Determining in vitro proliferation

Determining in vitro proliferation ability
Shoot tips were prepared by trimming corm and outer leaf
sheaths from the suckers. These shoot tips were
collected in a beaker containing tap water, then brought
to the laboratory and washed thoroughly with tap water,
then washed with detergent mixed with Tween 80
(Sigma) and finally with distilled water for three times.
They were then made into 6 explants and put in a sterile
conical flask. These shoot tips were treated with 0.1%
HgCl2 solution for different periods (6, 8, 10 and 12 min)
to determine time period for contamination free culture.
They were then washed with sterile distilled water for 12
min. Treatment of shoot tips with 0.1% HgCl2 for 10 min
was found suitable for sterilization and finally washed
thoroughly with sterile distilled water under aseptic
conditions in a laminar air flow cabinet. All explants were
placed on autoclaved Murashige and Skoog (MS
medium, 1962) medium with different concentrations of
cytokinins (1, 2, 3, 4 and 5mg/l) and auxins (0.5, 1 and
2mg/l). The pH of medium was adjusted to 5.8 prior to
autoclaving.
The culture jars containing explants were incubated in
a temperature controlled growth chamber. 15 jar,
replication based on explants were incubated at 26±2°C
with 16 hr photoperiod (approximately 2000 lux) provided
by cool white fluorescent tubes. The materials were subcultured
at a regular interval of four weeks into same
medium to produce multiple shoots.
The regenerated plantlets after developing sufficient
root system were deemed ready to transfer in soil. The
plantlets were carefully removed from the culture vessels.
The roots of the plantlets were gently washed under
running tap water to remove agar attached to the roots.
Immediately after washing they were transferred to small
polythene bags containing a mixture of normal soil, sand
and compost in 1:1:1 ratio. The plantlets with pots were
covered with polythene bags to check sudden
desiccation. The inner sides of this bag were sprayed
with water at every 24 hr to maintain high humidity
around the plantlets. The polythene bags were gradually
perforated to expose the plantlets to the outer normal
environment and subsequently removed after seven
days. They were finally transferred into the field.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กำหนดความสามารถในการงอกเคล็ดลับการยิงถูกเตรียมด้วย corm ตัดแต่งใบนอกsheaths จาก suckers ที่ เหล่านี้ยิงเคล็ดลับได้ในแบบบีกเกอร์ที่มีน้ำประปา แล้ว นำการปฏิบัติการ และต้องล้าง ด้วยน้ำประปาแล้ว ล้าง ด้วยผงซักฟอกผสมกับ Tween 80(ซิกมา) และสุดท้าย กับกลั่นน้ำสามครั้งพวกเขาได้ทำใน 6 explants แล้วใส่ในการฆ่าเชื้อทรงกรวยหนาว ยิงเหล่านี้ได้รับคำแนะนำ 0.1%โซลูชั่น HgCl2 สำหรับรอบระยะเวลาต่าง ๆ (ต่ำสุด 6, 8, 10 และ 12)เพื่อกำหนดรอบระยะเวลาสำหรับการปนเปื้อนฟรีวัฒนธรรมพวกเขาได้แล้วล้าง ด้วยน้ำกลั่นฆ่าเชื้อสำหรับ 12นาทีรักษาเคล็ดลับยิงด้วย 0.1% HgCl2 ใน 10 นาทีพบเหมาะสำหรับฆ่าเชื้อ และในที่สุดหินสะอาด ด้วยน้ำกลั่นฆ่าเชื้อภายใต้เข้มข้นเงื่อนไขในตู้กระแสอากาศ laminar Explants ทั้งหมดได้วางบน autoclaved Murashige และ Skoog (MSปานกลาง 1962) ขนาดกลาง มีความเข้มข้นต่าง ๆ ของcytokinins (1, 2, 3, 4 และ 5mg/l) และ auxins (0.5, 1 และ2 mg/l) ปรับ pH ของตัวกลาง 5.8 ก่อนautoclavingขวดวัฒนธรรมประกอบด้วย explants ถูก incubated ในควบคุมอุณหภูมิการเจริญเติบโตของหอการค้า กระปุก 15จำลองตาม explants ถูก incubated ที่ 26±2 ° Cมีช่วงแสง 16 ชั่วโมง (ประมาณ 2000 lux) ให้โดยหลอดสีขาวเรืองแสงเย็น วัสดุถูก subculturedในช่วงเวลาปกติของสัปดาห์ที่ 4 เป็นเหมือนกันสื่อกลางในการผลิตหลายหน่อPlantlets regenerated หลังจากพัฒนาเพียงพอระบบรากมีความพร้อมที่จะโอนย้ายในดิน ที่plantlets อย่างระมัดระวังได้ถูกเอาออกจากเรือวัฒนธรรมรากของ plantlets ถูกล้างเบา ๆ ภายใต้ใช้น้ำประปาเอา agar กับรากทันทีหลังจากการซักผ้า จะถูกโอนย้ายไปเล็กประกอบด้วยส่วนผสมของดินปกติ ทรายถุง polytheneและปุ๋ยใน 1: อัตราส่วน 1:1 Plantlets กับหม้อได้ปกคลุม ด้วยถุง polythene ตรวจสอบทันทีdesiccation ด้านในของกระเป๋านี้ถูกฉีดพ่นน้ำที่ทุก 24 ชั่วโมงเพื่อรักษาความชื้นสูงรอบ plantlets ถุง polythene ได้ค่อย ๆperforated ประจาน plantlets ปกติภายนอกสภาพแวดล้อม และต่อมาออกหลังเจ็ดวันนั้น ในที่สุดจะถูกโอนย้ายในฟิลด์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การกำหนดความสามารถในการแพร่กระจายในหลอดทดลองเคล็ดลับการถ่ายภาพที่ถูกจัดทำขึ้นโดยการตัดแต่งหัวและใบนอกฝักจากดูด เคล็ดลับเหล่านี้ถ่ายที่ถูกเก็บไว้ในบีกเกอร์ที่มีน้ำประปาแล้วนำไปยังห้องปฏิบัติการและล้างให้สะอาดด้วยน้ำประปาล้างแล้วด้วยผงซักฟอกผสมกับTween 80 (ซิกม่า) และสุดท้ายกับน้ำกลั่นสำหรับสามครั้ง. พวกเขาทำแล้วเป็น 6 ชิ้นส่วนและใส่ในการฆ่าเชื้อขวดรูปกรวย เคล็ดลับเหล่านี้ยิงได้รับการรักษาด้วย 0.1% วิธีการแก้ปัญหา HgCl2 สำหรับระยะเวลาที่แตกต่างกัน (6, 8, 10 และ 12 นาที) ในการกำหนดระยะเวลาการปนเปื้อนวัฒนธรรมฟรี. พวกเขาถูกล้างด้วยน้ำกลั่นปลอดเชื้อเป็นเวลา 12 นาที การรักษาของเคล็ดลับการถ่ายภาพกับ 0.1% HgCl2 เป็นเวลา 10 นาทีก็พบว่าเหมาะสำหรับการฆ่าเชื้อและล้างที่สุดให้สะอาดด้วยน้ำกลั่นปลอดเชื้อผ่านการฆ่าเชื้อภายใต้เงื่อนไขในตู้ไหลของอากาศราบเรียบ ชิ้นส่วนทั้งหมดถูกวางอยู่บนเบา Murashige และ Skoog (MS กลาง 1962) ขนาดกลางที่มีความเข้มข้นแตกต่างกันของไซโตไค(1, 2, 3, 4 และ 5 มิลลิกรัม / ลิตร) และ auxins (0.5, 1 และ2mg / ลิตร) ค่า pH ของกลางที่ได้รับการปรับให้ 5.8 ก่อนที่จะนึ่งฆ่าเชื้อ. ขวดวัฒนธรรมที่มีชิ้นถูกบ่มในอุณหภูมิห้องควบคุมการเจริญเติบโต 15 ขวด, การจำลองแบบขึ้นอยู่กับชิ้นถูกบ่มที่อุณหภูมิ 26 ± 2 องศาเซลเซียสกับ16 ชั่วโมงต่อช่วงแสง (ประมาณ 2,000 ลักซ์) ให้โดยหลอดเรืองแสงสีขาวนวล วัสดุที่ถูกเลี้ยงในช่วงเวลาปกติของสี่สัปดาห์ในเดียวกันสื่อในการผลิตหลายหน่อ. ต้นกล้าสร้างใหม่หลังจากการพัฒนาเพียงพอระบบรากถือว่าพร้อมที่จะโอนในดิน ต้นถูกลบออกอย่างระมัดระวังจากเรือวัฒนธรรม. รากของต้นกล้าที่ถูกล้างเบา ๆ ภายใต้การใช้น้ำประปาที่จะเอาอาหารเลี้ยงเชื้อที่ติดอยู่กับราก. ทันทีหลังจากล้างพวกเขาถูกย้ายไปขนาดเล็กถุงพลาสติกที่มีส่วนผสมของดินปกติทรายและปุ๋ยหมัก1: อัตราส่วน 1: 1 ต้นกล้าที่มีหม้อที่ถูกปกคลุมไปด้วยถุงพลาสติกที่จะตรวจสอบอย่างฉับพลันผึ่งให้แห้ง ด้านข้างด้านในของกระเป๋าใบนี้ได้รับการฉีดพ่นด้วยน้ำทุก 24 ชั่วโมงเพื่อรักษาความชื้นสูงรอบต้นอ่อน ถุงพลาสติกค่อยพรุนจะเปิดเผยต้นไปยังด้านนอกตามปกติสภาพแวดล้อมและลบออกในภายหลังหลังจากเจ็ดวัน พวกเขาจะถูกโอนไปในที่สุดเข้าไปในสนาม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การกำหนดความสามารถในการงอก
ยิงเคล็ดลับเตรียม ตัด หัว และภายนอกหุ้มใบ
จากหน่อ เคล็ดลับเหล่านี้ยิงถูก
รวบรวมในบีกเกอร์ที่มีน้ำ แล้วเอา
เพื่อปฏิบัติการและล้างให้สะอาดด้วยน้ำก๊อก
จากนั้นล้างด้วยผงซักฟอกผสมกับ Tween 80
( Sigma ) และสุดท้ายกับน้ำกลั่น 3 ครั้ง
พวกเขาจึงเป็น 6 อาหารและใส่ในขวดรูปกรวยเป็นหมัน
. ยิงเคล็ดลับเหล่านี้ได้รับการรักษาด้วยวิธีการต่าง ๆ hgcl2 0.1 %
งวด ( 6 , 8 , 10 และ 12 นาที )
กำหนดระยะเวลาการปนเปื้อนวัฒนธรรมฟรี .
จากนั้นล้างด้วยน้ำกลั่นฆ่าเชื้อ 12
นาที การยิงเคล็ดลับกับ 0.1% hgcl2 10 นาที
พบเหมาะสำหรับฆ่าเชื้อ และสุดท้ายล้าง
ให้สะอาดด้วยน้ำภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ .
ในการไหลของอากาศเครื่อง อาหารถูก
วางไว้บนอาหารสูตร Murashige และ Skoog ( MS สังเคราะห์
( 2505 ) ขนาดกลางที่มีความเข้มข้นต่างกัน
ไซโตไคนิน ( 1 , 2 , 3 , 4 และ 5 mg / L ) และออกซิน ( 0.5 , 1 และ Nicotinell
/ L ) ความเป็นกรดของอาหารปรับฐานก่อน

ขวดที่มีอัตราส่วนโฟกัส . วัฒนธรรมอาหารถูกบ่มใน
ห้องควบคุมอุณหภูมิการเจริญเติบโต 15 ขวด
ซ้ำตาม เลี้ยงอุณหภูมิ 26 องศา C
2 ±ที่มีแสง 16 ชั่วโมง ( ประมาณ 2 , 000 ลักซ์ ) ให้
โดยเย็นหลอดเรืองแสงสีขาว วัสดุที่ subcultured
ที่ปกติช่วงสี่สัปดาห์ในเดียวกัน
ขนาดกลางผลิตยอด ได้ต้นหลังจากการพัฒนาเพียงพอ

ระบบรากถือว่าพร้อมโอน ในดิน
ต้นเป็นลบออกอย่างระมัดระวังจากวัฒนธรรมเรือ .
รากของต้นเป็นค่อยๆ ล้างภายใต้น้ำ
วิ่งเอาวุ้นที่ติดมากับราก .
ทันทีหลังการล้างพวกเขาย้ายไปขนาดเล็ก
Polythene ถุงผสมของดิน ปกติทราย
และปุ๋ยหมักในอัตราส่วน 1 : 1 : 1 . เดือนกับหม้อถูก