Semi-quantitative RT-PCRSemi-quanti

Semi-quantitative RT-PCR
Semi-quantitative RT-PCR was performed using primers as
listed in Supplemental Table 4. The primers of the glutamyl-tRNA
reductase (Glu-TR) gene, Mg chelatase H subunit (MgCh-H) gene,
NADPH-protochlorophyllide (POR) gene, and actin3 (ACT3) were
designated as each gene of C. sativus, D50407, DQ641092, D50085,
and DQ115883, respectively. PCR amplification was carried out for
respective cycles in an automated thermocycler (Bio-Rad iCycler)
with the thermocycle profile (denaturation at 95 ◦C for 30 s, primers
annealing at 50 ◦C for 1 min, and primer extension at 72 ◦C for 1 min)
after incubation at 95 ◦C for 2 min, and subsequently a post-PCR
incubation was carried out at 72 ◦C for 5 min. The amplification
cycles for Glu-TR, MgCh-D, MgCh-H, POR, CS, CAO, CBR, PPH, PAO,
RCCR, and ACT3 were 29, 29, 26, 24, 31, 27, 26, 25, 27, 27, and 24,
respectively.
Extraction and analysis of chlorophyll a/b binding protein (LHCP)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กึ่งเชิงปริมาณ RT-PCR
กึ่งเชิงปริมาณ RT-PCR ได้รับการดำเนินการโดยใช้ไพรเมอร์ที่
ระบุไว้ในตารางที่ 4 เสริมไพรเมอร์ของ glutamyl-tRNA
reductase (Glu-TR) ยีน Mg chelatase H subunit (MgCh-H) ยีน
NADPH -protochlorophyllide (POR) ยีนและ actin3 (Act3) ได้รับการ
กำหนดให้เป็นยีนของ C. หญ้าฝรั่น, D50407, DQ641092, D50085 แต่ละ
และ DQ115883 ตามลำดับ PCR ขยายได้รับการดำเนินการสำหรับ
รอบที่เหมาะสมในเครื่อง thermocycler อัตโนมัติ (ชีวภาพ -Rad ปฏิทินสาธารณะ)
มีรายละเอียด thermocycle (denaturation ที่ 95 ◦Cเป็นเวลา 30 วินาที, ไพรเมอร์
หลอมที่ 50 ◦Cเป็นเวลา 1 นาทีและขยายไพรที่ 72 ◦Cสำหรับ 1 นาที)
หลังจากบ่มที่ 95 ◦Cเป็นเวลา 2 นาทีและต่อมาการโพสต์ PCR
บ่มได้ดำเนินการที่ 72 ◦Cเป็นเวลา 5 นาที การขยาย
วงจรสำหรับ Glu-TR, MgCh-D, MgCh-H, POR, CS, CAO, CBR, PPH, อบจ,
RCCR และ Act3 เป็น 29, 29, 26, 24, 31, 27, 26, 25, 27 , 27, และ 24
ตามลำดับ
การสกัดและวิเคราะห์คลอโรฟิล / b โปรตีน (LHCP)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิธี RT-PCR กึ่งปริมาณ กึ่งปริมาณการใช้ไพรเมอร์เป็น
อยู่ในโต๊ะเสริม 4 ไพรเมอร์ของ glutamyl ทีอาร์เอ็นเอ
รีดักเทส ( GLU TR ) ยีน มก. chelatase H subunit ( mgch-h ยีน
nadph protochlorophyllide ( ปอ ) ยีน และ actin3 ( act3 )
เขตแต่ละยีนที่สร้าง d50407 C , dq641092 d50085
, , , และ dq115883 ตามลำดับการขยาย PCR พบว่าเกี่ยวข้องใน
รอบอัตโนมัติเทอร์โมไซเคล ์ ( ไบโอ ราด icycler )
กับโปรไฟล์ thermocycle ( ( 95 ◦เป็นเวลา 30 วินาที ด้วย
◦ annealing ที่ 50 องศาเซลเซียสนาน 1 นาที และใช้นามสกุลที่ 72 ◦องศาเซลเซียสนาน 1 นาที )
หลังจากการบ่มที่ 95 ◦ C 2 มิน และต่อมาโพสต์โดย
การบ่มทำการ◦ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาทีโดยการเพิ่ม
รอบสำหรับ GLU TRmgch-d mgch-h , พ. , CS , CaO , CBR , ซึ่งเปา
, , rccr และ act3 เฉลี่ย 29 , 29 , 26 , 24 , 26 , 27 , 23 , 25 , 27 , 27 และ 24 ตามลำดับ
.
การสกัดและการวิเคราะห์ปริมาณโปรตีน ( lhcp ) / บี