(Tokyo, Japan). Enhanced chemilumin

(Tokyo, Japan). Enhanced chemiluminescence (ECL) plus
Western blotting detection reagent was obtained from GE
Healthcare (Buckinghamshire, UK). Mouse monoclonal
IgG2a and goat anti-mouse IgG-horseradish peroxidase
were obtained from Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz,
CA, USA). Prestained protein markers were obtained from
iNtRon Biotechnology (Sungnam, Korea).
Phosvitin extraction
Yolk was separated from egg white, and carefully rolled
on a paper towel to remove all egg white. Then, the egg
yolk membranes and chalaza were removed by filtering
through a 2,000 m testing sieve (Chung Gye Sang Gong
Sa, Seoul, Korea). The filtered egg yolk was homogenized
with two volumes of cold 0.17 M NaCl, and centrifuged at
4,070g for 30 min at 4C. The precipitant was collected
and re-suspended in two volumes of cold 0.17 M NaCl,
homogenized, and centrifuged at 4,070g for 30 min. The
precipitant containing yolk granules was collected, and
homogenized with five volumes of 12% NaCl or 12%
(NH4)2SO4 (final concentration was 10%). The disrupted
granules solution was subjected to thermal treatment in a
water bath at 70, 80, 85, or 90C for 1 h. After heating, the
sample solutions were diluted (1:6, v/v) with distilled water,
and the pH of the sample solutions was adjusted to pH 4.0
to 12.0 using 6 N HCl or 10 N NaOH. After stirring for 30
min, the homogenates were centrifuged at 4,070g for 30
min at 4C. The supernatant was filtered through filter
paper (Whatman No.1) to remove floating particles. The
filtrate was concentrated and desalted using an
ultrafiltration system (Quixstand Benchtop System using a
membrane column with a 10 kDa molecular weight cut-off;
GE Healthcare, Waukesha, WI, USA), and then centrifuged
at 4,070g for 30 min at 4C. The supernatant was collected
and lyophilized (Figure 1).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

(โตเกียว ญี่ปุ่น) บวกเพิ่ม chemiluminescence (ECL)เวสเทิร์น blotting วิธีตรวจหาน้ำยามาจาก GEการดูแลสุขภาพ (บักกิงแฮมเชอร์ UK) เมาส์ที่โมโนIgG2a และแพะต้านเมาส์ IgG ดิชฮอสได้รับจากเทคโนโลยีชีวภาพซานตาครูซ (ซานตาครูซCA, USA) ได้รับเครื่องหมาย prestained โปรตีนจากiNtRon เทคโนโลยีชีวภาพ (เพ เกาหลี)Phosvitin สกัดแดงถูกแยกจากไข่ขาว และรีดอย่างระมัดระวังบนผ้าหรือกระดาษเพื่อเอาไข่ขาวทั้งหมด แล้ว ไข่แดงเยื่อและ chalaza ถูกถอดออก โดยการกรองผ่านการทดสอบ m 2000 ตะแกรง (Chung เจ้ากเย Sang GongSa โซล เกาหลี) กรองไข่แดงถูก homogenizedมีสองเล่มเย็น 0.17 M NaCl และเหวี่ยงที่4, 070g 30 นาทีที่ 4C Precipitant การเก็บรวบรวมและระงับอีกครั้งในสองเล่มเย็น 0.17 M NaClhomogenized และผลิตภัณฑ์ที่ 4, 070g 30 นาทีprecipitant ที่ประกอบด้วยเม็ดแดงรวบรวม และhomogenized กับห้า 12% NaCl หรือ 12%(NH4) 2SO4 (ความเข้มข้นสุดท้ายเป็น 10%) การหยุดชะงักเม็ดแก้ปัญหาได้ภายใต้การรักษาความร้อนในตัวอ่างน้ำที่ 70, 80, 85 หรือ 90C สำหรับ 1 h หลังจากเครื่องทำความร้อน การโซลูชันตัวอย่างถูกเจือจาง (1:6, v/v) ด้วยน้ำกลั่นและค่า pH ของการแก้ปัญหาอย่างถูกปรับให้ pH 4.0การ 12.0 ใช้ 6 N HCl หรือ 10 N NaOH หลังจากที่ตื่นเต้นสำหรับ 30นาที homogenates มีผลิตภัณฑ์ที่ 4, 070g 30นาทีที่ 4C Supernatant ที่ถูกกรองผ่านตัวกรองกระดาษ (Whatman No.1) เพื่อกำจัดอนุภาคที่ลอย การระบบการกรองที่มีความเข้มข้น และ desalted ใช้การระบบกรอง (ใช้ Quixstand แบบตั้งโต๊ะระบบการคอลัมน์ที่เมมเบรน มีเกณฑ์น้ำหนักโมเลกุลเป็น 10 kDaดูแลสุขภาพ GE, Waukesha อิน สหรัฐอเมริกา), และจากนั้นที่ 4, 30 นาทีที่ 4C 070g Supernatant รวบรวมและ lyophilized (1 รูป)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

(โตเกียวประเทศญี่ปุ่น) ปรับปรุง chemiluminescence (ECL) บวก
ตะวันตกน้ำยาตรวจจับซับที่ได้รับจากจีอี
เฮลธ์แคร์ (Buckinghamshire สหราชอาณาจักร) เมาส์โมโนโคลนอล
IgG2a และ peroxidase แพะต่อต้านเมาส์ IgG-พืชชนิดหนึ่ง
ที่ได้รับจากซานตาครูซเทคโนโลยีชีวภาพ (Santa Cruz,
CA, USA) Prestained เครื่องหมายโปรตีนที่ได้รับจาก
intron เทคโนโลยีชีวภาพ (Sungnam เกาหลี).
Phosvitin สกัด
ไข่แดงถูกแยกออกจากไข่ขาวและระมัดระวังการรีด
บนผ้าขนหนูกระดาษเพื่อเอาไข่สีขาวทั้งหมด จากนั้นไข่
เยื่อไข่แดงและ chalaza ถูกถอดออกโดยการกรอง
ผ่าน 2,000 mทดสอบตะแกรง (Chung Gye Sang ฆ้อง
สากรุงโซลประเทศเกาหลี) ไข่แดงกรองทำให้เป็นเนื้อเดียวกัน
กับสองเล่มของความหนาวเย็น 0.17 M NaCl และหมุนเหวี่ยงที่
4,070g 30 นาทีที่4C กระตุ้นให้เกิดการเก็บรวบรวม
และ re-ระงับในสองเล่มของความหนาวเย็น 0.17 M NaCl,
ปั่นและหมุนเหวี่ยงที่4,070gเป็นเวลา 30 นาที
ใจเร็วด่วนที่มีเม็ดไข่แดงถูกเก็บรวบรวมและ
ปั่นกับห้าเล่มของโซเดียมคลอไรด์ 12% หรือ 12%
(NH4) 2SO4 (ความเข้มข้นสุดท้ายเป็น 10%) กระจัดกระจาย
วิธีการแก้ปัญหาเม็ดได้ภายใต้การรักษาความร้อนใน
อ่างน้ำที่ 70, 80, 85, หรือ90Cเป็นเวลา 1 ชั่วโมง หลังจากความร้อนที่
ตัวอย่างการแก้ปัญหาที่ถูกเจือจาง (1: 6 v / v) กับน้ำกลั่น
และค่า pH ของตัวอย่างการแก้ปัญหาที่ถูกปรับให้มีค่า pH 4.0
เพื่อใช้ 12.0 6 N HCl หรือ 10 N NaOH หลังจากกวนเป็นเวลา 30
นาที, homogenates ถูกหมุนเหวี่ยงที่4,070g 30
นาทีที่4C ใสถูกกรองผ่านตัวกรอง
กระดาษ (Whatman ฉบับที่ 1) เพื่อเอาอนุภาคลอย
กรองเข้มข้นและ desalted ใช้
ระบบการกรอง (Quixstand แบบตั้งโต๊ะระบบโดยใช้
คอลัมน์เมมเบรนที่มี 10 กิโลดาลตันน้ำหนักโมเลกุลตัด;
GE Healthcare, มิลวอกี, WI, USA) และจากนั้นหมุนเหวี่ยง
ที่4,070g 30 นาทีที่ 4 C ใสถูกเก็บรวบรวม
และแห้ง (รูปที่ 1)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

( โตเกียว , ญี่ปุ่น ) นโยบายแรงงานเพิ่มขึ้น ( ECL ) บวกWestern blotting ตรวจจับรีเอเจนต์ที่ได้รับจากจีการดูแลสุขภาพ ( เหมือนเดิม , UK ) โมโนโคลนอลigg2a แพะและป้องกันเมาส์ IgG horseradish peroxidaseได้จาก ซานตา ครูซ ( Santa Cruz , เทคโนโลยีชีวภาพแคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา ) prestained โปรตีนเครื่องหมายที่ได้รับจากเทคโนโลยีชีวภาพ iNtRON ( sungnam , เกาหลี )ตัวอ่อนของสัตว์ที่มีกระดูกสันหลัง การสกัดไข่แดงแยกจากไข่ขาว และรอบคอบ รีดบนกระดาษเช็ดเอาไข่ขาว แล้วไข่เยื่อหุ้มไข่แดงและคาลาซ่าออกโดยการกรองผ่าน 2000 การทดสอบตะแกรง ( ชองเก ซัง กุงซา กรุงโซล ประเทศเกาหลี ) กรองไข่แดงเป็นโฮโมกับสองเล่มของเย็น 0.17 โมลาร์ และระดับที่4070  G สำหรับ 30 นาทีที่ 4  C สารตกตะกอนรวบรวมและระงับสองเล่มของเย็น 0.17 M NaClโฮโม และระดับที่ 4070 กรัม 30 นาทีความหุนหันพลันแล่นที่มีไข่แดงเม็ด เก็บ และโฮโมกับห้าปริมาณโซเดียมคลอไรด์ร้อยละ 12 หรือ 12 เปอร์เซ็นต์( NH4 ) 2so4 ( ความเข้มข้นสุดท้ายคือ 10 % ) ที่กระจัดกระจายเม็ดโซลูชั่นภายใต้การใช้ความร้อนในน้ำร้อนอุณหภูมิ 70 , 80 , 85 , 90 องศาเซลเซียสนาน 1 ชั่วโมง หลังเครื่องตัวอย่างโซลูชั่นถูกเจือจาง ( 1 : 6 V / V ) น้ำกลั่นและ pH ของตัวอย่างโซลูชั่นปรับ pH 4.0เพื่อสำหรับใช้ 6 N HCl หรือ 10 N NaOH หลังจากกวน 30มิน homogenates เป็นระดับที่ 4070  30 กรัมนาทีที่ 4  C กรองผ่านตัวกรองสูง คือกระดาษ ( whatman 1 เอาอนุภาคที่ลอย ที่กำลังเข้มข้นและ desalted ใช้กรองระบบกรองระบบ ( แบบตั้งโต๊ะ quixstand โดยใช้เมมเบรนคอลัมน์กับ 10 กิโลดาลตันน้ำหนักโมเลกุลตัดออก ;โดยสุขภาพ , อุปกรณ์ , WI , USA ) , และระดับที่ 4070  G สำหรับ 30 นาทีที่ 4  C นำรวบรวมและ แห้ง ( รูปที่ 1 )