PCR amplificationTen ml of purified

PCR amplification
Ten ml of purified B. hominisculture were diluted (1:5)
in sterile, distilled water and boiled for 10min. Two to
five ml were used to amplify genomic sequences in a 50
ml reaction containing 0.2mMof the four dNTPs,
50pmol of each primer, buffer according to
manufacturer’s instructions and 1 U of Tfl-polymerase
(Biozym, Oldendorf, Germany). PCR conditions
consisted of 1 cycle denaturing at 948C for 4min, 35
cycles including annealing at 548C for 30 s, extending at
728C for 30 s, denaturing at 948C for 30s and an
additional cycle with a 5min chain elongation at 728C
(thermocycler Hybaid Omni Gene, MWG-BIOTECH,
Ebersberg, Germany). Five ml of the amplification
products were analysed by 1% agarose gel
electrophoresis. The forward primer F1 and the reverse
primer R1(forward, 5’-GGAGGTAGTGACAATAAATC-3’; reverse, 59-CGTTCATGATGAACAATTAC-3’) were constructed
according to the partly published sequence of the
ribosomal 16S-like rRNA of B. hominis(Johnson etal.
1989) at MWG (Ebersberg, Germany)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กระบือ10 ml ของ hominisculture B. บริสุทธิ์ถูกเจือจาง (1:5)ในปลอดเชื้อ น้ำกลั่น และต้ม 10 นาที สองถึง5 ml ใช้ขยายออกลำดับที่ 50มล.ที่ปฏิกิริยาที่ประกอบด้วย 0.2mMof dNTPs สี่50pmol แต่ละพื้น บัฟเฟอร์ตาม1 U ของ Tfl-พอลิเมอเรสและคำแนะนำของผู้ผลิต(Biozym, Oldendorf เยอรมนี) เงื่อนไข PCRประกอบด้วย 1 วงจร denaturing 948 c เป็นเวลา 4 นาที 35รอบรวมหลอมที่ 548C 30 s ขยายเวลา728C 30 s, denaturing ที่ 948C เวลาและวงจรเพิ่มเติม ด้วยการยืดโซ่ 5 นาทีที่ 728C(thermocycler Hybaid Omni ยีน MWG-เทคโนโลยีชีวภาพอันดับ เยอรมนี) 5 ml ของการขยายสัญญาณผลิตภัณฑ์ถูกวิเคราะห์ โดย 1% agarose เจลอิ รองพื้นไปข้างหน้า F1 และย้อนกลับรองพื้น R1 (5'-GGAGGTAGTGACAATAAATC-3 ไปข้างหน้า '; ย้อน กลับ 59-CGTTCATGATGAACAATTAC-3') ถูกสร้างขึ้นแปลงบางส่วนเผยแพร่ในการribosomal เหมือน 16S rRNA ของ hominis B. (จอห์นสัน etal1989) ที่ MWG (อันดับ เยอรมัน)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โดยเพิ่มจำนวน10 ml . hominisculture บริสุทธิ์ลด ( 1 : 5 )ในการฆ่าเชื้อน้ำและต้มเป็นเวลาสองวัน .5 ml ) ใช้อำนาจใน 50 ลำดับจีโนมปฏิกิริยาที่มีต่อ 0.2mmof dntps สี่ ,50pmol ของแต่ละสี บัฟเฟอร์ ตามคําแนะนําของผู้ผลิต และที่ 1 ของสาขาวิชาการ U( ไบโอไซมาโอลดินดอร์ฟ , เยอรมนี ) โดยเงื่อนไขจำนวน 1 วงจรี่ที่ 948c สำหรับ 4min 35วงจรรวมถึงการหลอมที่ 548c 30 s ขยายที่728c 30 S , ี่ที่ 948c สำหรับ 30 และอีกรอบกับ 5min โซ่ยืดที่ 728c( เทอมอไซเคล ์ hybaid mwg-biotech Omni , ยีนebersberg , เยอรมัน ) การเพิ่มปริมาณ 5 มิลลิลิตรผลิตภัณฑ์วิเคราะห์โดย 1% เจลเรส ส่งต่อรองพื้น F1 และย้อนกลับรองพื้น R1 ( เดินหน้า 5 " - ggaggtagtgacaataaatc-3 " ; กลับ 59-cgttcatgatgaacaattac-3 " ) ถูกสร้างตามเป็นลำดับ ของตีพิมพ์ไรโบโซม ( เช่น rRNA ( พ. hominis จอห์นสันคณะ .1989 ) ที่ mwg ( ebersberg , เยอรมัน )