ProteolysisProteolysis in cheese sa

Proteolysis
Proteolysis in cheese samples was assessed at 60-d intervals during ripening using HPLC, following the procedure detailed by Hickey et al. (2006) and modi- fied by Rulikowska et al. (2013). Five grams of cheese was homogenized in 20 mL of 0.1 M citrate buffer at pH 3.6 at 40°C for 1 h to separate the fat. The whole suspension was centrifuged at 3,000 × g for 30 min at 4°C. The resulting pellet (100 mg) was dissociated in 5 mL of disassociating solution and held in a water bath at 40°C for 1 h with periodic mixing. This mixture was then centrifuged at 20,000 × g for 10 min at room tem- perature and filtered through a nylon 0.45-mm syringe filter. An aliquot of 20 mL was injected into a Shimadzu liquid chromatograph (LC-10 AT VP series; Shimadzu Corp., Kyoto, Japan) with a UV-visible detector at 214 nm (Shimadzu Corp.). Separation was achieved using a gradient of 2 mobile phases: (A) 90% water and 10% acetonitrile with 0.1% trifluoroacetic acid and (B) 90% acetonitrile and 10% water with 0.1% trifluoroacetic acid at a flow rate of 0.8 mL/min. The gradient was 75% A for 12 min, reduced to 51% A over 31 min, a fur- ther reduction to 20% A over the next 13 min, held at 20% A for another 3 min, and then an increase to 75% A over 3 min and held at this concentration for a further 2 min; the total run time was 54 min. The column was a C4 Jupiter 5 mm 300 A column (Shimadzu Corp.).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

proteolysis
proteolysis ในตัวอย่างชีสได้รับการประเมินในช่วงเวลา 60-D ระหว่างการสุกโดยใช้วิธี HPLC ตามขั้นตอนรายละเอียดโดย Hickey, et al (2006) และดัดแปลงโดย Rulikowska et al, (2013) ห้ากรัมของชีสทำให้เป็นเนื้อเดียวกันใน 20 มลของบัฟเฟอร์ 0.1 M ซิเตรตที่ pH 3.6 ที่ 40 ° C เป็นเวลา 1 ชั่วโมงเพื่อแยกไขมัน ระงับทั้งหมดถูกหมุนเหวี่ยงที่ 3,000 ×กรัมเป็นเวลา 30 นาทีที่ 4 ° C ส่งผลให้เม็ด (100 มิลลิกรัม) คือการแยกตัวในขนาด 5 ml ของการแก้ปัญหา disassociating และจัดขึ้นในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 40 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมงกับระยะผสม ส่วนผสมนี้ถูกปั่นแล้ว 20,000 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาทีที่ห้องมีอุณหภูมิและกรองผ่านผ้าไนล่อน 0.45 มมกรองเข็มฉีดยา หาร 20 มิลลิลิตรฉีดเข้าไปใน chromatograph Shimadzu เหลว (LC-10 ในซีรีส์รองประธานฝ่าย; Shimadzu คอร์ป, เกียวโตญี่ปุ่น) ด้วยเครื่องตรวจจับรังสียูวีที่สามารถมองเห็นได้ 214 นาโนเมตร (Shimadzu คอร์ป) แยกก็ประสบความสำเร็จโดยใช้การไล่ระดับสี 2 ขั้นตอนมือถือ: (A) น้ำ 90% และ acetonitrile 10% ด้วยกรด TRIFLUOROACETIC 0.1% และ (ข) acetonitrile 90% และน้ำ 10% ด้วยกรด TRIFLUOROACETIC 0.1% ที่อัตราการไหล 0.8 มิลลิลิตร / นาที การไล่ระดับสีเป็น 75% เป็นเวลา 12 นาทีลดลงถึง 51% ในช่วง 31 นาทีลด fur- Ther ไป 20% ในอีก 13 นาทีซึ่งจัดขึ้นที่ 20% อีก 3 นาทีและจากนั้นเพิ่มขึ้นถึง 75 % ในช่วง 3 นาทีและจัดขึ้นที่ความเข้มข้นนี้ได้อีก 2 นาที; เวลาทำงานทั้งหมด 54 นาที คอลัมน์เป็น C4 ดาวพฤหัสบดี 5 มม 300 คอลัมน์ (Shimadzu คอร์ป)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โปรตีโ ลซิสโปรตีโ ลซิสในตัวอย่างเนยแข็งที่ได้รับในช่วงเวลา 60-d ระหว่างการสุกโดยใช้ HPLC , ทำตามขั้นตอนรายละเอียดโดย Hickey et al . ( 2006 ) และ Modi - fied โดย rulikowska et al . ( 2013 ) ห้ากรัมชีสมันบดใน 20 ml 0.1 M ซิเตรทบัฟเฟอร์ pH 3.6 ที่ 40 ° C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง เพื่อแยกไขมัน ช่วงล่างทั้งระดับที่ 3000 × G สำหรับ 30 นาทีที่อุณหภูมิ 4 องศา ส่งผลให้เม็ด ( 100 มก. ) คือทางใจใน 5 มิลลิลิตร สารละลาย disassociating และจัดขึ้นในอ่างน้ำที่ 40 ° C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง กับธาตุผสม ส่วนผสมนี้เป็นระดับที่ 20 , 000 × G สำหรับ 10 นาทีที่ห้องเต็ม - perature และกรองผ่านผ้าไนล่อน 0.45-mm เข็มตัวกรอง เป็นส่วนลงตัวของ 20 ml ฉีดเข้าไปในของเหลวโครมาโทกราฟี ( Shimadzu lc-10 ที่ VP ชุด ; Shimadzu คอร์ป , เกียวโต , ญี่ปุ่น ) กับ UV มองเห็นเครื่องที่ 214 นาโนเมตร ( Shimadzu Corp . ) แยกคือทำได้โดยการไล่สี 2 ระยะ มือถือ : ( ) 90% และ 10% ไนน้ำ 0.1 % กรดไตรฟลูออโรอะซิติกและ ( ข ) ไน 90% และ 10% น้ำกับ 0.1% กรดไตรฟลูออโรอะซิติก ที่อัตราการไหล 0.8 มิลลิลิตร / นาที การไล่ระดับสีเป็น 75% เป็นเวลา 12 นาที ลดลง 51 % มากกว่า 31 นาที , ขนสัตว์ - ชายลด 20% เป็นกว่า 13 นาทีต่อไป ที่จัดขึ้นที่ 20% ต่ออีก 3 นาที แล้วเพิ่มเป็น 75% กว่า 3 นาที และคณะนี้สมาธิสำหรับอีก 2 นาที ; เวลาวิ่งรวม 54 นาที คอลัมน์ คือ C4 ดาวพฤหัสบดี 5 มม. 300 คอลัมน์ ( Shimadzu Corp . )