The accurate analysis of genetic va

The accurate analysis of genetic variation has major implications in many areas of biomedical research, including the identification of
infectious agents (such as parasites), the diagnosis of infections, and the detection of unknown or known disease-causing mutations.
Mutation scanning methods, including PCR-coupled single-strand conformation polymorphism (SSCP), have significant advantages
over many other nucleic acid techniques for the accurate analysis of allelic and mutational sequence variation. The present protocol
describes the SSCP method of analysis, including all steps from the small-scale isolation of genomic DNA and PCR amplification of
target sequences, through to the gel-based separation of amplicons and scanning for mutations by SSCP (either by the analysis of
radiolabeled amplicons in mutation detection enhancement (MDE) gels or by non-isotopic SSCP using precast GMA gels). The
subsequent sequence analysis of polymorphic bands isolated from gels is also detailed. The SSCP protocol can readily detect point
mutations for amplicon sizes of up to 450–500 bp, and usually takes 1–2 days to carry out. This user-friendly, low-cost, potentially
high-throughput platform has demonstrated the utility to study a wide range of pathogens and diseases, and has the potential to be
applied to any gene of any organism.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การวิเคราะห์ที่ถูกต้องของการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมมีผลกระทบที่สำคัญในหลายพื้นที่ของการวิจัยทางการแพทย์รวมทั้งบัตรประจำตัวของการติดเชื้อ (เช่นปรสิต) วินิจฉัยการติดเชื้อและการตรวจสอบของที่ไม่รู้จักหรือรู้จักกันในชื่อโรคที่ก่อให้เกิดการกลายพันธุ์. วิธีการสแกนการกลายพันธุ์รวมทั้ง PCR-คู่ polymorphism โครงสร้างเดียวสาระ (SSCP) มีข้อได้เปรียบที่สำคัญกว่าอื่นๆ อีกมากมายเทคนิคกรดนิวคลีสำหรับการวิเคราะห์ที่ถูกต้องของ allelic และการเปลี่ยนแปลงลำดับ mutational โปรโตคอลปัจจุบันอธิบายวิธี SSCP ของการวิเคราะห์รวมทั้งขั้นตอนทั้งหมดจากการแยกขนาดเล็กของดีเอ็นเอและขยาย PCR ของลำดับเป้าหมายผ่านไปแยกเจลที่ใช้ในการamplicons และการสแกนสำหรับการกลายพันธุ์โดย SSCP (ทั้งโดยการวิเคราะห์ของamplicons radiolabeled ในการเพิ่มประสิทธิภาพการตรวจหาการกลายพันธุ์ (MDE) เจลหรือ SSCP ที่ไม่ไอโซโทปใช้เจลย่าสำเร็จรูป) วิเคราะห์ลำดับที่ตามมาของวงดนตรีที่ polymorphic ที่แยกได้จากเจลนอกจากนี้ยังมีรายละเอียด โปรโตคอล SSCP พร้อมที่สามารถตรวจสอบจุดที่เกิดการกลายพันธุ์สำหรับขนาดamplicon ถึง 450-500 bp และมักจะใช้เวลา 1-2 วันในการดำเนินการ นี้ใช้งานง่ายต้นทุนต่ำอาจแพลตฟอร์มสูงผ่านได้แสดงให้เห็นยูทิลิตี้ในการศึกษาความหลากหลายของเชื้อโรคและโรคและมีศักยภาพที่จะนำไปใช้กับยีนของสิ่งมีชีวิตใด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การวิเคราะห์ที่ถูกต้องของความแปรปรวนทางพันธุกรรมที่มีผลกระทบสำคัญในหลายพื้นที่ของการวิจัยทางการแพทย์รวมถึงการวิเคราะห์
การติดเชื้อ ( เช่นพยาธิ ) การวินิจฉัยเชื้อ และการไม่รู้จักหรือรู้จักโรคที่ก่อให้เกิดการกลายพันธุ์
การกลายพันธุ์การสแกนวิธีการ PCR ) รวมทั้งคู่ของเส้นเดียว ( ยีน ) มีความ ข้อดี
ผ่านหลายกรดนิวคลีอิกเทคนิคอื่น ๆเพื่อการวิเคราะห์ที่ถูกต้องและลำดับความสำคัญของยาฆ่าแมลงต่างๆ
Protocol ปัจจุบันอธิบาย SSCP วิธีวิเคราะห์ รวมถึงขั้นตอนทั้งหมดจากการแยกขนาดของดีเอ็นเอและ PCR แบบ
ยีนเป้าหมาย ผ่านแยก amplicons เจลตามและตรวจสอบการกลายพันธุ์โดยยีน ( ทั้งโดยการวิเคราะห์
ในการเพิ่มประสิทธิภาพการตรวจหาการกลายพันธุ์ radiolabeled amplicons ( MDE ) เจลหรือโดยไม่ใช้สำเร็จรูปจำนวนไอโซโทปย่าเจล )
ตามมาลำดับการวิเคราะห์สายพันธุ์ที่แยกได้จากแถบเจล ยังมีรายละเอียด การตรวจหายีนโปรโตคอลสามารถพร้อมจุด
การกลายพันธุ์สำหรับและขนาดถึง 450 - 500 BP , และมักจะใช้เวลา 1 - 2 วัน เพื่อดําเนินการ นี้ใช้งานง่าย ต้นทุนต่ำ อาจ
แพลตฟอร์มที่ช่วยให้มีสาธารณูปโภคเพื่อศึกษาความหลากหลายของเชื้อโรคและโรค และมีศักยภาพที่จะใช้ใดๆ
ยีนของสิ่งมีชีวิต .