2.5. Effect of essential oils on hy

2.5. Effect of essential oils on hyphal morphology
Determination of volatile and contact phase effects of essential oils on hyphal morphology was described in our earlier study (Soylu et al., 2006). For the determination of volatile phase effect of essential oils on hyphal morphology, a mycelial agar disc from a 7-day old culture was first placed in the centre of PDA plate and incubated at 20 °C for 2 days to allow mycelium to grow into the medium. After 2 days of pre-incubation, different concentrations of essential oils used in vitro studies were dropped (onto covers of Petri dishes), sealed by parafilm and incubated at 20 °C for 3 days. Determination of contact phase effect of essential oils on hyphal morphology was as described in an earlier paper. Thin layers (1 mm) of agar blocks (3–4 cm2) containing mycelium were removed at one-day intervals for examination by light microscopy. The blocks cut from growing edges were placed in a drop of 50% glycerol on microscope glass slides, covered with glass cover slip and examined using a phase contrast light microscope (Olympus BX51, Tokyo, Japan).
For SEM analysis, fungal hypha was processed as described before (Soylu et al., 2006). Mycelial discs (1 cm in diameter) exposed to the most effective concentration of origanum essential oil was fixed with 2.5% glutaraldehyde in 0.1 M phosphate-buffer (pH = 7.2) for 2 h at room temperature. They were washed twice, each time for 10 min, in the same buffer. After fixation, the samples were dehydrated in a graded ethanol series (70%, 80%, 90%, and three times at 100%) for a period of 30 min in each series. The samples were critical point dried in a drying apparatus (Polaron CPD 7501, UK) up to the critical point with CO2. The fixed material was then mounted on stubs using double-sided carbon tape and coated with gold/palladium in a sputter coater system in a high-vacuum chamber (Polaron SC7620, UK) for 150 sec at 9 mA. The samples were examined and digital images captured using a JEOL JSM 5500 SEM at an accelerating voltage of 5 kV.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5. ผลของน้ำมันหอมระเหย hyphal สัณฐานวิทยากำหนดขั้นตอนการระเหย และติดต่อผลของน้ำมันหอมระเหย hyphal สัณฐานวิทยาถูกอธิบายไว้ในการศึกษาก่อนหน้านี้ของเรา (Soylu และ al., 2006) สำหรับการกำหนดผลขั้นตอนการระเหยของน้ำมันหอมระเหย hyphal สัณฐานวิทยา ดิสก์ mycelial agar จากวัฒนธรรม 7 - วันเก่าก่อนอยู่ในศูนย์กลางของแผ่น PDA และ incubated ที่ 20 ° C 2 วันให้ mycelium จะเติบโตเป็นสื่อ หลังจาก 2 วันก่อนบ่ม แตกต่างความเข้มข้นของน้ำมันหอมระเหย ศึกษาใช้ในการเพาะเลี้ยงลดลง (ลงครอบคลุมอาหาร Petri), ปิดผนึก โดย parafilm และ incubated สำหรับ 3 วันที่ 20 ° C กำหนดระยะติดต่อผลของน้ำมันหอมระเหย hyphal สัณฐานวิทยาได้ในกระดาษก่อนหน้านี้ ชั้นบาง (1 mm) ของบล็อก agar (3-4 cm2) ประกอบด้วย mycelium ถูกเอาออกในช่วงเวลาหนึ่งวันสำหรับการสอบ โดย microscopy แสง บล็อกตัดจากเจริญเติบโตขอบถูกวางในหยด 50% กลีเซอรในกล้องจุลทรรศน์สไลด์แก้ว ครอบแก้วครอบคลุมการจัดส่ง และตรวจสอบการใช้ระยะความคมชัดแสงกล้องจุลทรรศน์ (BX51 โอลิมปัส โตเกียว ญี่ปุ่น)สำหรับการวิเคราะห์ SEM เชื้อรา hypha ถูกประมวลผลตามที่อธิบายไว้ก่อน (Soylu และ al., 2006) Mycelial ดิสก์ (เส้นผ่านศูนย์กลาง 1 เซนติเมตร) สัมผัสกับความเข้มข้นมีประสิทธิภาพสูงสุดของน้ำมันหอมระเหย origanum กำหนด ด้วย 2.5% glutaraldehyde ใน 0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH = 7.2) สำหรับ h 2 ที่อุณหภูมิห้อง พวกเขาถูกล้างสองครั้ง ทุกเวลาสำหรับ 10 นาที ในบัฟเฟอร์เดียวกัน หลังเบี ตัวอย่างถูกอบแห้งในชุดมีการจัดระดับเอทานอล (70%, 80%, 90% และสามครั้งที่ 100%) เป็นระยะเวลา 30 นาทีในแต่ละชุด ตัวอย่างถูกจุดสำคัญแห้งในเครื่องอบแห้ง (Polaron CPD 7501 สหราชอาณาจักร) ถึงจุดคับขันด้วย CO2 วัสดุถาวรถูกติดตั้งบนสตับใช้เทปสองหน้าคาร์บอน แล้วเคลือบ ด้วยทอง/พาลาเดียมในระบบ sputter coater ในการดูดสูงหอการค้า (Polaron SC7620, UK) สำหรับ 150 วินาทีที่ 9 มา ตัวอย่างได้กล่าวถึง และดิจิตอลภาพจับใช้เป็น JEOL JSM 5500 SEM ที่มีแรงดันไฟฟ้าปัจจุบัน 5 kV

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 ผลของน้ำมันหอมระเหยสัณฐาน hyphal
การกำหนดผลกระทบขั้นตอนการระเหยและการติดต่อของน้ำมันหอมระเหยสัณฐาน hyphal ได้อธิบายไว้ในก่อนหน้านี้เราศึกษา (Soylu et al., 2006) สำหรับความมุ่งมั่นของผลกระทบขั้นตอนการระเหยของน้ำมันหอมระเหยสัณฐาน hyphal เป็นแผ่นวุ้นเส้นใยจากวัฒนธรรมเก่า 7 วันวางครั้งแรกในใจกลางของแผ่นพีดีเอและบ่มที่อุณหภูมิ 20 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 2 วันเพื่อช่วยให้เส้นใยที่จะเติบโตเข้าสู่ กลาง หลังจากที่ 2 วันก่อนการบ่มความเข้มข้นที่แตกต่างกันของน้ำมันหอมระเหยที่ใช้ศึกษาในหลอดทดลองที่ถูกทิ้ง (บนปกจานเลี้ยงเชื้อ) ปิดผนึกโดย parafilm และบ่มที่อุณหภูมิ 20 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 วัน ความมุ่งมั่นของผลกระทบระยะติดต่อของน้ำมันหอมระเหยสัณฐาน hyphal ก็อธิบายว่าในกระดาษก่อนหน้านี้ ชั้นบาง ๆ (1 มิลลิเมตร) บล็อกวุ้น (3-4 cm2) ที่มีเส้นใยที่ถูกถอดออกในช่วงเวลาหนึ่งวันสำหรับการตรวจสอบโดยใช้กล้องจุลทรรศน์แสง บล็อกตัดจากขอบที่กำลังเติบโตอยู่ในหยดกลีเซอรีน 50% กระจกสไลด์กล้องจุลทรรศน์ปกคลุมด้วยใบฝาครอบแก้วและตรวจสอบโดยใช้ระยะทางตรงกันข้ามกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง (โอลิมปั BX51 โตเกียวประเทศญี่ปุ่น).
สำหรับการวิเคราะห์ SEM, hypha เชื้อราได้รับการประมวลผล ตามที่อธิบายไว้ก่อน (Soylu et al., 2006) แผ่นเส้นใย (1 เซนติเมตรเส้นผ่าศูนย์กลาง) สัมผัสกับความเข้มข้นที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดของน้ำมันหอมระเหย Origanum ได้รับการแก้ไขด้วย glutaraldehyde 2.5% ใน 0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH = 7.2) เป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง พวกเขาถูกล้างสองครั้งในแต่ละครั้งเป็นเวลา 10 นาทีในบัฟเฟอร์เดียวกัน หลังจากที่ตรึงตัวอย่างเป็นแห้งในซีรีส์เอทานอลอย่างช้า ๆ (70%, 80%, 90% และสามครั้งที่ 100%) เป็นระยะเวลา 30 นาทีในแต่ละชุด กลุ่มตัวอย่างที่ถูกจุดสำคัญแห้งในเครื่องอบแห้ง (โพลารอน CPD 7501 สหราชอาณาจักร) ขึ้นไปยังจุดที่สำคัญที่มี CO2 วัสดุที่ได้รับการแก้ไขเป็นที่ติดตั้งไม่สมบูรณ์นั้นใช้เทปคาร์บอนสองด้านและเคลือบด้วยทอง / แพลเลเดียมในระบบ Coater ปะทุในห้องสูงสูญญากาศ (โพลารอน SC7620 สหราชอาณาจักร) 150 วินาทีที่ 9 มิลลิแอมป์ กลุ่มตัวอย่างที่ได้รับการตรวจสอบและจับภาพดิจิตอลโดยใช้ JEOL JSM 5500 SEM ที่แรงดันเร่ง 5 กิโลโวลต์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 ผลของน้ำมันหอมระเหยในการกำหนดลักษณะของเส้นใยและติดต่อเฟส
ระเหยผลของน้ำมันหอมระเหยในลักษณะเป็นเส้นใยที่อธิบายไว้ในการศึกษาก่อนหน้านี้ ( soylu et al . , 2006 ) สำหรับการวิเคราะห์ผลระยะระเหยของน้ำมันหอมระเหยในเส้นใยสัณฐานวิทยาเป็นเส้นใยอาหารจากวัฒนธรรมอายุ 7 แผ่นแรกอยู่ในศูนย์กลางของจาน PDA บ่มที่ 20 ° C เป็นเวลา 2 วันเพื่อให้เจริญเติบโตในระดับปานกลาง หลังจาก 2 วันก่อนระยะเวลาระดับความเข้มข้นของน้ำมันหอมระเหยที่ใช้ในหลอดทดลองได้ลดลง ( บนปกของจานเพาะเลี้ยง ) , ปิดผนึกโดยพาราฟิล์มบ่มที่ 20 ° C เป็นเวลา 3 วันการติดต่อระยะที่ผลของน้ำมันหอมระเหยในโครงสร้างเส้นใยเป็นตามที่อธิบายไว้ในกระดาษก่อน ชั้นบาง ( 1 มิลลิเมตร ) วุ้นบล็อก ( 3 – 4 cm2 ) ประกอบด้วยเส้นใยถูกถอดออกในช่วงหนึ่งวันสำหรับการตรวจสอบด้วยกล้องจุลทรรศน์แสง บล็อกจากการตัดขอบ ถูกวางอยู่ในลดลง 50% กลีเซอรอลบนกระจกสไลด์กล้องจุลทรรศน์ปกคลุมด้วยฝาครอบแก้วลื่นและตรวจสอบการใช้ระยะความคมชัด แสงกล้องจุลทรรศน์ ( ญี่ปุ่นโอลิมปัส bx51 , โตเกียว , ) .
สำหรับการวิเคราะห์ SEM , ราไฮฟาถูกประมวลผลตามที่อธิบายไว้ก่อน ( soylu et al . , 2006 ) มีแผ่น ( 1 เซนติเมตร ) ที่มีความเข้มข้นที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดของ Origanum น้ำมันหอมระเหยคงที่ 2.5% glutaraldehyde ใน 0.1M ด้วยฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH = 72 ) สําหรับ 2 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง พวกเขาล้างสองครั้ง แต่ละครั้งเป็นเวลา 10 นาที ในบัฟเฟอร์เดียวกัน หลังจากการดอง ตัวอย่าง ( อบแห้งในระดับเอทานอลซีรีส์ ( 70% , 80% , 90% และ 100% สามครั้ง ) เป็นเวลา 30 นาทีในแต่ละชุด จำนวนจุดวิกฤติแห้งในเครื่องอบแห้ง ( ปฏิยานุพันธ์ CPD 7501 , UK ) ถึงจุดวิกฤต กับ CO2กำหนดวัสดุติดตั้งแล้วบนตอใช้สองหน้า เทปคาร์บอน และเคลือบด้วยทอง / แพลเลเดียมในละล่ำละลักเครื่องเคลือบระบบในห้องสูญญากาศสูง ( ปฏิยานุพันธ์ sc7620 , UK ) 150 วินาทีที่ 9 มา ทำการตรวจสอบและภาพดิจิตอลจับใช้จอล JSM 5500 SEM ที่เร่งแรงดัน 5 KV .