cm from the top and bottom ends on one side of a 2.5 × 26 cm nitrocellulose plastic backed membrane strip, using a locally fabricated airbrush device (Innovative Biosciences, India). Nitrocellulose membrane was cut into sections (2.5 cm × 26 cm).
Test line was coated with TSWV-IgG conjugate, which was applied to each membrane in 150 μg/ml TSWV using TLC conjugate sampler.
The distance between the test line and control line was 6 mm. The test strips were dried at 37°C for 30 min. TSWV IgGBSA conjugate was diluted in 1 mM Tris-HCl buffer (pH 8.0) containing containing 1% sucrose to a final concentration of 3 μg/ml and applied as a 1 mm thick, 26 cm line, at 0.5 cm from the top end of the membrane. The membrane was dried at 3°C under a dry wind blower for 10-15 min and blocked with 10 mM potassium phosphate buffer (pH 7.5) containing 0.25% BSA and 1.0% sucrose.
The membrane was dried at 37°C under a dry wind blower for 10-15 min and washed twice with 10 mM, sodium phosphate buffer (pH 7.2) before drying it for 10–15 min at 50°C.
A polyethylene plastic sheet (26 × 8 cm) of 0.2 mm thickness was coated with acrylic adhesive on one side and the 2.5 cm wide membrane was placed centrally at a spacing of 1.5 cm from the top and 4 cm from the bottom end of the sheet.
The conjugate coated glass-fiber pad was placed on the lower end of the membrane, so as to overlap 2 mm on it. A filter pad was placed to overlap 2mm on the lower end of the conjugate release pad to act as sample pad and another pad (CF4) was placed to overlap 2 mm on the upper end of the membrane to act as absorbent pad. The assembly was cold-laminated using an 8 cm wide transparent adhesive tape. The laminated 26 × 8 cm assembly was cut into lateral-flow strips of 8 × 0.4 cm.
The strips were stored in an airtight plastic bottle containing a desiccant pack.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เตรียมชุด RIGS รูปแบบนวนิยาย (Fig. 1) ถูกออกแบบมาสำหรับชุด RIGS ให้ทำการตรวจพบ TSWV บนแถบเดียว โซลูชันของ antisera ขึ้นกับ TSWV colloidal-ทองกลวงถูกผสมในปริมาณที่เท่ากันใช้ 26 × 1.7 ซม. conjugate แผ่น (14 มาตรฐาน) และแห้งภายใต้อากาศแห้งสำหรับผสมในบัฟเฟอร์ฟอสเฟตโซเดียม 20 มม., (pH 8.0) มี 1% ซูโครสจะเข้มข้นสุดท้ายของ 2 mg/ml และใช้เป็น 0.5 mm หนา 10-15 นาทีค่าสังยุค TSWV IgG-บีเอสเอ , 26 ซม.บรรทัด ศูนย์กลาง 1.25 cm จากปลายบนและล่างบนด้านหนึ่งของ 2.5 × 26 ซม. nitrocellulose สำรองเยื่อพลาสติกแถบ ใช้อุปกรณ์ประกอบเครื่องแอร์บรัช (เวลาออกนวัตกรรม อินเดีย) เมมเบรน nitrocellulose ถูกตัดเป็นส่วน (2.5 cm × 26 เซนติเมตร) รายการทดสอบที่เคลือบ ด้วย TSWV IgG ค่าสังยุค ซึ่งถูกใช้กับเมมเบรนแต่ละใน μg 150 ml TSWV ใช้ TLC conjugate แซมเพลอร์ 6 มม.ระยะห่างระหว่างการทดสอบและควบคุมบรรทัดได้ ทดสอบแถบได้แห้งที่ 37° C สำหรับค่าสังยุค TSWV IgGBSA 30 นาทียกเว้นใน mM 1 ทริสเรทติ้ง HCl บัฟเฟอร์ (pH 8.0) ที่มีประกอบด้วย 1% ซูโครสจะเข้มข้นสุดท้ายของ μg 3 ml และใช้เป็น 1 mm หนา 26 ซม.เส้น ที่ 0.5 ซม.จากเมมเบรนสุด เยื่อที่แห้งที่ 3° C ภายใต้อากาศแห้งลมสำหรับ 10-15 นาที และถูกับ 10 มม.โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.5) มี 0.25% บีเอสเอและ 1.0% ซูโครส เยื่อที่แห้งที่ 37° C ภายใต้อากาศแห้งลมสำหรับ 10-15 นาที และล้างสองครั้ง ด้วย 10 mM โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.2) ก่อนการอบแห้งสำหรับ 10-15 นาทีที่ 50 องศาเซลเซียส พลาสติกพลาสติกแผ่น (26 × 8 เซนติเมตร) ของความหนา 0.2 มม.ถูกเคลือบ ด้วยกาวอะคริลิด้านหนึ่ง และซม. 2.5 กว้างเมมเบรนถูกวางไว้กลางที่ระยะห่างของ 1.5 ซม. จากด้านบน และ 4 ซม.จากปลายด้านล่างของแผ่นแผ่นเคลือบ conjugate ใยแก้วที่อยู่ในส่วนล่างของเมมเบรน เพื่อซ้อน 2 มม.ใน แผ่นกรองถูกวางทับ 2 มม.ในส่วนล่างของแผ่นรุ่น conjugate ทำหน้าที่เป็นแผ่นตัวอย่าง และอีกแผ่น (CF4) ถูกวางทับ 2 มม.ในส่วนบนของเมมเบรนทำหน้าที่เป็นแผ่นดูดซับ แอสเซมบลีที่ถูกเย็นเคลือบเทป 8 ซ.ม.กว้างโปร่งใสยึดติดโดยใช้ แอสเซมบลีเคลือบ 26 × 8 เซนติเมตรถูกตัดเป็นแถบด้านข้างไหลของ 8 × 0.4 ซม. แถบถูกเก็บไว้ในขวดพลาสติกแบบสุญญากาศประกอบด้วยแพคความชื้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การเตรียมความพร้อมของชุดแท่นขุดเจาะ.
รูปแบบนวนิยาย (รูปที่ 1). ได้รับการออกแบบสำหรับชุดแท่นขุดเจาะเพื่อที่จะช่วยให้การตรวจสอบของ TSWV บนแถบเดียว.
การแก้ปัญหาคอลลอยด์ทองผันของ antisera ขึ้นกับ TSWV ผสมในปริมาณที่เท่ากันและ นำไปใช้ในวันที่ 26 × 1.7 ซม. แผ่นคอนจูเกต (Standard 14) และแห้งภายใต้อากาศแห้งประมาณ 10-15 นาที TSWV ผัน IgG-BSA ถูกเจือจางใน 20 มิลลิโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 8.0) ที่มีน้ำตาลซูโครส 1% ความเข้มข้นสุดท้ายของ 2 mg / ml และนำไปใช้เป็น 0.5 มมหนา 26 สายเซนติเมตรส่วนกลางที่ 1.25 ซม. จากด้านบน และด้านล่างจะสิ้นสุดลงในอีกด้านหนึ่งของ 2.5 × 26 ซม. พลาสติกไนโตรเซลลูโลสได้รับการสนับสนุนแถบเมมเบรนใช้อุปกรณ์พู่กันประดิษฐ์ในประเทศ (ชีววิทยาศาสตร์นวัตกรรมอินเดีย) เมมเบรน nitrocellulose ถูกตัดออกเป็นส่วน ๆ (2.5 ซม. × 26 ซม.)
สายการทดสอบได้รับการเคลือบด้วยคอนจูเกต TSWV-IgG ซึ่งถูกนำไปใช้กับเมมเบรนในแต่ละ 150 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร TSWV ใช้ตัวอย่างผัน TLC.
ระยะห่างระหว่างสายการทดสอบและสายควบคุม 6 มม แถบทดสอบแห้งที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาที ผัน TSWV IgGBSA ถูกเจือจางใน 1 มิลลิบัฟเฟอร์ Tris-HCl (pH 8.0) ที่มีน้ำตาลซูโครส 1% ความเข้มข้นสุดท้ายของ 3 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรและนำไปใช้เป็นหนา 1 มิเส้น 26 ซม., 0.5 ซม. จากปลายด้านบนของ เมมเบรน เมมเบรนแห้งที่ 3 ° C ภายใต้เป่าลมแห้งประมาณ 10-15 นาทีและบล็อกที่มี 10 มิลลิโพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.5) ที่มี BSA 0.25% และ 1.0% ซูโครส.
เมมเบรนแห้งที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสภายใต้แห้ง เป่าลมประมาณ 10-15 นาทีและล้างครั้งที่สองมี 10 มิลลิบัฟเฟอร์โซเดียมฟอสเฟต (pH 7.2) ก่อนการอบแห้งไว้ประมาณ 10-15 นาทีที่ 50 ° C.
แผ่นพลาสติกเอทิลีน (26 × 8 เซนติเมตร) ความหนา 0.2 มิลลิเมตรเป็นเคลือบ ด้วยกาวอะคริลิในด้านหนึ่งและ 2.5 ซม. เมมเบรนกว้างวางอยู่ใจกลางเมืองที่ระยะห่างของ 1.5 ซม. จากด้านบนและ 4 ซม. จากปลายด้านล่างของแผ่น.
ผันเคลือบแผ่นใยแก้วที่ถูกวางไว้บนปลายล่างของ เมมเบรนเพื่อให้เป็นไปทับซ้อนกัน 2 มมกับมัน แผ่นกรองถูกนำมาวางทับซ้อนกัน 2 มิลลิเมตรที่ปลายล่างของแผ่นปล่อยคอนจูเกตจะทำหน้าที่เป็นตัวอย่างแผ่นและแผ่นอื่น (CF4) ถูกนำมาวางทับซ้อนกัน 2 มมปลายบนของเมมเบรนจะทำหน้าที่เป็นแผ่นดูดซับ การชุมนุมเป็นเย็นเคลือบใช้ 8 ซม. กว้างเทปกาวใส ลามิเนต 26 × 8 ซม. การชุมนุมที่ถูกตัดเป็นเส้นด้านข้างไหลของ 8 × 0.4 ซม.
แถบถูกเก็บไว้ในขวดพลาสติกสุญญากาศที่มีแพ็คสารดูดความชื้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเตรียมชุด rigs
a รูปแบบใหม่ ( รูปที่ 1 ) ถูกออกแบบมาสำหรับชุดแท่นขุดเจาะ เพื่อให้มันสามารถตรวจหาของ tswv บนแถบเดียว
ทองคอลลอยด์และแก้ไขแอนติยกกับ tswv ผสมในปริมาณที่เท่ากัน และใช้กับ 26 × 1.7 ซม. ) ( มาตรฐาน 14 แผ่น ) และแห้งในอากาศแห้งประมาณ 10-15 นาทีtswv IgG BSA ) เจือจางใน 20 มิลลิเมตรโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 8.0 ) ที่ประกอบด้วย 1% ซูโครสความเข้มข้นสุดท้าย 2 mg / ml และใช้เป็น 0.5 มม. หนา , สายซม. 26 จากส่วนกลางที่ 1.25 ซม. จากด้านบนและด้านล่างปลายข้างหนึ่งของ 2.5 × 26 ซม. ไนโตรพลาสติกข้อมูล เยื่อแผ่นโดยใช้เครื่องประดิษฐ์อุปกรณ์แอร์บรัช ( ชีววิทยาศาสตร์ , อินเดีย นวัตกรรม )ไนโตรเซลลูโลสเมมเบรนถูกตัดออกเป็นส่วน ( 2.5 cm × 26 ซม. )
ทดสอบสายเคลือบด้วย tswv IgG ) ซึ่งจะใช้แต่ละเยื่อใน 150 μ g / ml tswv โดยใช้ TLC ) ตัวอย่าง .
ระยะห่างระหว่างบรรทัดการทดสอบและการควบคุมสาย 6 มิลลิเมตร แถบทดสอบที่อุณหภูมิ 37 องศา C เป็นเวลา 30 นาที tswv iggbsa ) เจือจางใน 1 มม. หรือ HCl บัฟเฟอร์ pH 80 ) ซึ่งประกอบด้วยซูโครส ความเข้มข้น 1% สุดท้าย 3 μ g / ml และใช้เป็น 1 มม. หนา , สายซม. 26 , 0.5 ซม. จากด้านบนสุดของเมมเบรน เยื่อแผ่นแห้งที่อุณหภูมิ 3 องศา C ภายใต้เป่าลมแห้งประมาณ 10-15 นาที และถูกปิดกั้นด้วย 10 มม. โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.5 ) ที่มี BSA 0.25% และซูโครส 1.0% .
เยื่อแผ่นแห้งที่อุณหภูมิ 37 องศา C ภายใต้เป่าลมแห้งประมาณ 10-15 นาทีและล้าง 2 ครั้งกับ 10 mm , โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.2 ) ก่อนที่จะแห้งประมาณ 10 – 15 นาทีที่ 50 ° C .
เป็นพลาสติกแผ่นพลาสติก ( 26 × 8 ซม. ) ความหนา 0.2 มม. ถูกเคลือบด้วยกาวอะคริลิคบน ด้านและ 2.5 ซม. กว้างอยู่ที่ระยะห่างจากแผ่น 15 ซม. จากด้านบนและ 4 เซนติเมตรจากปลายล่างของแผ่น คือ แผ่นเคลือบไฟเบอร์กลาส
ถูกวางไว้บนปลายล่างของเยื่อแผ่น เพื่อซ้อน 2 มม. ครับ เป็นแผ่นกรองวางซ้อนกัน 2 mm บนปลายล่างของผันปล่อยแผ่นเป็นแผ่นตัวอย่างและแผ่นอื่น ( CF4 ) ถูกวางทับซ้อนกัน 2 เดือนบนปลายบนของเยื่อ แสดงเป็น แผ่นรองดูดซับชุมนุมเย็นเคลือบใช้ 8 ซม. กว้างใสเทปกาว ลามิเนต 26 × 8 ซม. ประกอบที่ถูกตัดเป็นแถบด้านข้างไหล 8 × 0.4 เซนติเมตร
แถบที่ถูกเก็บไว้ในขวดพลาสติกบรรจุภัณฑ
สารดูดความชื้นแพ็ค