2.3. Inocula preparation and meat i

2.3. Inocula preparation and meat inoculation
Frozen E. coli and Salmonella strains were revived by growth in
BHI broth for 24 h at 35e37
C. A loopful of broth was then streaked
on BHI agar plates and incubated at 35e37
C for 24 h. One colony
from each strain was transferred to 10 ml BHI broth and grown at
35e37
C for 24 h. In initial tests bacteria were inoculated at
7 log CFU/g, and in a second series of experiments 5 log CFU/g was
used. For the 7 log CFU/g bacterial inoculation, 0.3 ml from 10 ml
overnight cultures of E. coli strains, and 0.4 ml from overnight
cultures of Salmonella strains were transferred, respectively, to 300
or 400 ml BHI broth, and incubated at 35e37
C for 24 h. For the
5 log CFU/g bacterial inoculation, 0.1 ml from a 10 ml overnight
culture was transferred to 100 ml BHI broth. Cultures were then
centrifuged for 10 min at 3752  g (Avanti centrifuge J-26XP,
Beckman Coulter, Palo Alto, CA, USA). Supernatants were discarded
and pellets were suspended in their original volumes of 0.1%
peptone water. For each group, cultures were mixed and brought to
1.2 L with 0.1% peptone water for the 7 log CFU/ml inoculum or to
1.5 L for the 5 log CFU/ml inoculum. Meat pieces were dipped into
the culture cocktails, transferred to a sterile plastic bag and
massaged to facilitate even distribution of bacteria. A similar procedure
has been used for beef surface inoculation by others
(Chancey et al., 2013; Zhao et al., 2014). Following preliminary trials
which showed Salmonella required longer attachment times, meat
pieces were held in the E. coli culture cocktails for 10e20 s, while
samples inoculated with Salmonella were held 5 min in the cocktail.
Meat samples were placed on sterile racks in a biohazard hood and
allowed to drip for approximately 2 min. Half of the inoculated
meat samples were dipped into 500 ml of 5% (v/v) lactic acid solution
(lactic acid, 85%, Anachemia Canada Inc., Montreal, QC), at
55
C in a water bath for 30 s, to represent methods used by Pittman
et al. (2012) and King et al. (2005), and then allowed to drain for
2 min. Samples inoculated at 7 log CFU/g were placed in Winpak
Deli *1 (7  9 cm) bags, aerobically, heat-sealed and kept at 4
C,

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3. inocula inoculation เตรียมและเนื้อมีฟื้นฟูสายพันธุ์ E. coli และสายน้ำแข็ง โดยเติบโตในซุป BHI ใน 24 ชมที่ค. 35e37 แล้วมีลาย loopful ของซุปใน BHI agar แผ่น และ incubated ที่ 35e37 C ใน 24 ชม ฝูงหนึ่งจากการโอนย้ายไป 10 ml BHI ซุป และโตที่ต้องใช้C 35e37 ใน 24 ชม ในการเริ่มต้นทดสอบ แบคทีเรียถูก inoculated ที่7 ระบบ CFU/g และในชุดที่สองของการทดลอง 5 ล็อก เป็น CFU/gใช้ สำหรับล็อก 7 CFU/g จากแบคทีเรีย inoculation, 0.3 ml จาก 10 mlค้างคืนวัฒนธรรมของ E. coli สายพันธุ์ และ 0.4 ml จากแอร์พอร์ตโอเวอร์ไนท์วัฒนธรรมของสายพันธุ์สายถูกโอนย้าย ตามลำดับ ไป 300หรือ 400 ml BHI ซุป และ incubated ที่ 35e37 C ใน 24 ชม สำหรับการนอน 0.1 มล.จาก 10 ml CFU/g จากแบคทีเรีย inoculation ล็อก 5วัฒนธรรมถูกถ่ายโอนไปซุป BHI 100 มล วัฒนธรรมได้แล้วcentrifuged ใน 10 นาทีที่ 3752 g (เรียนโรสเครื่องหมุนเหวี่ยง J-26XPBeckman Coulter ดัลลัส CA, USA) Supernatants ถูกละทิ้งและขี้ถูกหยุดชั่วคราวในไดรฟ์ของเดิมของ 0.1%น้ำ peptone สำหรับแต่ละกลุ่ม วัฒนธรรมถูกผสม และนำไป1.2 L น้ำ 0.1% peptone ล็อก 7 inoculum CFU/ml หรือเพื่อ1.5 L สำหรับ 5 ล็อก inoculum CFU/ml ชิ้นเนื้อได้สอดเข้าไปในค็อกเทลวัฒนธรรม การโอนย้ายไปใส่ถุงพลาสติก และนวดเพื่อช่วยในการกระจายแบบสม่ำเสมอของแบคทีเรีย ขั้นตอนที่คล้ายกันใช้สำหรับ inoculation ผิวเนื้อ โดยผู้อื่น(Chancey et al., 2013 เจียว et al., 2014) การทดลองเบื้องต้นต่อไปนี้ซึ่งแสดงให้เห็นว่า สายต้องยาวแนบครั้ง เนื้อชิ้นถือได้ว่าเป็นค็อกเทลวัฒนธรรม E. coli สำหรับ 10e20 s ขณะที่ตัวอย่าง inoculated มีสายถือได้ว่าเป็น 5 นาทีค็อกเทลตัวอย่างเนื้อถูกวางไว้บนชั้นวางใส่ในฮูด biohazard และสามารถหยดในประมาณ 2 นาทีครึ่งหนึ่งของที่ inoculatedตัวอย่างเนื้อได้สอดลงใน 500 มิลลิลิตรของกรด 5% (v/v)(กรด 85%, Anachemia Canada Inc. มอนทรีออล QC), ที่C 55 ในอ่างน้ำสำหรับ 30 s เพื่อแสดงวิธีใช้ Pittmanal. ร้อยเอ็ด (2012) และกษัตริย์ร้อยเอ็ด al. (2005), และสามารถระบายน้ำสำหรับ2 นาทีตัวอย่าง inoculated ที่ 7 บันทึกไว้ใน Winpak CFU/gเดลี่ * 1 (7 9 ซม) ถุง aerobically, heat-sealed และเก็บไว้ที่ 4 C

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 Inocula การเตรียมการและการฉีดวัคซีนเนื้อสัตว์
แช่แข็งเชื้อ E. coli และสายพันธุ์เชื้อ Salmonella ถูกฟื้นขึ้นมาจากการเติบโตใน
น้ำซุป BHI 24 ชั่วโมงที่ 35e37 องศาเซลเซียส loopful ของน้ำซุปได้รับลายแล้ว
ใน BHI แผ่นวุ้นและบ่มที่ 35e37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง หนึ่งอาณานิคม
จากแต่ละสายพันธุ์ก็ถูกย้ายไป 10 มิลลิลิตรน้ำซุป BHI และเติบโตใน
35e37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ในการทดสอบครั้งแรกถูกเชื้อแบคทีเรียที่
7 log CFU / g และในชุดที่สองของการทดลอง 5 log CFU / g ที่ถูก
นำมาใช้ สำหรับ 7 log CFU / กรัมฉีดวัคซีนแบคทีเรีย 0.3 มล. 10 มล
วัฒนธรรมในชั่วข้ามคืนของ E. coli สายพันธุ์และ 0.4 มิลลิลิตรจากค้างคืน
วัฒนธรรมของสายพันธุ์เชื้อ Salmonella ถูกย้ายตามลำดับถึง 300
หรือ 400 มล. น้ำซุป BHI และบ่มที่ 35e37? C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง สำหรับ
5 log CFU / กรัมฉีดวัคซีนแบคทีเรีย 0.1 มลจากค้างคืน 10 ml
วัฒนธรรมถูกย้ายไป 100 มล. น้ำซุป BHI วัฒนธรรมจากนั้นก็
ปั่นเป็นเวลา 10 นาทีที่ 3752? กรัม (Avanti centrifuge J-26XP,
Beckman Coulter, พาโลอัลโต, CA, USA) supernatants ถูกโยนทิ้ง
และเม็ดถูกระงับในปริมาณเดิมที่ 0.1%
น้ำเปปโตน สำหรับแต่ละกลุ่มวัฒนธรรมถูกผสมและนำไป
1.2 ลิตรที่มีน้ำเปปโตน 0.1% ใน 7 log CFU / มลเชื้อหรือ
1.5 ลิตรสำหรับ 5 log CFU / มลเชื้อ ชิ้นส่วนเนื้อสัตว์ที่ถูกจุ่มลงไปใน
เครื่องดื่มค็อกเทลวัฒนธรรมโอนไปยังถุงพลาสติกปลอดเชื้อและ
นวดเพื่อความสะดวกในการกระจายของเชื้อแบคทีเรีย ขั้นตอนที่คล้ายกัน
ถูกนำมาใช้สำหรับการฉีดวัคซีนผิวเนื้อของผู้อื่น
(Chancey, et al, 2013;.. Zhao et al, 2014) ต่อไปนี้การทดลองเบื้องต้น
ที่แสดงให้เห็นว่าเชื้อ Salmonella จำเป็นครั้งสิ่งที่แนบเนื้อ
ชิ้นถูกจัดขึ้นใน E. coli วัฒนธรรมค็อกเทลสำหรับ 10e20 วินาที, ในขณะที่
กลุ่มตัวอย่างที่มีเชื้อ Salmonella ถูกจัดขึ้นเป็นเวลา 5 นาทีในค๊อกเทล.
ตัวอย่างเนื้อสัตว์ถูกวางไว้บนชั้นวางผ่านการฆ่าเชื้อในเครื่องดูดควันปลอดเชื้อ และ
ได้รับอนุญาตให้หยดประมาณ 2 นาที ครึ่งหนึ่งของเชื้อ
ตัวอย่างเนื้อถูกจุ่มลงไปใน 500 มล 5% (v / v) สารละลายกรดแลคติก
(กรดแลคติก 85% Anachemia แคนาดาอิงค์, มอนทรีออ QC) ที่
55 องศาเซลเซียสในอ่างน้ำสำหรับ 30 วินาที เพื่อเป็นตัวแทนของวิธีการที่ใช้โดยพิตต์แมน
และคณะ (2012) และพระมหากษัตริย์และคณะ (2005) และได้รับอนุญาตให้ระบายน้ำสำหรับ
2 นาที ตัวอย่างเชื้อที่ 7 log CFU / g ที่ถูกวางไว้ใน Winpak
Deli * 1 (7? 9 ซม.) ถุงออกซิเจนความร้อนปิดผนึกและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส,

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 การเตรียมและแช่แข็ง เนื้อ inocula
( E . coli Salmonella สายพันธุ์ revived โดยการเจริญเติบโตใน BHI broth
24 H ที่ 35e37
C loopful broth จากนั้นลาย
บนจานวุ้น BHI บ่มที่ 35e37
C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ฝูงหนึ่ง
จากแต่ละสายพันธุ์มา 10 ml และเติบโตใน BHI broth
35e37
C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ในการทดสอบแบคทีเรียเริ่มต้นปลูกเชื้อที่
7 log CFU / กรัมและในชุดที่สองของการทดลอง 5 log CFU / g
ใช้ . สำหรับ 7 log CFU / กรัมแบคทีเรียเชื้อ 0.3 ml 10 ml
ค้างคืนวัฒนธรรมของ E . coli สายพันธุ์และ 0.4 มล. จากวัฒนธรรมของเชื้อซัลโมเนลลาสายพันธุ์ค้างคืน

โอน 4 , 300 หรือ 400 ml BHI broth บ่มที่ 35e37
C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง สำหรับ
5 log CFU / กรัม แบคทีเรียเชื้อ 0.1 มิลลิลิตร จาก 10 ml ค้างคืน
วัฒนธรรมถูกย้ายไป 100 ml BHI broth . วัฒนธรรมระดับแล้ว
10 นาทีที่ 3752  g (
j-26xp AVANTI centrifuge , เบคแมน คูลเตอร์ , พาโลอัลโต แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา ) supernatants ถูกละทิ้ง
และเม็ดถูกระงับในต้นฉบับเล่ม 0.1 %
เปปโตนน้ำ สำหรับแต่ละกลุ่มวัฒนธรรมผสมมาให้
1.2 ลิตร 0.1% เปปโตนน้ำ 7 log CFU / ml ปริมาณหรือ

15 ลิตร สำหรับ 5 log cfu / ml โดย . ชิ้นเนื้อถูกจุ่ม
วัฒนธรรมค๊อกเทล ย้ายไปที่เป็นหมัน ถุงพลาสติกและ
นวดเพื่อความสะดวกในการกระจายตัวของแบคทีเรีย a
กระบวนการคล้ายคลึงกันมีการใช้ ( ผิวเนื้อโดยผู้อื่น
( แชนซี่ et al . , 2013 ; Zhao et al . , 2010 ) ต่อไปนี้การทดลองเบื้องต้นพบเชื้อซัลโมเนลลาซึ่งเป็นครั้ง

เนื้อแนบอีกต่อไปชิ้นที่ถูกจัดขึ้นใน E . coli วัฒนธรรมค๊อกเทลสำหรับ 10e20 s ในขณะที่ตัวอย่างเชื้อ Salmonella ที่ถูกจัดขึ้นด้วย

5 นาทีในค็อกเทล ตัวอย่างเนื้อถูกวางไว้บนชั้นวางในเครื่องดูดควัน และปลอดเชื้อ Biohazard
อนุญาตให้หยดประมาณ 2 นาทีครึ่ง ของจำนวนเชื้อ
เนื้อจุ่ม 5% ( 500 มล. ปริมาตรสารละลาย กรดแลกติก ( lactic กรด
, 85% แคนาดาแคนาดาอิงค์ , มอนทรีออ , QC ,
) ที่55
C ในอ่างน้ำ 30 s เพื่อแสดงวิธีการที่ใช้ โดยพิตต์แมน
et al . ( 2012 ) และกษัตริย์ et al . ( 2005 ) , และได้รับอนุญาตแล้วให้ระบายสำหรับ
2 นาที ตัวอย่างเชื้อที่ 7 log CFU / g อยู่ใน Winpak
เดลี่ * 1 ( 7  9 cm ) กระเป๋า aerobically ความร้อนปิดผนึกและเก็บไว้ใน

4 C