1. Introduction
Malonaldehyde (propandial, MA) has been extensively used as a marker of polyunsaturated fatty acids oxidation [1], [2] and [3]. Its determination is still based on spectrophotometric assays and, among these, the one that relies on UV-evaluation of the adduct formed between MA thiobarbituric acid (TBA) is very popular and frequently used for oxidative stress evaluation [4] and [5]. However, TBA test has been considered nonspecific for MA [6] and several procedures have been suggested in order to overcome interference problems [7]. Furthermore, the sample preparation requires harsh experimental conditions that may cause the formation of several artefacts that can severely intefere with MA determination [8]. Therefore, various methods have been introduced to produce MA derivative under mild conditions before its determination by GC or HPLC tecniques [9]. For instance, HPLC analysis of MA with the UV detection 2,4-dinitrophenylhydrazine (DNPH) can be used as an alternative to TBA. In a recent study on the specificity of MA determination in fish, it has been shown that DNPH is preferred to TBA “for a finer understanding of lipid peroxidation in fish” [10]. Compared to the TBA assay, the derivatization procedure with DNPH involves a more favourable treatment at room temperature, but still requires a strongly acidic treatment. Another reagent, 2,3-diaminonaphthalene (DAN), originally introduced for the quantitative determination of β-diketones [11], has been recently applied to MA determination in plasma or serum by HPLC with UV detection [12]. The reaction of DAN with MA affords a naphtodiazepine (MA-DAN) with a high UV response, very interesting in the view of free MA measurements in biological fluids. However, the reported experimental protocol requires a long derivatization time (180 min), low pH (pH 0.8) and no internal standard is described.
1. บทนำใช้ Malonaldehyde (propandial, MA) เป็นเครื่องหมายของการเกิดออกซิเดชันของกรดไขมันไม่อิ่มตัว [1], [2] และ [3] อย่างกว้างขวาง กำหนดนั้นยังคงยึด spectrophotometric assays และ ในหมู่เหล่านี้ อาศัย UV-ประเมินของ adduct ระหว่างกรด thiobarbituric MA (TBA) เป็นที่นิยมมาก และมักใช้การประเมินความเครียด oxidative [4] [5] อย่างไรก็ตาม TBA ทดสอบได้รับการพิจารณาเจาะจงสำหรับ MA [6] และมีการแนะนำขั้นตอนต่าง ๆ เพื่อเอาชนะปัญหาสัญญาณรบกวน [7] นอกจากนี้ เตรียมตัวอย่างต้องการเงื่อนไขทดลองรุนแรงที่อาจทำให้เกิดการก่อตัวของสิ่งต่าง ๆ ที่รุนแรงสามารถ intefere กับ MA กำหนด [8] ดังนั้น วิธีการต่าง ๆ มีการแนะนำผลิตอนุพันธ์ MA ภายใต้เงื่อนไขที่ไม่รุนแรงก่อนกำหนดของ โดย HPLC หรือ GC tecniques [9] ตัวอย่าง วิเคราะห์ HPLC ของ MA กับ UV ตรวจ 2, 4-dinitrophenylhydrazine (DNPH) สามารถใช้เป็นทางเลือกใน TBA ในการศึกษาล่าสุด specificity ของ MA กำหนดในปลา มันได้ถูกแสดงให้เห็นว่า DNPH ต้องการ TBA "สำหรับความเข้าใจปลีกย่อย peroxidation ของไขมันในปลา" [10] เปรียบเทียบการทดสอบ TBA กระบวนการ derivatization กับ DNPH เกี่ยวข้องกับการรักษาที่ดีมากที่อุณหภูมิห้อง แต่ยังคง ต้องรักษาอย่างยิ่งเปรี้ยว รีเอเจนต์อื่น 2,3-diaminonaphthalene (แดน), เดิม แนะนำสำหรับการกำหนดเชิงปริมาณของβ-diketones [11], ได้ถูกเพิ่งใช้ MA กำหนดในพลาสมาหรือซีรั่ม โดย HPLC กับ UV ตรวจ [12] ปฏิกิริยาของแดนกับ MA แล้ว naphtodiazepine (MA-แดน) กับแบบ UV ตอบสนองสูง น่าสนใจมากในมุมมองของการวัดระดับฟรี MA ในของเหลวทางชีวภาพ อย่างไรก็ตาม โพรโทคอลทดลองรายงานต้อง derivatization ยาวเวลา (180 นาที), ค่า pH ต่ำ (pH 0.8) และมาตรฐานภายในไม่ได้อธิบายไว้
การแปล กรุณารอสักครู่..
1 . บทนำ
มาโลนัลดีไฮด์ ( propandial , MA ) ได้รับอย่างกว้างขวางใช้เป็นเครื่องหมายของกรดไขมันไม่อิ่มตัวออกซิเจน [ 1 ] , [ 2 ] และ [ 3 ] ความมุ่งมั่นยังคงขึ้นอยู่กับ ) ) และในหมู่เหล่านี้ คนที่อาศัย ยูวี การประเมินผลของปุ่มตัวเลือกเกิดขึ้นระหว่างมาเท่ากับ acid ( TBA ) เป็นที่นิยมมากและใช้บ่อยสำหรับการประเมินความเครียดออกซิเดชัน [ 4 ] และ [ 5 ]แต่ TBA การทดสอบได้รับการพิจารณาเจาะจงมา [ 6 ] และได้รับการแนะนำขั้นตอนต่างๆ เพื่อเอาชนะปัญหาสัญญาณรบกวน [ 7 ] นอกจากนี้ การเตรียมตัวต้องแข็งกร้าว สภาวะการทดลองที่อาจก่อให้เกิดการก่อตัวของสิ่งประดิษฐ์ต่าง ๆ ที่รุนแรงสามารถขวางหรอกกับมากำหนด [ 8 ] ดังนั้นวิธีการต่าง ๆ ได้มีการเปิดตัวผลิตมาดัดแปลงภายใต้ภาวะที่ไม่รุนแรงก่อนที่ความมุ่งมั่นโดย GC และ HPLC tecniques [ 9 ] ตัวอย่างเช่นการวิเคราะห์ด้วย HPLC UV มาตรวจหา 2,4-dinitrophenylhydrazine ( dnph ) สามารถใช้เป็นทางเลือกในการรักษา . ในการศึกษาล่าสุดที่เฉพาะเจาะจงมากำหนดในปลามันได้ถูกแสดงว่า dnph ต้องการ TBA " เพื่อความเข้าใจอย่างละเอียดของการเกิด lipid peroxidation ในปลา " [ 10 ] เมื่อเทียบกับ TBA ) , ซัล dnph เกี่ยวข้องกับขั้นตอนการรักษาดีขึ้นในอุณหภูมิห้อง แต่ยังต้องการการรักษาที่เป็นกรดรุนแรง สารเคมีอื่น 2,3-diaminonaphthalene ( แดน )แต่เดิมแนะนำสำหรับการหาปริมาณบีตา - diketones [ 11 ] ได้ถูกใช้เมื่อเร็ว ๆ นี้ เพื่อมากำหนดในพลาสมา หรือเซรั่ม โดยวิธี HPLC ตรวจจับยูวีด้วย [ 12 ] ปฏิกิริยาของแดนกับมา affords naphtodiazepine ( ma-dan ) กับการตอบสนอง UV สูง , ที่น่าสนใจมากในมุมมองของฟรีมาวัดในของเหลวชีวภาพ อย่างไรก็ตามรายงานขั้นตอนการทดลอง ต้องใช้เวลานานกับ ( 180 นาที ) , pH ต่ำ ( pH 0.8 ) และภายในไม่มีมาตรฐานอธิบาย
การแปล กรุณารอสักครู่..