Measurement of intracellular ROSOxi

Measurement of intracellular ROS
Oxidation-sensitive dye, DCFDA was employed to measure
the intracellular ROS activity induced by hydrogen peroxide
in human neural cell line (Wang and Joseph, 1999). On entering
the cell, DCFDA is hydrolyzed by cellular esterase enzyme
to a non-fluorescent dichloro-dihydro-fluorescein (DCFH)
which is oxidized to highly fluorescent dichlorofluorescein
(DCF) by the intracellular ROS. The amount of fluorescence
is equal to the amount of intracellular ROS generated inside
the cells (Lebel et al., 1992). Human neural cells were plated
at a density of 1 · 106 cells/well in 12-well plate; after 24 h, cells
were treated with different concentrations of H. rhamnoides
extract and exposed to 250 lM of H2O2 for 6 h. At the end
of treatment 10 lM DCFDA was added to the cells and incubated
for 30 min. The fluorescence was detected in flowcytometer
at an excitation wavelength of 485 nm and an
emission wavelength of 535 nm.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัดเซลล์ ROS
ย้อมออกซิเดชันที่สำคัญ DCFDA
ถูกจ้างมาเพื่อวัดกิจกรรมภายในเซลล์ROS
เหนี่ยวนำโดยไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ในเซลล์ประสาทของมนุษย์(วังและโจเซฟ, 1999) ในการป้อนเซลล์ DCFDA ถูกย่อยสลายโดยเอนไซม์ esterase โทรศัพท์มือถือที่ไม่ใช่ไดคลอโรฟลูออ-dihydro-fluorescein (DCFH) ซึ่งถูกออกซิไดซ์ที่จะ dichlorofluorescein เรืองแสงสูง(DCF) โดยเซลล์ ROS จำนวนเงินของการเรืองแสงมีค่าเท่ากับปริมาณของเซลล์ ROS สร้างขึ้นภายในเซลล์(Lebel et al., 1992) เซลล์ประสาทของมนุษย์ถูกชุบที่มีความหนาแน่นของ 1 · 106 เซลล์ / ดีในแผ่น 12 ดี; หลังจาก 24 ชั่วโมงเซลล์ได้รับการรักษาที่มีความเข้มข้นแตกต่างกันของเอชrhamnoides สารสกัดและสัมผัสกับ LM 250 ของ H2O2 เวลา 6 ชั่วโมง ในตอนท้ายของการรักษา 10 LM DCFDA ถูกบันทึกอยู่ในเซลล์และบ่มเป็นเวลา30 นาที เรืองแสงถูกตรวจพบใน flowcytometer ที่ความยาวคลื่นกระตุ้น 485 นาโนเมตรและความยาวคลื่นปล่อย535 นาโนเมตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การวัดผลตอบแทนการย้อมเซลล์ไว
,
dcfda ใช้เพื่อวัดกิจกรรมของผลตอบแทนภายในเซลล์ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ในเซลล์ประสาท
มนุษย์ ( วังและโจเซฟ , 1999 ) ป้อน
เซลล์เป็นเซลล์ย่อยโดยเอนไซม์ esterase dcfda
จะไม่เรืองแสง dihydro dichloro ี่ ( dcfh )
ซึ่งจากสูง dichlorofluorescein
เรืองแสง( 2 ) โดย รอส เซลล์ จํานวนเรืองแสง
เท่ากับปริมาณเซลล์ของผลตอบแทนที่สร้างขึ้นภายในเซลล์ (
( et al . , 1992 ) เซลล์ประสาท ของชุบ
ที่ความหนาแน่น 1 ด้วย 106 เซลล์ / ดีดีแผ่น ; หลังจาก 24 ชั่วโมง , เซลล์
รักษาด้วยระดับความเข้มข้นของ H rhamnoides
สกัดและสัมผัสของ H2O2 250 LM สำหรับ 6 ชั่วโมง ในที่สุด
การรักษาโดย dcfda 10 ถูกเพิ่มลงในเซลล์และบ่ม
30 นาทีเรืองแสงที่ตรวจพบในโฟลไซโตมิเตอร์
ที่ความยาวคลื่นกระตุ้น 485 nm และ
ปล่อยความยาวคลื่น 535 นาโนเมตร