Although core α1,6-fucosylation is

Although core α1,6-fucosylation is commonly observed in N-glycans of both vertebrates and invertebrates, the responsible enzyme, α1,6-fucosyltransferase, has been much less characterized in invertebrates compared to vertebrates. To investigate the functions of α1,6-fucosyltransferase in insects, we cloned the cDNA for the α1,6-fucosyltransferase from Bombyx mori (Bmα1,6FucT) and characterized the recombinant enzyme prepared using insect cell lines. The coding region of Bmα1,6FucT consists of 1737 bp that code for 578 amino acids of the deduced amino acid sequence, showing significant similarity to other α1,6-fucosyltransferases. Enzyme activity assays demonstrated that Bmα1,6FucT is enzymatically active in spite of being less active compared to the human enzyme. The findings also indicate that Bmα1,6FucT, unlike human enzyme, is N-glycosylated and forms a disulfide-bonded homodimer. These findings contribute to a better understanding of roles of α1,6-fucosylation in invertebrates and also to the development of the more efficient engineering of N-glycosylation of recombinant glycoproteins in insect cells

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แม้ว่าหลัก α1, 6 fucosylation โดยทั่วไปแล้วหรือไม่ใน N-glycans ของ vertebrates และ invertebrates เอนไซม์รับผิดชอบ α1, 6 fucosyltransferase มีได้มากน้อยลักษณะในเปรียบเทียบกับ vertebrates invertebrates การตรวจสอบหน้าที่ของ α1, fucosyltransferase 6 ในแมลง เรา cloned cDNA สำหรับ α1, fucosyltransferase 6 จากไหม (Bmα1, 6FucT) และลักษณะเอนไซม์ recombinant ใช้บรรทัดเซลล์แมลง ภูมิภาครหัสของ Bmα1, 6FucT ประกอบของ bp 1737 ที่รหัสสำหรับกรดอะมิโนที่ 578 ของลำดับกรดอะมิโน deduced แสดงความคล้ายคลึงกันอย่างมีนัยสำคัญกับอื่น ๆ α1, 6 fucosyltransferases เอนไซม์กิจกรรม assays แสดงว่า Bmα1, 6FucT อยู่ enzymatically ทั้ง ๆ ที่น้อยกว่าเมื่อเปรียบเทียบกับเอนไซม์มนุษย์ใช้งานอยู่ ผลการวิจัยระบุว่า Bmα1, 6FucT ซึ่งแตกต่างจากมนุษย์เอนไซม์ N glycosylated และฟอร์ม homodimer ที่ถูกผูกมัดไดซัลไฟด์ ผลการวิจัยเหล่านี้นำไปสู่การเข้าใจบทบาทของ α1, 6-fucosylation ใน invertebrates และพัฒนาด้านวิศวกรรมที่มีประสิทธิภาพมากขึ้นของ N-glycosylation ของ glycoproteins recombinant ในเซลล์แมลง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แม้ว่าแกนα1,6-fucosylation เป็นที่สังเกตได้ทั่วไปใน N-glycans ของสัตว์มีกระดูกสันหลังและไม่มีกระดูกสันหลัง, เอนไซม์รับผิดชอบα1,6-fucosyltransferase ได้โดดเด่นมากน้อยในสัตว์ไม่มีกระดูกสันหลังเมื่อเทียบกับสัตว์ที่มีกระดูกสันหลัง ในการตรวจสอบการทำงานของα1,6-fucosyltransferase ในแมลงที่เราโคลน cDNA สำหรับα1,6-fucosyltransferase จากไหม (Bmα1,6FucT) และลักษณะการทำงานของเอนไซม์ recombinant เตรียมใช้เซลล์แมลง ภูมิภาคเข้ารหัสของBmα1,6FucTประกอบด้วย 1,737 bp รหัสที่ 578 กรดอะมิโนของลำดับกรดอะมิโนอนุมานได้แสดงให้เห็นความคล้ายคลึงกันอย่างมีนัยสำคัญอื่น ๆ α1,6-fucosyltransferases การตรวจการทำงานของเอนไซม์แสดงให้เห็นว่ามีการใช้งานBmα1,6FucTเอนไซม์แม้จะถูกใช้งานน้อยลงเมื่อเทียบกับเอนไซม์มนุษย์ ผลการวิจัยยังระบุว่าBmα1,6FucTซึ่งแตกต่างจากเอนไซม์มนุษย์คือ N-glycosylated และรูปแบบ homodimer ซัลไฟด์ถูกผูกมัด การค้นพบนี้นำไปสู่​​ความเข้าใจที่ดีขึ้นของบทบาทของα1,6-fucosylation ในสัตว์ไม่มีกระดูกสันหลังและการพัฒนาทางวิศวกรรมที่มีประสิทธิภาพมากขึ้นของ N-glycosylation ของไกลโคโปรตีน recombinant ในเซลล์แมลง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แม้ว่า 1,6-fucosylation αหลักโดยทั่วไปที่พบในสัตว์มีกระดูกสันหลังและสัตว์ไม่มีกระดูกสันหลัง n-glycans ทั้ง , รับผิดชอบเอนไซม์ α 1,6-fucosyltransferase ได้รับมากน้อยลักษณะในสัตว์ไม่มีกระดูกสันหลัง เมื่อเทียบกับกระดูกสันหลัง เพื่อศึกษาการทำงานของα 1,6-fucosyltransferase ในแมลงที่เราโคลนวิธีสำหรับ 1,6-fucosyltransferase αจาก Bombyx mori ( BM α 16fuct ) และลักษณะโปรตีนเอนไซม์ที่เตรียมโดยใช้เซลล์แมลงสาย รหัสภูมิภาคของ BM α 1,6fuct ประกอบด้วย 1754 BP ว่ารหัสเป็นกรดอะมิโนของลำดับกรดอะมิโนได้แสดงความคล้ายคลึงกันกับ 1,6-fucosyltransferases αสำคัญอื่น ๆ ของเอนไซม์พบว่า BM α 16fuct เป็น enzymatically ปราดเปรียวทั้งๆ ที่ใช้งานน้อยเมื่อเทียบกับเอนไซม์ของมนุษย์ ผลการวิจัยยังชี้ให้เห็นว่า BM α 1,6fuct แตกต่างจากเอนไซม์ของมนุษย์ เป็น n-glycosylated และรูปแบบไดซัลไฟด์บอนด์โฮโมไดเมอร์ . การค้นพบนี้นำไปสู่ความเข้าใจในบทบาทของα 16-fucosylation ในสัตว์ไม่มีกระดูกสันหลัง และยังมีการพัฒนาวิศวกรรมที่มีประสิทธิภาพมากขึ้นของ n-glycosylation ของยีนไกลโคโปรตีนในเซลล์แมลง