We have previously shown that the d

We have previously shown that the degree of SLB disruption caused by polymer nanoparticles (e.g., hole formation, membrane thinning), correlates with the level of enzyme leakage, dye diffusion, cytotoxicity, and nanoparticle uptake measured in vitro (this AFM data is shown in Figures 3b−d and 4).10,12,27 In addition, the degree of membrane disruption parallels the degree of nonselective tissue uptake observed in vivo.29 This correlation between the AFM/SLB assays and the in vitro and in vivo studies inspired us to examine the disruption between other nanoparticles that are well precedented to disrupt and/or translocate across cell membranes. We therefore chose the AFM/SLB assay to explore the behavior of a number of other important materials including a pentanol-core G3 PAMAM dendron, the cell penetrating peptide MSI-78,30 the TAT sequence31 employed by HIV virus, amine-coated gold nanoparticles,19,32 and amine-terminated silica.33,34 This set of particles, when combined with our previous studies on G3, G5, and G7 PAMAM dendrimers,10 polyethyleneimine (PEI), and diethylaminoethyl-dextran (DEAE-DEX),12 presents a wide range of physical properties (organic versus inorganic, small versus large, flexible versus rigid, spherical versus irregular) that may affect the degree of membrane disruption. This AFM/SLB assay is completed by first depositing a drop of 1 mg/mL lipid vesicle solution on a cleaved mica surface. Following an incubation time of approximately 20 min, excess lipid is removed by gently rinsing the newly formed SLB with water. After a stable image of the SLB using tapping or AC mode AFM is obtained, the nanoparticles are introduced and imaging continues until the SLB is once again stable (See Supporting Information for more experimental details).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เราได้ก่อนหน้านี้แสดงที่ระดับของทรัพย SLB ที่เกิดจากการเก็บกักของพอลิเมอร์ (เช่น หลุมก่อ เยื่อบาง), สัมพันธ์กับระดับของเอนไซม์รั่ว ย้อมแพร่ cytotoxicity และดูดซับ nanoparticle วัดในหลอด (AFM ข้อมูลนี้จะแสดงตัวเลข 3b−d และ 4) .10,12,27 แห่ง ระดับของเมมเบรนทรัพย parallels ระดับการดูดธาตุอาหารเนื้อเยื่อ nonselective สังเกตใน vivo.29 นี้ความสัมพันธ์ระหว่าง assays AFM/SLB และศึกษาในหลอดทดลอง และในสัตว์ทดลองแรงบันดาลใจเรา การตรวจสอบทรัพยระหว่างอื่น ๆ เก็บกักที่ดี precedented ไปรบกวน หรือ translocate ผ่านเยื่อหุ้มเซลล์ เราจึงเลือกวิเคราะห์ AFM/SLB สำรวจพฤติกรรมจำนวนวัสดุสำคัญอื่น ๆ รวมถึงเป็นหลัก pentanol G3 PAMAM dendron เซลล์เจาะเปป sequence31 MSI 78,30 ททท.ว่าไวรัสเอชไอวี เก็บกักทองเคลือบ amine, silica.33,34 19, 32 และ เลิก amine ซึ่งชุดของอนุภาค เมื่อรวมกับการศึกษาของเราก่อนหน้านี้ dendrimers G3, G5 และ PAMAM จี 7 , 10 polyethyleneimine (พีอีไอ), และ diethylaminoethyl-เดกซ์แทรน (DEAE-เดกซ์), 12 นำเสนอความหลากหลายของคุณสมบัติทางกายภาพ (อินทรีย์กับอนินทรีย์ ขนาดเล็กเมื่อเทียบกับขนาดใหญ่ มีความยืดหยุ่นและแข็ง ทรงกลมและไม่สม่ำเสมอ) ที่อาจมีผลต่อระดับของเมมเบรนทรัพยได้ วิเคราะห์ AFM/SLB นี้เสร็จ โดยฝากโซลูชันเวสิเคิลไขมัน 1 mg/mL หยดบนพื้นผิวแก้วแหวก ต่อเวลาการฟักตัวประมาณ 20 นาที ไขมันส่วนเกินจะถูกลบออก โดยค่อย ๆ ล้าง SLB ใหม่รูปแบบน้ำ หลังจากได้รูปที่มีเสถียรภาพของ SLB ใช้แตะหรือโหมด AC AFM เก็บกักจะแนะนำ และภาพอย่างต่อเนื่องจนกว่า SLB มีเสถียรภาพอีกครั้ง (ดูสนับสนุนข้อมูลสำหรับรายละเอียดเพิ่มเติมทดลอง)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เราได้แสดงให้เห็นก่อนหน้านี้ว่าระดับของการหยุดชะงัก SLB ที่เกิดจากอนุภาคนาโนพอลิเมอ (เช่นการสร้างหลุมผอมบางเมมเบรน) มีความสัมพันธ์กับระดับของการรั่วไหลของเอนไซม์แพร​​่ย้อมเป็นพิษและการดูดซึมวัดอนุภาคนาโนในหลอดทดลอง (AFM ข้อมูลนี้จะแสดงใน ตัวเลข 3b-d และ 4) .10,12,27 นอกจากนี้ระดับของการหยุดชะงักเมมเบรนแนวระดับของการดูดซึมของเนื้อเยื่อ nonselective สังเกตใน vivo.29 ความสัมพันธ์ระหว่าง AFM / ตรวจ SLB และในหลอดทดลองและในการศึกษาร่างกายเป็นแรงบันดาลใจนี้ เราจะตรวจสอบการหยุดชะงักระหว่างอนุภาคนาโนอื่น ๆ ที่ precedented ดีที่จะทำลายและ / หรือโยกย้ายข้ามเยื่อหุ้มเซลล์ ดังนั้นเราจึงเลือกที่จะ AFM / ทดสอบ SLB การสำรวจพฤติกรรมของจำนวนของวัสดุที่สำคัญอื่น ๆ รวมทั้ง G3 pentanol-core PAMAM Dendron เซลล์เจาะเปปไทด์ของ MSI-78,30 sequence31 ทททว่าจ้างจากเชื้อไวรัสเอชไอวีอนุภาคนาโนทองคำ amine เคลือบ , 19,32 และ amine สิ้นสุด silica.33,34 ชุดของอนุภาคนี้เมื่อรวมกับการศึกษาก่อนหน้านี้ของเราใน G3, G5 และ G7 dendrimers PAMAM 10 polyethyleneimine (PEI) และ diethylaminoethyl-dextran (DEAE-DEX) 12 นำเสนอความหลากหลายของคุณสมบัติทางกายภาพ (อินทรีย์เมื่อเทียบกับนินทรีย์ที่มีขนาดเล็กเมื่อเทียบกับขนาดใหญ่ที่มีความยืดหยุ่นเมื่อเทียบกับการแข็งผิดปกติเมื่อเทียบกับทรงกลม) ที่อาจส่งผลกระทบต่อระดับของการหยุดชะงักเมมเบรน นี้ AFM / SLB ทดสอบจะเสร็จสมบูรณ์โดยการฝากเงินครั้งแรกลดลงจาก 1 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรวิธีการแก้ปัญหาถุงไขมันบนพื้นผิวแก้วตัด ต่อไปนี้เวลาฟักตัวประมาณ 20 นาทีไขมันส่วนเกินจะถูกลบออกโดยการล้างเบา ๆ ที่จัดตั้งขึ้นใหม่ SLB ด้วยน้ำ หลังจากภาพที่มั่นคงของ SLB ใช้กรีดหรือโหมด AC AFM จะได้รับอนุภาคนาโนที่มีการแนะนำและการถ่ายภาพต่อเนื่องจนกว่า SLB เป็นอีกครั้งหนึ่งที่มีเสถียรภาพ (ดูข้อมูลสนับสนุนสำหรับรายละเอียดการทดลองเพิ่มเติม)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เราเคยแสดงให้เห็นว่าระดับของการหยุดชะงักที่เกิดจากอนุภาคนาโนพอลิเมอร์ SLB ( เช่นหลุมสร้างเยื่อบาง ) มีความสัมพันธ์กับระดับของเอนไซม์การย้อมเซลล์สำหรับการแพร่กระจาย และการวัดในหลอดทดลอง ( AFM ข้อมูลนี้จะแสดงในรูป 3B − D และ 4 ) 10,12,27 นอกจากนี้ระดับของการเปรียบเทียบระดับของ nonselective เนื้อเยื่อเมมเบรนในการตรวจสอบ vivo.29 นี้ความสัมพันธ์ระหว่าง AFM SLB และ / หรือในหลอดทดลองและในสัตว์ทดลองการศึกษาแรงบันดาลใจให้เราตรวจสอบการหยุดชะงักระหว่างอนุภาคอื่น ๆที่ มี precedented ทำลายและ / หรือโยกย้ายข้ามเยื่อหุ้มเซลล์เราจึงเลือกใช้ AFM / SLB สำรวจพฤติกรรมของวัสดุที่สำคัญอื่น ๆได้แก่ เพนทานอลคอร์ G3 pamam dendron มือถือเจาะเปปไทด์ msi-78,30 ททท. sequence31 ใช้โดยไวรัส HIV เอมีนนาโนทองเคลือบ และการยกเลิก 19,32 ละลายซิลิกา 33,34 ชุดนี้ของอนุภาค เมื่อรวมกับการศึกษาก่อนหน้านี้ของเรา G3 G5 และ pamam เดนไดรเมอร์ , G7 ,10 โพลีเอทธิลีนไอมีน ( TM ) และ diethylaminoethyl dextran ( deae-dex ) 12 นำเสนอหลากหลายคุณสมบัติทางกายภาพ ( อินทรีย์และอนินทรีย์ ขนาดเล็กกับขนาดใหญ่มีความยืดหยุ่นและแข็งทรงกลมและผิดปกติ ) ที่อาจส่งผลกระทบต่อระดับของการหยุดชะงักของเยื่อแผ่น นี้จะเสร็จสมบูรณ์โดยการใช้ AFM / บางแก้ว ก่อนการฝากเงินลดลง 1 mg / ml และโซลูชั่นในแขนงของแก้วพื้นผิวต่อไปนี้เป็นระยะเวลาประมาณ 20 นาที ไขมัน ส่วนเกินออก โดยค่อยๆ ล้างที่จัดตั้งขึ้นใหม่ SLB ด้วยน้ำ หลังจากภาพที่มั่นคงของ SLB ใช้กรีดหรือ AFM โหมด AC ที่ได้รับการแนะนำการถ่ายภาพและอนุภาคต่อจนกว่า SLB อีกครั้งคงที่ ( ดูข้อมูลประกอบรายละเอียดการทดลองมากกว่า )