DNA methyltransferases catalyze the

DNA methyltransferases catalyze the transfer of a methyl group from S-adenosylmethionine to the target adenine or cytosine, eventually inducing the DNA methylation in both prokaryotes and eukaryotes. Herein, we developed a novel electrochemiluminescence biosensor to quantify DNA adenine methylation (Dam) methyltransferase (MTase) employing signal amplification of GO/AgNPs/luminol composites to enhance the assay sensitivity. The method was developed by designing a capture probe DNA, which was immobilized on gold electrode surface, to hybridize with azide complementary DNA to form the azide-terminated dsDNA. Then, alkynyl functionalized GO/AgNPs/luminol composites as the signal probe were immobilized to azide-terminated dsDNA modified electrode via click chemistry, resulting in a high electrochemiluminescence (ECL) signal. Once the DNA hybrid was methylated (under catalysis of Dam MTase) and further cleaved by Dpn I endonuclease (a site-specific endonuclease recognizing the duplex symmetrical sequence of 5′-G-Am-T-C-3′), GO/AgNPs/luminol composites release from the electrode surface to the solution, leading to significant reduction of the ECL signal.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

DNA methyltransferases กระตุ้นการโอนย้ายกลุ่มเมธิลจาก S adenosylmethionine คือเป้าหมายหรืออดี กระตุ้นให้เกิดการโรค prokaryotes และ eukaryotes ในที่สุด ในที่นี้ เราพัฒนา biosensor นวนิยาย electrochemiluminescence เป็นการวัดปริมาณดีเอ็นเอคืออัณฑะ (Dam) methyltransferase (MTase) ใช้ขยายสัญญาณของคอมโพสิตไปเทียบ AgNPs/ลู มินอลเพื่อเพิ่มความไวในการทดสอบ วิธีการได้รับการพัฒนา โดยการออกแบบจับโพรบดีเอ็นเอ ซึ่งถูกตรึงบนพื้นผิวอิเล็กโทรดทอง ไปอย่างยิ่งดีเอ็นเอเสริม azide เพื่อ dsDNA azide ยกเลิกการ แล้ว alkynyl ปรับหมู่ฟังก์ชั่นคอมโพสิตไปเทียบ AgNPs/ลู มินอลเป็นโพรบสัญญาณถูกตรึงกับอิเล็กโทรดแก้ไขยกเลิก azide dsDNA ผ่านคลิเคมี ผลสัญญาณสูง electrochemiluminescence (ECL) เมื่อดีเอ็นเอไฮบริเป็น methylated (ภายใต้การเร่งปฏิกิริยาของเขื่อน MTase) และเพิ่มเติม ถูกแบ่งออก โดย Dpn ฉัน endonuclease (มีเฉพาะไซต์ endonuclease ตระหนักสมมาตรลำดับสองของ 5′-G-Am-T-C-3′), คอมโพสิตไปเทียบ AgNPs/ลู มินอลออกจากพื้นผิวอิเล็กโทรดเพื่อการแก้ไขปัญหา นำไปสู่การลดลงของสัญญาณ ECL

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

methyltransferases ดีเอ็นเอกระตุ้นการถ่ายโอนของกลุ่มเมธิลจาก S-adenosylmethionine เพื่อ adenine เป้าหมายหรือ cytosine ที่ในที่สุดการกระตุ้นให้เกิดดีเอ็นเอ methylation ทั้งใน prokaryotes และยูคาริโอ ในที่นี้เราพัฒนาไบโอเซนเซอร์นวนิยาย electrochemiluminescence ปริมาณดีเอ็นเอ adenine methylation (เขื่อน) ใบพัด (MTase) การจ้างงานขยายสัญญาณของ GO คอมโพสิต / AgNPs / ลูมินอลเพื่อเพิ่มความไวของการทดสอบ วิธีการที่ได้รับการพัฒนาโดยการออกแบบดีเอ็นเอจับสอบสวนซึ่งถูกตรึงบนพื้นผิวขั้วไฟฟ้าทองที่จะผสมพันธุ์กับดีเอ็นเอเสริม azide แบบ azide สิ้นสุด dsDNA จากนั้นฟังก์ชัน alkynyl GO / AgNPs / คอมโพสิตลูมินอลเป็น probe สัญญาณที่ถูกตรึงสัญญาณ azide สิ้นสุด dsDNA ปรับเปลี่ยนขั้วไฟฟ้าผ่านคลิกเคมีส่งผลให้ electrochemiluminescence สูง (ECL) เมื่อไฮบริดได้รับการดีเอ็นเอเมทิลเลชั่น (ภายใต้การเร่งปฏิกิริยาของเขื่อน MTase) และตัดต่อไปโดย DPN ฉัน endonuclease (ก endonuclease เว็บไซต์ที่เฉพาะเจาะจงตระหนักถึงลำดับสมมาตรเพล็กซ์ของ 5'-G-Am-TC-3 '), GO / AgNPs / ลูมินอล คอมโพสิตปล่อยจากพื้นผิวขั้วไฟฟ้าเพื่อแก้ปัญหาที่นำไปสู่​​การลดความสำคัญของสัญญาณ ECL

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ดีเอ็นเอ methyltransferases เร่งโอนของกลุ่มเมธิลจาก s-adenosylmethionine ไปยังเป้าหมายและหรือย้ายถิ่นในที่สุด inducing methylation ดีเอ็นเอทั้งในโพรคาริโ และยูแคริโอต . ในที่นี้ เราพัฒนากระบวนการ electrochemiluminescence นวนิยายที่มีสารอัลคาลอยด์ methylation ดีเอ็นเอ ( เขื่อน ) methyltransferase ( การทำงาน ) การใช้สัญญาณแบบไป / agnps / ลูมินอลคอมโพสิตเพิ่มการทดสอบความไว วิธีการพัฒนาออกแบบตัดต่อดีเอ็นเอ ซึ่งถูกตรึงบนพื้นผิวขั้วไฟฟ้าทอง เพื่อผสมกับไซด์ประกอบดีเอ็นเอในรูปแบบไซด์ยกเลิก dsdna . แล้ว alkynyl ที่มีไป / agnps / ลูมินอลวัสดุผสมสัญญาณสอบสวนถูกตรึงให้ยกเลิก dsdna ดัดแปลงทางเคมีไฟฟ้าไซด์คลิก ส่งผลให้ electrochemiluminescence สูง ( ECL ) สัญญาณ เมื่อผสมดีเอ็นเอคือ methylated ( ภายใต้การเร่งการทำงานของเขื่อน ) และเพิ่มเติมโดย dpn ชั้นเอนโดนิวคลีเอส ( เฉพาะเอนโดนิวคลีเอสตระหนักถึงเพล็กซ์สมมาตรลำดับ 5 ’ - ’ g-am-t-c-3 ) ไป / agnps / ลูมินอล คอมโพสิต ปลดปล่อยจากพื้นผิวขั้วไฟฟ้าเพื่อแก้ปัญหาที่นำไปสู่การสัญญาณ ECL .