It is too dangerous to attempt to determine the motility of pathogenic microorganisms (such as the typhoid bacillus) by slide techniques. A much safer method is to culture the organisms in a special medium that can demonstrate the presence of motility. The medium mainly used for this purpose is SIM medium ( Sulphide Indole Motility medium) which is a combination differential medium that tests three different parameters, Sulfur Reduction, Indole Production and Motility. This media has a very soft consistency that allows motile bacteria to migrate readily through them causing cloudiness. The non-motile bacteria will only grow in the soft agar tube and only the area where they are inoculated. But in the case of motile bacteria, they will grow along the area of stab and will also swim out away from the stabbed area. Thus, a negative result is detected by growth in a distinct zone directly along the stab. A positive result is indicated by diffuse or cloudy growth mostly at the top and bottom of the stab.
SIM agar may also be used to detect the presence of H2S production. The SIM medium contains peptones and sodium thiosulfate as substrates, and ferrous ammonium sulfate, Fe(NH4)SO4, as the H2S indicator. Cysteine is a component of the peptones used in SIM medium. Sufficient agar is present to make the medium semisolid. Once H2S is produced, it combines with the ferrous ammonium sulfate, forming an insoluble, black ferrous sulfide precipitate that can be seen along the line of the stab inoculation. If the organism is also motile, the entire tube may turn black. This black line or tube indicates a positive H2S reaction; absence of a black precipitate indicates a negative reaction.
If desired, one can also test for indole production by adding 5 drops of Kovacs' reagent to the SIM cultures. Some bacteria have the ability to produce the enzyme tryptophanase, which will hydrolyzes the tryptophan in the media. The end products of this hydrolyzation reaction are indole, pyruvic acid, and ammonia, by means of deamination. The Kovac's reagent that is added to the SIM medium to test for indole is a mixture of hydrochloric acid, p-dimethylaminobenzaldehyde (DMABA), and n-amyl alcohol. DMABA further reacts with indole to produce a red quinoidal compound. If the reagent turns to red color, the indole test is positive. The sulfur and motility test results should be determined before we perform the indole test.
มันเป็นสิ่งที่อันตรายเกินไปเพื่อพยายามกำหนดเคลื่อนไหวของจุลินทรีย์ก่อโรค (เช่นเชื้อโรคไทฟอยด์) โดยเทคนิคภาพนิ่ง วิธีปลอดภัยมากวัฒนธรรมชีวิตในสื่อพิเศษที่สามารถแสดงให้เห็นถึงการปรากฏตัวของการเคลื่อนไหวได้ สื่อส่วนใหญ่ใช้สำหรับวัตถุประสงค์นี้เป็น SIM ปานกลาง (เคลื่อนไหวอินโดลซัลไฟด์ปานกลาง) ซึ่งเป็นสื่อต่างชุดที่ทดสอบสามพารามิเตอร์ที่แตกต่าง การ ลดซัลเฟอร์ ผลิตอินโดล และการเคลื่อนไหว สื่อนี้มีความสอดคล้องที่นุ่มมากที่ช่วยให้แบคทีเรีย motile จะย้ายได้อย่างง่ายดายผ่านเหล่านั้นก่อให้เกิดเมฆ แบคทีเรีย-motile จะเติบโตในหลอดวุ้นนุ่มและเฉพาะพื้นที่ที่ inoculated แต่ในกรณีของแบคทีเรีย motile พวกเขาจะเติบโตไปตามพื้นที่ของแทง และยังจะว่ายน้ำออกจากพื้นที่ stabbed ดังนั้น ผลลบถูกตรวจพบ โดยเติบโตในโซนแตกโดยตรงตามแนวการแทง ผลบวกจะถูกแสดง ด้วยเติบโตกระจาย หรือมีเมฆเป็นส่วนใหญ่ด้านบนและด้านล่างของการแทง SIM agar may also be used to detect the presence of H2S production. The SIM medium contains peptones and sodium thiosulfate as substrates, and ferrous ammonium sulfate, Fe(NH4)SO4, as the H2S indicator. Cysteine is a component of the peptones used in SIM medium. Sufficient agar is present to make the medium semisolid. Once H2S is produced, it combines with the ferrous ammonium sulfate, forming an insoluble, black ferrous sulfide precipitate that can be seen along the line of the stab inoculation. If the organism is also motile, the entire tube may turn black. This black line or tube indicates a positive H2S reaction; absence of a black precipitate indicates a negative reaction. If desired, one can also test for indole production by adding 5 drops of Kovacs' reagent to the SIM cultures. Some bacteria have the ability to produce the enzyme tryptophanase, which will hydrolyzes the tryptophan in the media. The end products of this hydrolyzation reaction are indole, pyruvic acid, and ammonia, by means of deamination. The Kovac's reagent that is added to the SIM medium to test for indole is a mixture of hydrochloric acid, p-dimethylaminobenzaldehyde (DMABA), and n-amyl alcohol. DMABA further reacts with indole to produce a red quinoidal compound. If the reagent turns to red color, the indole test is positive. The sulfur and motility test results should be determined before we perform the indole test.
การแปล กรุณารอสักครู่..
