reequilibration of the column for 5

reequilibration of the column for 5 min. The flow rate was 0.5 ml/min and injection volume was 20 μl. UV–vis absorption spectra were recorded online from 190 to 600 nm during the HPLC analysis. Standard kaempferol (Sigma-Aldrich, Co. USA), were used to calibrate the standard curve. The DAAD detection was conducted at 254 nm for the quantification. The compound was identified and quantified by comparing both retention times and UV–vis spectra with those of pure standard. The results were expressed as microgram of kaempferol per one gram of ZZ. 2.6 Detection of Hydroxyl Radicals by Deoxyribose Assay The assay was performed as described by Halliwell et al. [24] and Stoilova et al. [25]. All solutions were freshly prepared. One ml of the reaction mixture contained 100 µl of 28 mM 2-deoxy-ribose (dissolved in KH2PO4–K2HPO4 buffer, pH 7.4), 500 µl solution of various concentrations of the extract (at final concentration of 15, 30, 60 and 120 µg/ml in the reaction mix), 200 µl of 200 M FeCl3 and 1.04 mM EDTA (1:1 v/v), 100 µl H2O2 (1.0 mM) and 100 µl ascorbic acid (1.0 mM). After an incubation period of 1 h at 37°C the extent of deoxyribose degradation was measured by the TBA reaction. 1.0 ml of TBA (1% in 50 mM NaOH) and 1.0 ml of 2.8% TCA were added to the reaction mixture and the tubes were heated at 100 °C for 20 min. After cooling, the absorbance was read at 532 nm against a blank (containing only buffer and deoxy-ribose). The percentage inhibition (I %) was calculated by the formula: I% = 100 – (Abs.sample / Abs.control) X 100 The IC50 value represents the concentration of the compounds that caused 50% inhibition of radical formation. Quercetin was used as a positive control. The data obtained at each point were the average of three measurements. 2.7 Scavenging effect on 2, 2-di (4-tert-octylphenyl)-1-picrylhydrazyl free radical The DPPH radical scavenging capacity was determined using the method described by Liu et al. [26] and Lu et al. [27]. 10 μl ethanolic extracts (at final concentration of 15, 30, 60 and 120 µg/ml in the reaction mix) were mixed with 3 ml of 6×10−5 M DPPH in ethanol. After 30 min of incubation in the dark at room temperature, the absorbance at 517 nm was measured against blank. The inhibition percentage of DPPH radical was calculated according to the formula [28]: DPPH radical scavenging capacity % = [(ADPPH–AEXTR) / ADPPH] ×100 Where, ADPPH is the absorbance of the control solution (containing only DPPH), and AEXTR is the absorbance in the presence of antioxidant. The IC50 value represents the concentration of the compound that caused 50% inhibition of radical formation. Ascorbic acid was used as a positive control. The data obtained at each point were the average of three measurements.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

reequilibration คอลัมน์สำหรับ 5 นาที อัตราการไหล 0.5 มิลลิลิตร/นาที และปริมาตรการฉีด 20 μl ถูกบันทึกสเปกตรัมดูดซึม UV – vis ออนไลน์จาก 190 600 nm ในช่วงวิเคราะห์ HPLC Kaempferol มาตรฐาน (สหรัฐอเมริกา บริษัท Sigma Aldrich), ใช้ในการปรับเทียบกราฟมาตรฐาน ดำเนินการตรวจสอบคาดที่ 254 nm สำหรับการนับ สารประกอบระบุ และวัด โดยการเปรียบเทียบเวลาเก็บรักษาและ UV – vis สเป็คกับบริสุทธิ์มาตรฐาน ผลลัพธ์ได้แสดงเป็นไมโครกรัมของ kaempferol ต่อหนึ่งกรัมของ ZZ 2.6 การตรวจจับของอนุมูลไฮดรอกโดย Deoxyribose ทดสอบดำเนินการทดสอบตามที่อธิบายไว้ โดย Halliwell ร้อยเอ็ด [24] และ Stoilova et al. [25] โซลูชันทั้งหมดที่ปรุงสดใหม่ หนึ่งมิลลิลิตรผสมปฏิกิริยาอยู่ 100 µl ของ 28 มม. 2-deoxy-น้ำตาล (ละลาย KH2PO4 – K2HPO4 บัฟเฟอร์ ค่า pH 7.4), µl โซลูชันต่าง ๆ ความเข้มข้นของสารสกัดที่ความเข้มข้นสุดท้ายของ 15, 30, 60 และ 120 µg/ml ในผสมปฏิกิริยา), 200 µl ของ 200 M EDTA FeCl3 และ 1.04 มิลลิเมตร (1:1 v/v) 100 µl H2O2 (1.0 mM) และกรดแอสคอร์บิค 100 µl (1.0 mM) 500 หลังจากบ่มเป็นระยะเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37° C มีวัดขอบเขต deoxyribose สลาย โดยปฏิกิริยา TBA 1.0 ml ของ TBA (1% NaOH 50 มม.) และ 1.0 มิลลิลิตร 2.8% TCA เพิ่มผสมปฏิกิริยาและหลอดถูกทำให้ร้อนที่ 100 ° C เป็นเวลา 20 นาที หลังจากเย็น absorbance ที่อ่านที่ 532 nm กับว่างเปล่า (ประกอบด้วยบัฟเฟอร์และ deoxy-น้ำตาลเท่านั้น) เปอร์เซ็นต์การยับยั้ง (ฉัน%) คำนวณตามสูตร: ฉัน% = 100 – (Abs.sample / Abs.control) X 100 IC50 ค่าแสดงความเข้มข้นของสารที่ 50% การยับยั้งการก่อตัวรุนแรง Quercetin ถูกใช้เป็นตัวบวก ข้อมูลที่แต่ละจุดมีค่าเฉลี่ยการวัด 3 2.7 scavenging ผล 2, 2-di (4-tert-octylphenyl) -1-picrylhydrazyl อนุมูลอิสระ DPPH รุนแรงจุ scavenging กำหนดใช้วิธีการอธิบาย โดย Liu et al. [26] และ Lu et al. [27] สารสกัด ethanolic μl 10 (ที่ความเข้มข้นสุดท้ายของ 15, 30, 60 และ 120 µg/ml ในผสมปฏิกิริยา) ถูกผสมกับ 3 ml ของ 6 × 10−5 M DPPH ในเอทานอล หลังจาก 30 นาทีบ่มในมืดที่อุณหภูมิห้อง absorbance ที่ 517 nm มีวัดเทียบกับว่างเปล่า เปอร์เซ็นต์การยับยั้งของอนุมูล DPPH ได้คำนวณตามสูตร [28]: DPPH scavenging %ความรุนแรง = [(ADPPH–AEXTR) / ADPPH] × 100 ที่ ADPPH absorbance ของโซลูชันควบคุม (ที่ประกอบด้วยเฉพาะ DPPH), และ AEXTR absorbance ในสารต้านอนุมูลอิสระ ค่า IC50 แทนความเข้มข้นของสารที่ 50% การยับยั้งการก่อตัวของอนุมูลอิสระ กรดแอสคอร์บิคถูกใช้เป็นตัวบวก ข้อมูลที่แต่ละจุดมีค่าเฉลี่ยการวัด 3

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

reequilibration ของคอลัมน์เป็นเวลา 5 นาที อัตราการไหล 0.5 มล. / นาทีและปริมาณการฉีดเป็น 20 ไมโครลิตร UV-Vis สเปกตรัมการดูดซึมที่ถูกบันทึกออนไลน์ 190-600 นาโนเมตรในระหว่างการวิเคราะห์ HPLC ได้ มาตรฐานเฟอรอล (Sigma-Aldrich จำกัด USA) ถูกนำมาใช้ในการปรับเส้นโค้งมาตรฐาน การตรวจสอบ DAAD ได้ดำเนินการที่ 254 นาโนเมตรสำหรับปริมาณ สารประกอบที่ถูกระบุและวัดโดยการเปรียบเทียบทั้งสองครั้งการเก็บรักษาและ UV-Vis สเปกตรัมกับผู้บริสุทธิ์มาตรฐาน ผลการวิจัยที่แสดงเป็นไมโครกรัมเฟอรอลต่อหนึ่งกรัมของ ZZ 2.6 การตรวจหาอนุมูลไฮดรอกซิโดย Deoxyribose Assay ผลการวิเคราะห์ที่ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้โดยฮอล์ลิ et al, [24] และ Stoilova et al, [25] โซลูชั่นทั้งหมดถูกปรุงสดใหม่ หนึ่งมิลลิลิตรผสมปฏิกิริยาที่มีอยู่ 100 ไมโครลิตร 28 มิลลิ 2 Deoxy-น้ำตาล (ละลายใน KH2PO4-K2HPO4 บัฟเฟอร์ค่า pH 7.4), การแก้ปัญหาไมโครลิตร 500 ของความเข้มข้นต่างๆของสารสกัด (ที่มีความเข้มข้นสุดท้ายของ 15, 30, 60 และ 120 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรในการผสมปฏิกิริยา) 200 ไมโครลิตร 200 M FeCl3 และ 1.04 มิลลิ EDTA (1: 1 v / v) 100 ไมโครลิตร H2O2 (1.0 มิลลิเมตร) และกรดไมโครลิตร 100 ซี (1.0 มิลลิเมตร) หลังจากระยะฟักตัวประมาณ 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสขอบเขตของการย่อยสลาย Deoxyribose ถูกวัดจากปฏิกิริยา TBA 1.0 มิลลิลิตร TBA (1% ในขนาด 50 มม NaOH) และ 1.0 มล. 2.8% TCA ถูกเพิ่มเข้าไปผสมปฏิกิริยาและท่อที่ถูกความร้อนที่อุณหภูมิ 100 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 นาที หลังจากเย็น, การดูดกลืนแสงที่ถูกอ่านได้ที่ 532 นาโนเมตรเทียบกับที่ว่างเปล่า (ที่มีเพียง buffer และ Deoxy-น้ำตาล) การยับยั้งเปอร์เซ็นต์ (I%) ที่คำนวณได้จากสูตร: I% = 100 - (Abs.sample / Abs.control) x 100 ค่า IC50 แสดงให้เห็นถึงความเข้มข้นของสารที่ทำให้เกิดการยับยั้ง 50% ของการก่อตัวรุนแรง Quercetin ถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุมในเชิงบวก ข้อมูลที่ได้ในแต่ละจุดได้เฉลี่ยของสามวัด 2.7 ผลการขับบน 2, 2-di (4-tert-octylphenyl) -1-picrylhydrazyl อนุมูลอิสระความจุ DPPH ในหัวรุนแรงถูกกำหนดโดยใช้วิธีการอธิบายโดย Liu et al, [26] และ Lu et al, [27] สารสกัดเอทานอล 10 ไมโครลิตร (ที่มีความเข้มข้นสุดท้ายของ 15, 30, 60 และ 120 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรในการผสมปฏิกิริยา) ได้รับการผสมกับ 3 มิลลิลิตร 6 × 10-5 M DPPH ในเอทานอล หลังจาก 30 นาทีของการบ่มในที่มืดที่อุณหภูมิห้อง, การดูดกลืนแสงที่ 517 นาโนเมตรได้รับการวัดกับว่างเปล่า เปอร์เซ็นต์การยับยั้งการ DPPH รุนแรงที่คำนวณตามสูตร [28]: DPPH รุนแรงจุไล่% = [(ADPPH-AEXTR) / ADPPH] × 100 ที่ไหน ADPPH คือการดูดกลืนแสงของการแก้ปัญหาการควบคุม (ที่มีเพียง DPPH) และ AEXTR คือการดูดกลืนแสงในที่ที่มีสารต้านอนุมูลอิสระที่ ค่า IC50 แสดงให้เห็นถึงความเข้มข้นของสารที่ทำให้เกิดการยับยั้ง 50% ของการก่อตัวรุนแรง วิตามินซีได้ถูกใช้เป็นตัวควบคุมในเชิงบวก ข้อมูลที่ได้ในแต่ละจุดได้เฉลี่ยของสามวัด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

reequilibration ของคอลัมน์สำหรับ 5 นาทีอัตราการไหลเท่ากับ 0.5 มล. / นาทีและปริมาณการฉีด 20 μลิตรและสเปกตรัมการดูดกลืน UV Vis บันทึกออนไลน์จาก 190 ไป 600 nm ในการวิเคราะห์ปริมาณซูโครส แคมเฟอรอลมาตรฐาน ( ซิกม่า Aldrich Co . , USA ) ถูกใช้ในการปรับเส้นโค้งมาตรฐาน DAAD ตรวจสอบดำเนินการที่ 254 nm สำหรับปริมาณ . สารประกอบถูกระบุและ quantified โดยเปรียบเทียบทั้งความคงทนและ UV Vis ครั้ง–สเปกตรัมที่มีมาตรฐานอย่างแท้จริง ผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นไมโครกรัมของแคมเฟอรอลต่อหนึ่งกรัมของไจ๋ . 2.6 การตรวจหาอนุมูลไฮดรอกซิลโดยดีออกซีไรโบส assay ( ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้โดย Halliwell et al . [ 24 ] และ stoilova et al . [ 25 ] โซลูชั่นทั้งหมดเตรียมสด ๆ หนึ่งมิลลิลิตรปฏิกิริยาผสมบรรจุ 100 µ L 28 มม. 2-deoxy-ribose ( ละลายใน kh2po4 – k2hpo4 buffer pH 7.4 ) , 500 µ L สารละลายความเข้มข้นต่าง ๆ ของสารสกัดที่ความเข้มข้นสุดท้าย 15 , 30 , 60 และ 120 µ g / ml ในปฏิกิริยาผสม ) 200 µ L 200 เมตร FeCl3 และ 1.04 mM EDTA ( 1 : 1 v / v ) L 100 µ H2O2 ( มม. ) และ 100 µ l กรดแอสคอร์บิค ( มม. ) ผ่านระยะฟักตัว 1 H ที่ 37 ° C ระดับของการย่อยสลายดีออกซีไรโบสวัดโดย TBA ปฏิกิริยา 1.0 มล. TBA ( 1 ใน 50 mm NaOH ) และ 1.0 มล. 2.8 % TCA มีการเพิ่มปฏิกิริยาผสมและท่อ คือความร้อนที่ 100 °องศาเซลเซียส 20 นาที หลังจากเย็น , การดูดกลืนแสงก็อ่านที่ 532 nm กับว่าง ( ที่มีบัฟเฟอร์เท่านั้น และดีอ ซีหน้าตัวเมีย ) ค่าร้อยละ ( % ) และคำนวณโดยสูตร : ฉัน % = 100 ) ( abs.sample / ABS ควบคุม ) x 100 ic50 ค่าแสดงถึงความเข้มข้นของสารประกอบที่ทำให้เกิดการยับยั้งการ 50% ของราก สารเคอร์ซิทิน ถูกใช้เป็นตัวควบคุมบวก ข้อมูลที่ได้ในแต่ละจุดมีเฉลี่ยสามวัด 2.7 การต่อ 2 , 2-di ( 4-tert-octylphenyl ) - 1-picrylhydrazyl อนุมูลอิสระที่เป็นตัวเร่งปฏิกิริยา dpph ความจุก็ตัดสินใจใช้วิธีอธิบายโดย Liu et al . [ 26 ] และ Lu et al . [ 27 ] 10 μ L ( สารสกัดที่ความเข้มข้นสุดท้าย 15 , 30 , 60 และ 120 µ g / ml ในปฏิกิริยาผสม ) ผสม 6 × 10 − 3 ml 5 M dpph ในเอทานอล หลังจาก 30 นาทีของการบ่มเพาะในที่มืดอุณหภูมิห้อง , การดูดกลืนแสงที่ 517 nm เป็นวัดกับว่างเปล่า และร้อยละของ dpph หัวรุนแรงได้คำนวณตามสูตร [ 28 ] : dpph เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาความจุ % = [ ( adpph – aextr ) / adpph ] × 100 ที่ไหน adpph คือการดูดกลืนแสงของสารละลายควบคุม ( ที่มีเพียง dpph ) และ aextr เป็นค่าในการแสดงตนของสารต้านอนุมูลอิสระ ค่า ic50 แสดงถึงความเข้มข้นของสารประกอบที่ทำให้เกิดการยับยั้งการ 50% ของราก กรดแอสคอร์บิค ถูกใช้เป็นตัวควบคุมบวก ข้อมูลที่ได้ในแต่ละจุดมีเฉลี่ยสามวัด