Identification of yeast isolates. S

Identification of yeast isolates. Selected yeast isolates
were identified by analyzing their 26S rDNA nucleotide
sequences [10]. Yeast isolates were cultured in YPD broth
at 30o
C for 48 hr and harvested by centrifugation. The
genomic DNA was extracted using a Genomic DNA Purification
kit (Promega, Madison, WI, USA), according to
the manufacturer’s instructions, and a 560 bp DNA fragment
of the 26S rDNA gene was amplified by the PCR using
primer-NL1 (5'-GCATATCAATAAGCGGAGGAAAAG-
3') and NL4 (5'-GGTCCGTGTTTCAAGACGG-3') as
follows: initial denaturation at 94o
C for 3 min and 36
cycles of denaturation at 94o
C for 1 min, annealing at
58o
C for 1 min, extension at 72o
C for 1.5 min, with a final
extension at 72o
C for 5 min. Nucleotide sequences of the
resulting PCR products were determined (Solgent Co.,
Daejeon, Korea) using NL1 and NL4 as the primers, and
homologous sequences were searched for in the sequences
of the National Center for Biotechnology Information
(NCBI) database using BLAST

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การระบุของยีสต์ที่แยกได้ เลือกยีสต์ที่แยกได้โดยการวิเคราะห์ของนิวคลีโอไทด์ rDNA 26Sลำดับ [10] แยกยีสต์ถูกล้างในซุป YPDที่ 30oC เป็นเวลา 48 ชั่วโมง และเก็บเกี่ยว โดยการหมุนเหวี่ยง การออกดีเอ็นเอถูกสกัดโดยใช้การทำให้บริสุทธิ์ดีเอ็นเอออกชุด (Promega เมดิสัน อิน สหรัฐอเมริกา), ตามคำแนะนำของผู้ผลิต และดีเอ็นเอแบบบีพี 560 fragmentของ 26S rDNA ยีนถูกขยาย โดยการ PCR โดยใช้รองพื้น-NL1 (5' - GCATATCAATAAGCGGAGGAAAAG-3') และ NL4 (5'-GGTCCGTGTTTCAAGACGG-3') เป็นดังต่อไปนี้: เริ่มต้นแปรสภาพที่ 94oC เป็นเวลา 3 นาทีและ 36รอบของการแปรสภาพที่ 94oC เป็นเวลา 1 นาที หลอมที่58oC 1 นาที นามสกุลที่ 72oC 1.5 นาที กับเป็นครั้งสุดท้ายนามสกุลที่ 72oC ในลำดับนิวคลีโอไทด์ 5 นาทีของการกำหนดผลิตภัณฑ์ PCR ผล (น้ำยา Co.แทจอน เกาหลี) ใช้ NL1 และ NL4 เป็นไพรเมอร์ และเซทจะมีลำดับถูกค้นหาในลำดับที่ของศูนย์แห่งชาติสำหรับข้อมูลเทคโนโลยีชีวภาพฐานข้อมูล (NCBI) ใช้ระเบิด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บัตรประจำตัวของเชื้อยีสต์ เลือกสายพันธุ์ยีสต์
ที่ถูกระบุโดยการวิเคราะห์ 26S rDNA เบื่อหน่ายของพวกเขา
ลำดับ [10] สายพันธุ์ยีสต์มาเพาะเลี้ยงในน้ำซุป YPD
ที่ 30o
เซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมงและเก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยง
ดีเอ็นเอถูกสกัดโดยใช้ DNA ของยีนฟอก
Kit (Promega, Madison, WI, USA) ตาม
คำแนะนำของผู้ผลิตและ 560 bp ดีเอ็นเอชิ้นส่วน
ของยีน 26S rDNA ถูกขยายโดยวิธี PCR โดยใช้
ไพรเมอร์-NL1 (5 ' -GCATATCAATAAGCGGAGGAAAAG-
3) และ NL4 (5'-GGTCCGTGTTTCAAGACGG-3 ') เป็น
ดังนี้ denaturation เริ่มต้นที่ 94o
C เป็นเวลา 3 นาทีและ 36
รอบของการสูญเสียสภาพธรรมชาติที่ 94o
เซลเซียสเป็นเวลา 1 นาที, การอบที่
58o
เซลเซียสเป็นเวลา 1 นาทีส่วนขยายที่ 72o
C เป็นเวลา 1.5 นาทีสุดท้ายที่มี
ส่วนขยายที่ 72o
C เป็นเวลา 5 นาที ลำดับเบสของ
ส่งผลให้ผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ได้รับการพิจารณา (Solgent Co. ,
Daejeon เกาหลี) โดยใช้ NL1 และ NL4 เป็นไพรเมอร์และ
ลำดับที่คล้ายคลึงกันถูกค้นหาในลำดับ
แห่งชาติศูนย์เทคโนโลยีชีวภาพสำหรับข้อมูล
(NCBI) ฐานข้อมูลโดยใช้ระเบิด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การจำแนกชนิดของยีสต์เชื้อ การคัดเลือกยีสต์ไอโซเลทถูกระบุโดยการวิเคราะห์ลำดับเบสของ 26 rDNAลำดับ [ 10 ] ยีสต์ไอโซเลทที่เพาะเลี้ยงใน broth ypdที่ 30oC เป็นเวลา 48 ชั่วโมง และเก็บเกี่ยวโดยการปั่นเหวี่ยง ที่จีโนมดีเอ็นเอโดยใช้การแยกดีเอ็นเอบริสุทธิ์ชุด ( promega เมดิสัน , WI , USA ) , ตามคําแนะนําของผู้ผลิต และ 560 คู่เบสดีเอ็นเอของ 26 rDNA ยีนโดยวิธี PCR โดยใช้ไพรprimer-nl1 ( 5 " - gcatatcaataagcggaggaaaag -3 ) และ nl4 ( 5 " - ggtccgtgtttcaagacgg-3 " ) เป็นเริ่มต้น ( ที่ 94o ดังนี้C เป็นเวลา 3 นาทีและ 36( ที่ 94o รอบC เป็นเวลา 1 นาที อบที่58oC เป็นเวลา 1 นาที , ส่วนขยายที่ 72oเป็นเวลา 1.5 นาที กับสุดท้าย72o ส่วนขยายที่C เป็นเวลา 5 นาที ลำดับนิวคลีโอไทด์ของเกิดผลิตภัณฑ์ PCR พบว่า ( solgent Co . ,แดจวน , เกาหลี ) และใช้ nl1 nl4 เป็นไพรเมอร์ และโฮโมโลกัส ลำดับถูกค้นหาในลำดับของศูนย์ข้อมูลเทคโนโลยีชีวภาพแห่งชาติ( ncbi ) ฐานข้อมูลการใช้ระเบิด