5.9. Cell death typing using inhibi

5.9. Cell death typing using inhibitors or knockdown strategies
A standard approach for identifying the cell death pathway
involved is using pharmacologic inhibitors and knockdown of
important nodes in apoptotic or necrotic signaling. Inhibitors are
often used to indicate an underlying cell death mechanism. However,
the data obtained should be corroborated by knockdown
strategies to strengthen the conclusion. Typically, general caspase
inhibitors such as zVAD-fmk or qVDoph are used to block apoptosis
[65], while Necrostatin-1 is used to block RIPK1-mediated necroptosis
[27]. More recent findings, however, question the
exclusivity of the latter approach because the kinase activity of
RIPK1 can also induce apoptosis in some cellular conditions
[66,67]. Therefore, knockdown strategies are often more reliable
than inhibitor studies. On the one hand, frequently used targets
for knock down in apoptosis research are FADD, TRADD, caspase-
2 or -8 to monitor the intrinsic cell death pathway. Alternatively,
knockdown of Apaf-1, caspase-9, Bax, Bak or other BH3-only proteins
can reveal a mitochondrial contribution (extrinsic cell death
pathway) [61]. On the other hand, necroptotic cell death can be
blocked by knockdown of RIPK3 [61] or Mixed Lineage Kinase
Domain-like Protein MLKL [68].

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

5.9 การเซลล์ตายพิมพ์ใช้ inhibitors หรือกลยุทธ์ knockdownวิธีการมาตรฐานสำหรับการระบุทางเดินชีวิตของเซลล์เกี่ยวข้องกับการใช้ pharmacologic inhibitors และ knockdown ของโหนสำคัญใน apoptotic necrotic ตามปกติ Inhibitors มีมักใช้เพื่อบ่งชี้การอ้างอิงเซลล์ตายกลไก อย่างไรก็ตามข้อมูลที่ได้ควรจะ corroborated โดย knockdownกลยุทธ์เพื่อเสริมสร้างข้อสรุป โดยปกติ caspase ทั่วไปใช้บล็อก apoptosis inhibitors เช่น zVAD fmk หรือ qVDoph[65], ในขณะที่ใช้บล็อก RIPK1 mediated necroptosis Necrostatin-1[27] การค้นพบล่าสุด อย่างไรก็ตาม คำถามความพิเศษของวิธีหลังเพราะกิจกรรม kinase ของRIPK1 ยังสามารถก่อให้เกิด apoptosis ในบางเซล[66,67] . ดังนั้น knockdown กลยุทธ์มักเพิ่มเติมความน่าเชื่อถือกว่าการศึกษาผลการ ใช้เป้าหมายคงเคาะลงวิจัย apoptosis จะ caspase FADD, TRADD -2 หรือ-8 เพื่อตรวจสอบทางเดินตายเซลล์ intrinsic หรือknockdown ของ Apaf-1, caspase-9, Bax บัค หรือโปรตีนอื่น ๆ BH3 เดียวสามารถแสดงส่วน mitochondrial (ตายเซลล์ที่สึกหรอทางเดิน) [61] บนมืออื่น ๆ necroptotic เซลล์ตายได้โดย knockdown ของ RIPK3 [61] หรือผสมลินเนจ Kinaseโปรตีนโดเมนเช่น MLKL [68]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

5.9 การตายของเซลล์ในการพิมพ์โดยใช้สารยับยั้งหรือกลยุทธ์ล้มลง
วิธีการมาตรฐานสำหรับการระบุทางเดินการตายของเซลล์
ที่เกี่ยวข้องกับการใช้สารยับยั้งยาและล้มลงของ
โหนดที่สำคัญในการส่งสัญญาณที่เกิด apoptosis หรือตาย ยับยั้งจะ
มักจะใช้เพื่อระบุกลไกการตายของเซลล์ต้นแบบ อย่างไรก็ตาม
ข้อมูลที่ได้ควรจะยืนยันโดยล้มลง
กลยุทธ์เพื่อเสริมสร้างข้อสรุป โดยปกติทั่วไป caspase
ยับยั้งเช่น zVAD-FMK หรือ qVDoph ถูกนำมาใช้เพื่อป้องกันการตาย
[65] ในขณะที่ Necrostatin-1 จะใช้เพื่อป้องกัน necroptosis RIPK1 พึ่ง
[27] ผลการวิจัยล่าสุดมากขึ้น แต่ถาม
ความพิเศษของแนวทางหลังเพราะกิจกรรมของไคเนส
RIPK1 ยังสามารถเหนี่ยวนำให้เกิดการตายในสภาพของเซลล์บาง
[66.67] ดังนั้นกลยุทธ์ล้มลงมักจะเชื่อถือได้มากขึ้น
กว่าที่ยับยั้งการศึกษา ในมือข้างหนึ่งเป้าหมายที่ใช้บ่อย
สำหรับเคาะลงในการวิจัยการตายเป็น Fadd, Tradd, caspase-
2 หรือ -8 ในการตรวจสอบเส้นทางการตายของเซลล์ที่แท้จริง อีกทางเลือกหนึ่ง
ล้มลงของ Apaf-1, caspase-9, แบ็กซ์, บากหรืออื่น ๆ โปรตีน BH3 เท่านั้น
สามารถที่จะเปิดเผยการมีส่วนร่วมยล (การตายของเซลล์ภายนอก
ทางเดิน) [61] ในทางตรงกันข้าม, การตายของเซลล์ necroptotic สามารถ
บล็อกโดยล้มลงของ RIPK3 [61] หรือผสม Lineage ไคเนส
โดเมนเหมือนโปรตีน MLKL [68]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

5.9 . การใช้สารยับยั้งการตายของเซลล์พิมพ์หรือกลยุทธ์
knockdown วิธีการมาตรฐานเพื่อระบุเซลล์ตายทางเดิน
เกี่ยวข้องใช้ยาการน็อคของโหนดที่สำคัญและในกลุ่มที่มีอาการ
หรือส่งสัญญาณ สารยับยั้ง
มักจะใช้เพื่อบ่งชี้ถึงกลไกการตายของเซลล์ . อย่างไรก็ตาม ข้อมูลที่ได้มาควรจะยืนยัน

โดยน็อคดาวน์กลยุทธ์เพื่อสร้างข้อสรุป โดยปกติ การแคสเปส
ทั่วไป เช่น zvad fmk หรือ qvdoph ใช้บล็อก (
[ 65 ] ในขณะที่ necrostatin-1 ใช้บล็อกเพื่อ ripk1 necroptosis
[ 27 ] ล่าสุดที่ค้นพบ แต่คำถาม
การผูกขาดของแนวทางหลังเพราะไคเนสกิจกรรม
ripk1 ยังสามารถทำให้เกิดการตายในบางเงื่อนไข 66,67
[ โทรศัพท์มือถือ ] ดังนั้นกลยุทธ์ น็อคมักจะเชื่อถือได้มากขึ้น
กว่า ซึ่งศึกษา ในมือข้างหนึ่งที่ใช้บ่อยสำหรับการเคาะลงในเป้าหมาย
การวิจัย apoptosis จะ fadd tradd แคสเปส - , ,
2 หรือ 8 ตรวจสอบภายในเซลล์ตายเดิน อีกทางเลือกหนึ่งของ apaf-1 caspase-9
knockdown , bax บาค , หรืออื่น ๆ bh3 เพียงโปรตีน
สามารถเปิดเผยการบริจาค ( ภายนอกเซลล์ตาย
) ) [ 61 ]บนมืออื่น ๆ , การตายของเซลล์ necroptotic สามารถ
บล็อกโดยน็อคของ ripk3 [ 61 ] หรือผสมสายเลือด kinase
โดเมนเหมือนโปรตีน mlkl [ 68 ]