consist
Pss B728a, P. syringae pv. tabaci (P.s. tabaci) ATCC 11528 and P. syringae pv. tomato (Pst) DC3000 were subjected to PCR with primers designed to target the conserved genes syrB2 (syringomycin biosynthesis), cmaA (coronatine biosynthesis) and tblA (tabotoxin biosynthesis), respectively [34,35]. cmaA, syrB2, and tblA amplicons were 177-, 160-, and 200-bp in size, respectively [35]. PCR was carried out in a 20-ml reaction mixture containing 10 ml of the SYBRH Green ERTM SuperMix Universal (Invitrogen, Grand Island, NY, USA), 8.16 ml nuclease-free water, 0.4 ml of each primer (200 nM), and 0.04 ml of ROX reference dye and genomic DNA. Thermal cycling conditions consisted of 20 sec at 95uC, followed by 40 cycles of 3 sec at 95uC, 30 sec at 60uC, and 30 sec
at 72uC.
ประกอบด้วยPss B728a, P. syringae pv (ป.ล. tabaci) tabaci ATCC 11528 และ P. syringae pv มะเขือเทศ (Pst) DC3000 ถูกต้อง PCR ด้วยไพรเมอร์ที่ออกแบบมาเพื่อ syrB2 นำยีนเป้าหมาย (syringomycin สังเคราะห์), cmaA (coronatine สังเคราะห์) tblA (tabotoxin สังเคราะห์), และตามลำดับ [34,35] amplicons cmaA, syrB2 และ tblA มี 177- 160- 200-bp ขนาด ตามลำดับ [35] PCR ถูกดำเนินการใน 10 ml ของ SYBRH กรี ERTM SuperMix สากล (Invitrogen เกาะแกรนด์ NY, USA), น้ำฟรี nuclease 8.16 ml, 0.4 ml แต่ละพื้นที่ประกอบด้วยส่วนผสมปฏิกิริยา 20 ml (200 nM), และ 0.04 ml ของ genomic DNA และสีย้อม ROX อ้างอิง ขี่จักรยานสภาพความร้อนประกอบด้วย 20 วินาทีใน 95uC ตามรอบ 40 วินาที 3 ที่ 95uC, 30 วินาทีที่ 60uC และ 30 วินาทีที่ 72uC
การแปล กรุณารอสักครู่..
ประกอบด้วย
Pss B728a พี syringae pv tabaci (สด tabaci) ATCC 11528 และ syringae pv พี มะเขือเทศ (Pst) DC3000 ถูกยัดเยียดให้ PCR ด้วยไพรเมอร์ที่ออกแบบมาเพื่อเป้าหมายยีนป่าสงวน syrB2 (syringomycin สังเคราะห์) CMAA (สังเคราะห์ coronatine) และ tblA (สังเคราะห์ tabotoxin) ตามลำดับ [34,35] CMAA, syrB2 และ amplicons tblA เป็น 177-, 160- และ 200 bp ในขนาดตามลำดับ [35] PCR ได้ดำเนินการใน 20 มิลลิลิตรผสมปฏิกิริยาที่มี 10 มล. ของ SYBRH สีเขียว ERTM SUPERMIX สากล (Invitrogen, เกาะแกรนด์, นิวยอร์ก, สหรัฐอเมริกา) 8.16 มล. น้ำ Nuclease ฟรี 0.4 มล. ของแต่ละไพรเมอร์ (200 นาโนเมตร) และ 0.04 มล. สีอ้างอิง ROX และดีเอ็นเอ เงื่อนไขการขี่จักรยานความร้อนประกอบด้วย 20 วินาทีที่ 95uC ตามด้วย 40 รอบ 3 วินาทีที่ 95uC, 30 วินาทีที่ 60uC และ 30
วินาทีที่72uC
การแปล กรุณารอสักครู่..
ประกอบด้วย
แฮ่ b728a , หน้า syringae PV . tabaci ( ป.ล. tabaci ) และ 11528 และ P . syringae PV . มะเขือเทศ ( PST ) dc3000 ถูก PCR กับไพรเมอร์ที่ออกแบบมาเพื่อเป้าหมายการรักษายีน syrb2 ( syringomycin ชีวสังเคราะห์ ) CMAA ( coronatine ชีวสังเคราะห์ ) และ tbla ( tabotoxin ชีวสังเคราะห์ ) ตามลำดับ [ 34,35 ] syrb2 CMAA และ tbla , amplicons จำนวน 177 - 160 - 200 BP ขนาดตามลำดับ [ 35 ]โดยได้ทำการศึกษาใน 20 มิลลิลิตรปฏิกิริยาผสม บรรจุ 10 ml ของ sybrh สีเขียว ertm supermix สากล ( Invitrogen , Grand Island , NY , USA ) , 8.16 ml นิวเคลียสน้ำฟรี , 0.4 มิลลิลิตรของแต่ละคู่ ( 200 nm ) และ 0.04 กรัมและย้อมอ้างอิง Rox ดีเอ็นเอ . เงื่อนไขการขี่จักรยานการระบายความร้อนเป็น 20 วินาทีที่ 95uc ตาม 40 รอบ 3 วินาทีที่ 95uc 30 วินาทีที่ 60uc และ 30 วินาที
ที่ 72uc .
การแปล กรุณารอสักครู่..