HRM real-time PCR assayFor differen

HRM real-time PCR assay
For differential detection, a LightCycler 480 High Resolution Melting Master Kit (Roche Applied Science, Mannheim, Germany) was used. The reaction mixture contained 1× LightCycler 480 HRM Master Mix, which comprises HRM dye (Roche Applied Science), 2.25 mM MgCl2, and each of 0.4 μM Schis_F and Schis_R primers. The total reaction volume was 20 μl. The PCR cycling for HRM curve presentation was done under the following conditions: 1 hold at 95˚C for 10 min; 45 cycles of 95˚C for 10 sec, 55˚C for 8 sec, and 72˚C for 15 sec; then, the mixture was held at 95˚C for 10 sec and 60˚C for 30 sec. The reaction products were then melted by increasing the temperature from 60˚C to 95˚C, with an increment of 0.11˚C/sec,

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

HRM วิเคราะห์ PCR แบบเรียลไทม์สำหรับตรวจหาส่วนที่แตกต่าง มีใช้ LightCycler 480 สูงความละเอียดละลายหลักชุด (โรใช้วิทยาศาสตร์ มา เยอรมนี) ส่วนผสมของปฏิกิริยาอยู่ 1 × LightCycler 480 HRM หลักผสม ซึ่งประกอบด้วย HRM ย้อม (Roche ใช้วิทยาศาสตร์), หุ้น 2.25 mM MgCl2 และ 0.4 μM Schis_F และ Schis_R ไพรเมอร์แต่ละ ปริมาตรรวมปฏิกิริยาถูก 20 μl ทำ PCR จักรยานสำหรับ HRM โค้งนำเสนอภายใต้เงื่อนไขต่อไปนี้: ค้าง 1 ที่ 95˚C สำหรับ 10 นาที 45 รอบของ 95˚C ใน 10 วินาที 55˚C 8 วินาที และ 72˚C ใน 15 วินาที แล้ว ส่วนผสมถูกจัดขึ้นที่ 95˚C ใน 10 วินาทีและ 60˚C สำหรับ 30 วินาที ผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาถูกหลอมแล้ว โดยการเพิ่มอุณหภูมิจาก 60˚C เพื่อ 95˚C มีการเพิ่ม 0.11˚C / วินาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

HRM แบบ real-time PCR ทดสอบ
สำหรับการตรวจสอบความแตกต่าง LightCycler 480 ความละเอียดสูงหลอมชุดปริญญาโท (Roche วิทยาศาสตร์ประยุกต์ Mannheim, เยอรมนี) ถูกนำมาใช้ ผสมปฏิกิริยาที่มีอยู่ 1 × LightCycler 480 HRM โทผสมซึ่งประกอบด้วยสีย้อม HRM (Roche วิทยาศาสตร์ประยุกต์) 2.25 มิลลิ MgCl2 และแต่ละ 0.4 ไมครอน Schis_F และไพร Schis_R ปริมาณการเกิดปฏิกิริยารวม 20 ไมโครลิตร การขี่จักรยาน PCR เพื่อนำเสนอโค้ง HRM ได้ทำภายใต้เงื่อนไขดังต่อไปนี้: 1 ถือที่ 95C เป็นเวลา 10 นาที; 45 รอบของ 95C เป็นเวลา 10 วินาที, 55C เป็นเวลา 8 วินาทีและ 72C เป็นเวลา 15 วินาที; แล้วผสมถูกจัดขึ้นที่ 95C เป็นเวลา 10 วินาทีและ60˚C 30 วินาที ผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาถูกละลายแล้วโดยการเพิ่มอุณหภูมิ60˚Cเพื่อ 95C ที่มีการเพิ่มขึ้นของ0.11˚C / วินาที,

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การบริหารทรัพยากรมนุษย์แบบ PCR assay
ตรวจหาอนุพันธ์ , lightcycler 480 ความละเอียดสูงละลาย อาจารย์ Kit ( โรชวิทยาศาสตร์ประยุกต์ Mannheim , เยอรมนี ) คือใช้ ปฏิกิริยาผสมอยู่ 1 × lightcycler 480 หรืออาจารย์ผสมซึ่งประกอบด้วยวิธีย้อม ( วิทยาศาสตร์ประยุกต์ โรช ) , MgCl2 2.25 มิลลิเมตร และแต่ละμ 0.4 M schis_f schis_r และรองพื้น ปริมาตรปฏิกิริยาทั้งหมด 20 μ Lจักรยานซึ่งนำเสนอหรือโค้งได้ภายใต้เงื่อนไขต่อไปนี้ : 1 ค้างไว้ที่ 95 ˚ C 10 นาที ; 45 รอบ 95 ˚ C 10 วินาที , 55 ˚ C เป็นเวลา 8 วินาที กับ 72 ˚ C เป็นเวลา 15 วินาที แล้ว ส่วนผสมจะถูกจัดขึ้นที่ 95 ˚นาน 10 วินาทีและ 60 ˚เป็นเวลา 30 วินาที ผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาแล้วละลายโดยการเพิ่มอุณหภูมิจาก 60 ˚ C 95 ˚ C ด้วยการเพิ่ม 0.11 ˚ C / วินาที