Protein concentration was determined at 595 nm using a Dcprotein assay kit purchased from Bio-Rad Laboratories (Hercules,CA, USA) based on the method of Bradford [21]. The total pro-tein concentration of the enzyme solution was estimated from acalibration curve that was constructed using bovine serum albu-min (BSA). Analytical SDS-PAGE was performed using 10% (w/v)acrylamide in gels as described by Laemmli [22]. The protein bandswere visualized with Coomassie Brilliant Blue R-250 (Bio-Rad Lab-oratories, Inc., Hercules, CA, USA) staining. Casein zymographystaining was performed as described elsewhere [6]. The molecu-lar mass of the purified protease was analyzed in the linear modeby MALDI-TOF/MS using a Voyager DE-RP instrument (AppliedBiosystems/PerSeptive Biosystems, Inc., Framingham, MA, USA).Data was collected with a Tektronix TDS 520 numeric oscillographand analyzed using the GRAMS/386 software (Galactic IndustriesCorporation, Salem, NH, USA).
ความเข้มข้นของโปรตีนที่ถูกกำหนดที่ 595 นาโนเมตรโดยใช้ชุดทดสอบ Dcprotein ซื้อจาก Bio-Rad Laboratories (Hercules, CA, USA) ตามวิธีการของแบรดฟอม [21] ความเข้มข้นของ Pro-Tein รวมของการแก้ปัญหาการทำงานของเอนไซม์ที่ถูกประเมินจากโค้ง acalibration ที่ถูกสร้างขึ้นโดยใช้วัวซีรั่ม Albu นาที (BSA) การวิเคราะห์ระบบ SDS-PAGE ถูกดำเนินการโดยใช้ 10% (w / v) ริลาไมด์ในเจลตามที่อธิบาย Laemmli [22] bandswere โปรตีนมองเห็นด้วย Coomassie สีฟ้าสดใส R-250 (Bio-Rad แล็บภาวนา, Inc Hercules, CA, USA) การย้อมสี เคซีน zymographystaining ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ในที่อื่น ๆ [6] มวล molecu-LAR ของน้ำย่อยบริสุทธิ์ได้รับการวิเคราะห์ในเชิงเส้น modeby MALDI-TOF / MS โดยใช้เครื่องมือ Voyager DE-RP (AppliedBiosystems / PerSeptive ไบโอซิสเต็มส์อิงค์ Framingham, MA, USA) .Data ถูกเก็บรวบรวมด้วย TDS Tektronix 520 oscillographand วิเคราะห์โดยใช้ตัวเลขกรัม / 386 ซอฟแวร์ (Galactic IndustriesCorporation ซาเลม, NH, สหรัฐอเมริกา)
การแปล กรุณารอสักครู่..

ความเข้มข้นของโปรตีนถูกกำหนดที่ 595 nm ใช้ dcprotein ) ชุดซื้อจากห้องปฏิบัติการราดไบโอ ( Hercules , CA , USA ) ตามวิธีของ Bradford [ 21 ] รวมโปรเทอิ้น ความเข้มข้นของสารละลายเอนไซม์จะคำนวณจาก acalibration โค้งที่สร้างขึ้นโดยใช้วัว เซรั่ม ลบูมิน ( BSA ) การศึกษาวิเคราะห์การใช้ 10% ( w / v ) อะคริลาไมด์ในเจลตามที่อธิบายไว้โดย laemmli [ 22 ] โปรตีน bandswere visualized กับเหล่านี้น่าจะเป็น r-250 สีฟ้าสดใส ( ไบโอแลปราด oratories , อิงค์ , Hercules , CA , USA ) staining เคซีน zymographystaining ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ในที่อื่น [ 6 ] การ molecu lar มวลของโปรตีนบริสุทธิ์ถูกวิเคราะห์ในแบบเชิงเส้น modeby maldi-tof / MS โดยใช้เครื่องมือทาง de-rp ( appliedbiosystems / perseptive BIOSYSTEMS ( Framingham , MA , USA ) เก็บข้อมูลกับ Tektronix TDS 520 ตัวเลข oscillographand โดยใช้กรัม / 386 ซอฟต์แวร์ ( Galactic industriescorporation , Salem , NH , USA ) .
การแปล กรุณารอสักครู่..
