The inoculum was prepared in saline

The inoculum was prepared in saline from 5 day old culture grown
on potato dextrose agar (Sigma Chemical Co., St. Louis, Mo) at 32 °C,
and then the inoculum, after vortexing to disperse Malassezia clumps,
was standardized by spectrophotometer at 530 nm and adjusted with
modified RPMI 1640 to a final inoculum size of 2.0–3.5×103 CFU/ml
(Velegraki et al., 2004).
The microdilution assay was performed in 96-well plates. Growth
and sterile controls were included for each tested strain. The
microplates were incubated at 32 °C for 48 h and then 1 µl aliquots
from each well with M. pachydermatis plus different drug concentrations, and the positive control, were subcultured on Petri dishes with
potato dextrose agar to determine the MFC and MIC. Subcultures were
incubated for 2–5 days at 32 °C until colonies were visible. The
colonies were then counted, comparing the number of colonies on
different drug concentrations with the number of colonies observed
on the positive control (Fig. 1). For azole derivatives and caspofungin,
the MIC was defined as the lowest antifungal concentration with
the lowest number of strains with colonies counting similar to the
drug-free control. The MFC endpoint for all tested drugs, and MIC
for amphothericin B, was defined as the lowest concentration that
completely inhibited fungal growth. The quality control strains
C. parapsilosis ATCC 22019 and C. krusei ATCC 6258 were included.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มีเตรียม inoculum ที่ในน้ำเกลือจากวัฒนธรรมเก่า 5 วันโตในมันฝรั่ง agar การขึ้น (ซิกเคมี Co., St. Louis, Mo) ที่ 32 ° Cแล้วการ inoculum หลัง vortexing กระจาย Malassezia กระจุกที่เป็นมาตรฐาน โดยเครื่องทดสอบกรดด่างที่ 530 nm และปรับปรุงด้วยแก้ไข RPMI 1640 ขนาด inoculum สุดท้าย 2.0 – 3.5 × 103 CFU/ml(Velegraki et al., 2004)ทดสอบ microdilution ที่ดำเนินการใน 96 ดีแผ่น เจริญเติบโตและควบคุมกระบอกรวมสำหรับแต่ละต้องใช้ทดสอบ ที่microplates ได้ incubated ที่ 32 ° C 48 h แล้ว 1 µl aliquotsจากบ่อ pachydermatis เมตร บวกความเข้มข้นของยาที่แตกต่างกัน และควบคุมค่าบวก มี subcultured บนอาหาร Petriagar ขึ้นมันฝรั่งเพื่อกำหนด MFC และไมค์ มี subculturesincubated 2-5 วันที่ 32 ° C จนกว่าอาณานิคมถูกมองเห็นได้ ที่อาณานิคมแล้วนับได้ การเปรียบเทียบจำนวนของอาณานิคมบนความเข้มข้นของยาที่แตกต่างกัน ด้วยหมายเลขของอาณานิคมที่สังเกตบนบวกการควบคุม (Fig. 1) สำหรับตราสารอนุพันธ์ azole caspofunginไมค์ถูกกำหนดเป็นความเข้มข้นต้านเชื้อราต่ำด้วยหมายเลขต่ำสุดของเงียอาณานิคมนับคล้ายกับการฟรียาควบคุม ปลายทาง MFC สำหรับยาเสพติดที่ผ่านการทดสอบทั้งหมด และไมค์amphothericin B ถูกกำหนดเป็นความเข้มข้นต่ำสุดที่ห้ามอย่างสมบูรณ์การเจริญเติบโตของเชื้อรา สายพันธุ์คุณภาพC. parapsilosis ATCC 22019 และ C. krusei ATCC 6258 รวมได้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

หัวเชื้อที่ได้รับการจัดทำขึ้นจากน้ำเกลือวันที่ 5
วัฒนธรรมเก่าที่ปลูกในอาหารเลี้ยงเชื้อเดกซ์โทรสมันฝรั่ง(ซิกม่า Chemical Co. , เซนต์หลุยส์, Mo) ที่ 32
องศาเซลเซียสและจากนั้นเชื้อหลังจากvortexing ที่จะแยกย้ายกันดง Malassezia,
ได้มาตรฐานโดย spectrophotometer ที่ 530
นาโนเมตรและปรับได้ด้วยการปรับเปลี่ยนRPMI 1640 ให้มีขนาดหัวเชื้อสุดท้ายของ 2.0-3.5 × 103 CFU / ml
(Velegraki et al., 2004).
การวิเคราะห์ microdilution ได้ดำเนินการในแผ่น 96 หลุม การเจริญเติบโตและการควบคุมผ่านการฆ่าเชื้อได้รวมสำหรับแต่ละสายพันธุ์ที่ผ่านการทดสอบ microplates ถูกบ่มที่ 32 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมงแล้ว 1 aliquots ไมโครลิตรจากกันได้ดีกับเอ็มpachydermatis บวกความเข้มข้นของยาเสพติดที่แตกต่างกันและควบคุมบวกถูกเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อเดกซ์โทรสมันฝรั่งเพื่อตรวจสอบเอ็มเอฟและ MIC วัฒนธรรมที่ถูกบ่มเป็นเวลา 2-5 วันที่ 32 ° C จนถึงอาณานิคมได้เห็น อาณานิคมนับจากนั้นเมื่อเปรียบเทียบกับจำนวนโคโลนีในความเข้มข้นของยาเสพติดที่แตกต่างกันที่มีจำนวนของอาณานิคมตั้งข้อสังเกตในการควบคุมบวก(รูปที่ 1). สำหรับสัญญาซื้อขายล่วงหน้าและ azole caspofungin, ค่า MIC ถูกกำหนดเป็นเชื้อราความเข้มข้นต่ำสุดที่มีจำนวนต่ำสุดของสายพันธุ์ที่มีอาณานิคมนับคล้ายกับการควบคุมยาเสพติดฟรี ปลายทาง MFC สำหรับยาเสพติดที่ผ่านการทดสอบทั้งหมดและ MIC สำหรับ amphothericin B ถูกกำหนดให้เป็นความเข้มข้นต่ำสุดที่สมบูรณ์สามารถยับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อรา สายพันธุ์ควบคุมคุณภาพซี parapsilosis ATCC 22019 และ C krusei ATCC 6258 ถูกรวม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เชื้อที่เตรียมไว้ในน้ำเกลือ 5 วันวัฒนธรรมเก่าโต
บนอาหารเลี้ยงเชื้อ potato dextrose agar ( Sigma Chemical Co . , St . Louis , MO ) ที่ 32 ° C ,
แล้วเชื้อ หลังจาก vortexing กระจายมาลาซีเซียกอ
เป็นมาตรฐานโดยวัสดุที่ , 530 nm และปรับด้วย RPMI 1640
ดัดแปลงเป็นโดยขนาดสุดท้ายของ 2.0 - 3.5 × 103 CFU / ml
( velegraki et al . , 2004 ) .
การ microdilution assay แสดงใน 96 ด้วยแผ่น การเจริญเติบโตและการควบคุมรวม
ปลอดเชื้อสำหรับแต่ละการทดสอบความเครียด
microplates อุณหภูมิ 32 องศา C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง และ 1 µผมเฉยๆ
จากแต่ละกับม. pachydermatis บวกปริมาณยาแตกต่างกันและการควบคุมในเชิงบวก มี subcultured บนจานเลี้ยงเชื้อกับ
Portals หา MFC และไมค์ .พัฒนาจนเป็น
บ่ม 2 – 5 วัน ที่ 32 ° C ถึงอาณานิคมได้ถูกมองเห็น
อาณานิคมแล้วนับเปรียบเทียบจำนวนโคโลนีบน
ความเข้มข้นยาแตกต่างกันกับจำนวนโคโลนีพบ
ในการควบคุมบวก ( รูปที่ 1 ) ตราสารอนุพันธ์และ azole caspofungin
ไมค์ถูกกำหนด , ค่าความเข้มข้นของยาด้วย
ค่าจำนวนของสายพันธุ์ที่มีอาณานิคมนับคล้ายกับ
ยาฟรีควบคุม ทั้งนี้ บริษัททั้งหมดทดสอบยา และไมค์
สำหรับแอมโฟเธอริซินบี ถูกกำหนดเป็นค่าความเข้มข้นที่
ยับยั้งเชื้อราได้ การควบคุมคุณภาพสายพันธุ์
C parapsilosis ATCC 22019 . 90 และ 6258 ถูกรวม