2.5. Determination of protein expre

2.5. Determination of protein expression and activity
Cardiac tissue was homogenized with the RIPA buffer (Tris– HCl 50 mM,NaCl 150 mM,EGTA 1 mM,EDTA 1 mM,NP-40 1%,
sodium deoxycholate 1%). A western blot was performed for detectingproteinexpression,usingmethodsdescribedinaprevious study (Ku, Chen, & Su, 2011).Cardiac protein expression was measured for bax,β-actin,c-Jun N-terminal kinases (JNK), and p-JNK (Cell SignalingTechnology, Inc.). Cardiac tissue homogenate was used for the detection of superoxide dismutase (SOD) and caspase-3 activity,which was measured by an ELISA kit (Cayman Chemical, Ann Arbor, MI).
2.6. Determination of myocardial oxidative stress
Myocardial lipid peroxidation level, a reliable marker of oxidative stress and injury, was assessed by determining the production ofTBARS.A kit was used (Cayman Chemicals, MI, USA) along with cardiac tissue homogenate for measuring oxidative stress as previously described (Lee et al., 2015).
2.7. Determination of NO, glucose, insulin, and tumour necrosis factor-α (TNF-α) concentration in the blood sample
Blood samples were collected from a carotid artery catheter, centrifuged at 12,000 g for 3 min,and the supernatant was collected. Several ELISA kits were used for detecting NO, glucose (Cayman Chemicals,MI,USA),troponin (Biocompare,CA,USA), insulin, and TNF-α (LifeSpan Biosciences, WA, USA) concentrations in the blood plasma.
2.8. Statistical analysis
All values are presented as means ± SE. Differences between groups were assessed by ANOVA. P values less than 0.05 (P < 0.05) were considered significant differences.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5. การกำหนดกิจกรรมและการแสดงออกของโปรตีนเนื้อเยื่อหัวใจถูก homogenized กับบัฟเฟอร์ RIPA (ทริสเรทติ้ง – HCl 50 มม. NaCl 150 มม. EGTA 1 มม. EDTA 1 มม. NP 40 1%โซเดียม deoxycholate 1%) บล็อทตะวันตกถูกทำสำหรับ detectingproteinexpression, usingmethodsdescribedinaprevious ศึกษา (Ku เฉิน และ Su, 2011) แสดงออกของโปรตีนหัวใจโดยวัด bax β-แอกติน kinases c-Jun N-เทอร์มินัล (JNK), และ p-JNK (เซลล์ SignalingTechnology, Inc.) เนื้อเยื่อหัวใจ homogenate ถูกใช้สำหรับการตรวจสอบของ caspase-3 กิจกรรมและซูเปอร์ออกไซด์ dismutase (SOD) ซึ่งโดยวัดจากการ ELISA kit (เคย์แมนเคมี Ann Arbor, MI)2.6. การกำหนดเครียดกล้ามเนื้อหัวใจระดับ peroxidation ของไขมันในกล้ามเนื้อหัวใจ เครื่องหมายความน่าเชื่อถือของความเครียดออกซิเดชันและการบาดเจ็บ ได้รับการประเมิน โดยกำหนดชุด ofTBARS.A การผลิตคือใช้สารเคมีที่เคย์แมน MI สหรัฐอเมริกา) พร้อมกับเนื้อเยื่อหัวใจ homogenate สำหรับการวัดความเครียดออกซิเดชันเป็นอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Lee et al. 2015)2.7. กำหนดไม่มี กลูโคส อินซูลิน และเนื้องอกเนื้อร้ายปัจจัยα (TNF-α) ความเข้มข้นในเลือดตัวอย่างเลือดที่เก็บจากสายสวนหลอดเลือดแดง carotid ผลิตภัณฑ์ที่ 12,000 g 3 นาที และ supernatant รวบรวม ใช้หลายชุด ELISA สำหรับตรวจจับไม่ กลูโคส (เคย์แมนเคมี MI สหรัฐอเมริกา), นิยม (Biocompare, CA, USA), อินซูลิน และ TNF-α (ออกอายุการใช้งาน WA, USA) ความเข้มข้นในเลือด2.8. สถิติวิเคราะห์ค่าทั้งหมดจะแสดงเป็นหมายถึง ± SE. ความแตกต่างระหว่างกลุ่มที่ประเมิน โดย ANOVA น้อยกว่า 0.05 ค่า P (P < 0.05) พิจารณาว่างมากความแตกต่าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 ความมุ่งมั่นของการแสดงออกของโปรตีนและกิจกรรมของ
เนื้อเยื่อหัวใจทำให้เป็นเนื้อเดียวกันกับกันชน RIPA (HCl tris- ขนาด 50 มม, โซเดียมคลอไรด์ 150 มิลลิเมตร, EGTA 1 มิลลิ, EDTA 1 มิลลิ, NP-40 1%,
โซเดียม Deoxycholate 1%) ดวงตะวันได้รับการดำเนินการสำหรับ detectingproteinexpression ศึกษา usingmethodsdescribedinaprevious (กู่เฉินและซู 2011) .Cardiac การแสดงออกของโปรตีนวัดสำหรับแบ็กซ์, β-โปรตีน, C-Jun ไคเนสส์ n- ขั้ว (JNK) และ P-JNK (มือถือ SignalingTechnology, Inc) homogenate เนื้อเยื่อหัวใจที่ใช้สำหรับการตรวจสอบของ superoxide dismutase (SOD) และ caspase-3 กิจกรรมซึ่งวัดจากชุด ELISA (เคย์แมนเคมี Ann Arbor, MI) ได้.
2.6 ความมุ่งมั่นของกล้ามเนื้อหัวใจความเครียด oxidative
กล้ามเนื้อหัวใจระดับ lipid peroxidation เครื่องหมายที่เชื่อถือได้ของความเครียดออกซิเดชันและการบาดเจ็บได้รับการประเมินโดยการกำหนดผลิตชุด ofTBARS.A ถูกนำมาใช้ (เคย์แมนเคมีภัณฑ์, MI, USA) พร้อมด้วย homogenate เนื้อเยื่อหัวใจสำหรับการวัดความเครียด oxidative ไว้ก่อนหน้านี้ อธิบาย (Lee et al., 2015).
2.7 ความมุ่งมั่นไม่กลูโคสอินซูลินและเนื้อร้ายเนื้องอกปัจจัยα (TNF-α) ความเข้มข้นในตัวอย่างเลือด
เก็บตัวอย่างเลือดจากสายสวนหลอดเลือดแดง carotid, หมุนเหวี่ยงที่ 12,000 กรัมเป็นเวลา 3 นาทีและสารละลายที่ถูกเก็บรวบรวม ชุด ELISA หลายคนถูกนำมาใช้สำหรับการตรวจสอบไม่มีกลูโคส (เคย์แมนเคมีภัณฑ์, MI, USA), นิน (Biocompare, CA, USA) อินซูลินและ TNF-α (อายุการใช้งานชีววิทยาศาสตร์, WA, USA) ความเข้มข้นในเลือด.
2.8 การวิเคราะห์ทางสถิติ
ค่าทั้งหมดจะถูกนำเสนอเป็นวิธี± SE ความแตกต่างระหว่างกลุ่มที่ได้รับการประเมินโดยการวิเคราะห์ความแปรปรวน P ค่าน้อยกว่า 0.05 (P <0.05) ได้รับการพิจารณาความแตกต่างที่มีนัยสำคัญลาดเท Fi

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 การแสดงออกของโปรตีนและการกำหนดกิจกรรมกล้ามเนื้อหัวใจเป็นโฮโมกับ RIPA บัฟเฟอร์ ( ทริส– HCl 50 มม. ขนาด 150 มม. หน่วย 1 มม. , EDTA 1 มิลลิเมตร np-40 1 %โซเดียมดี กซีโชเลต 1% ) Blot ตะวันตกแสดงให้ detectingproteinexpression , การศึกษา usingmethodsdescribedinaprevious ( กู่ เฉิน และ ซู , 2011 ) ของโปรตีนที่แสดงออกวัด bax บีตา - actin c-jun กรดอะมิโน , ยา ( jnk ) และ p-jnk ( เซลล์ signalingtechnology , Inc . ) แยกเนื้อเยื่อหัวใจถูกใช้เพื่อตรวจหา Superoxide Dismutase ( SOD ) และกิจกรรมการศึกษาลักษณะซึ่งถูกวัดโดยวิธี ELISA Kit ( Cayman Chemical Ann Arbor , Mi )2.6 การกำหนดโรคความเครียดออกซิเดชันและการเกิด lipid peroxidation ระดับเครื่องหมายที่เชื่อถือได้ของภาวะเครียดออกซิเดชันและบาดเจ็บที่ถูกประเมิน โดยกำหนด oftbars การผลิต อุปกรณ์ที่ใช้ ( Cayman สารเคมี , MI , สหรัฐอเมริกา ) พร้อมกับปริมาณเนื้อเยื่อหัวใจ เพื่อวัดความเครียดออกซิเดชันตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( ลี et al . , 2015 )2.7 . ความมุ่งมั่นของ กลูโคส อินซูลินและเนื้องอกเนื้อร้ายปัจจัย - α ( TNF - α ) พบในตัวอย่างเลือดการเก็บตัวอย่างเลือดจากสายสวนเส้นเลือดใหญ่ระดับที่ 3 , 000 กรัมต่อนาที และนำกำลังรวบรวม บางชุด ELISA ใช้ตรวจหาไม่มีกลูโคส ( Cayman สารเคมี , MI , สหรัฐอเมริกา ) , โทรโปนิน ( biocompare , CA , USA ) , อินซูลิน , และ TNF - ( อายุαชีววิทยา วอชิงตัน สหรัฐอเมริกา ) ที่ความเข้มข้นในเลือดพลาสมา2.8 . สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูลค่าทั้งหมดจะแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ±เซ ความแตกต่างระหว่างกลุ่มที่ได้รับการประเมินโดย ANOVA ค่า P น้อยกว่า 0.05 ( p < 0.05 ) ได้แก่ การพิจารณา signi จึงไม่แตกต่างกัน