A reusable carrier for enzyme immob

A reusable carrier for enzyme immobilization consisting of magnetic Fe3O4 nanoparticles coated with a layer of gold nanoparticles (AuNPs) has been demonstrated. The gold nanoparticles served as an intermediate ligand on which trypsin was reversibly immobilized. This immobilized trypsin reactor was used for the digestion of standard proteins that was achieved within 15 min. After digestion, the trypsin-loaded nanoparticles were recovered from the reaction mixture using a magnet. The peptides in digest were then determined using HPLC and MALDI-TOF mass spectrometry. Sequence coverages of 93.8%, 90.9%, and 54.1% were observed for myoglobin, cytochrome c, and bovine serum albumin, respectively. Our newly designed AuNP@Fe3O4 enzymatic nanosystem enabled significant acceleration of the enzyme catalyzed reaction. We also observed a higher efficiency compared with in-solution digestion using free trypsin, and with reactors produced using conventional immobilization techniques such as electrostatic interaction, covalent bonding, and formation of metal chelate complexes. Furthermore, the use of gold nanoparticles as the intermediate ligand enabled regeneration of the enzyme and recovery of the activity in our system simply by stripping the inactive trypsin from the gold nanoparticles using sodium borohydride followed by the immobilization of fresh trypsin.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผู้ประกอบการขนส่งสำหรับตรึงโปเอนไซม์ที่ประกอบด้วยเก็บกัก Fe3O4 เหล็กที่เคลือบ ด้วยชั้นของทองเก็บกัก (AuNPs) ได้ถูกสาธิต เก็บกักทองเสิร์ฟเป็นลิแกนด์กลางที่ทริปซินเป็น reversibly หา เครื่องปฏิกรณ์เอนไซม์ทริปซินนี้ถูกใช้สำหรับการย่อยอาหารของโปรตีนมาตรฐานที่สำเร็จภายใน 15 นาที หลังจากย่อยอาหาร เก็บกักโหลดทริปซินถูกกู้คืนมาจากส่วนผสมของปฏิกิริยาที่ใช้แม่เหล็ก เปปไทด์ในย่อยได้แล้วกำหนดใช้ HPLC และ MALDI TOF รเมท ลำดับคลุม 93.8%, 90.9% และ 54.1 สา%ถูกสังเกตไมโยโกลบิน cytochrome c และวัว serum albumin ตามลำดับ เราออกแบบใหม่ AuNP@Fe3O4 เอนไซม์ในระบบ nanosystem เปิดเร่งสำคัญของปฏิกิริยาเอนไซม์กระบวน นอกจากนี้เรายังสังเกตประสิทธิภาพที่สูงขึ้นเมื่อเทียบ กับการย่อยอาหารในโซลูชันที่ใช้ทริปซินฟรี และเตาปฏิกรณ์ผลิตโดยใช้เทคนิคการตรึงโปทั่วไปเช่นงานโต้ตอบ ยึด covalent และก่อตัวของโลหะแอซิดคอมเพล็กซ์ นอกจากนี้ ใช้เก็บกักทองเป็นลิแกนด์กลางใช้งานฟื้นฟูของเอนไซม์นี้และกู้คืนข้อมูลของกิจกรรมในระบบของเราก็ปอกทริปซินงานจากเก็บกักทองที่ใช้โซเดียม borohydride ตามตรึงโปทริปซินสด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ผู้ให้บริการนำมาใช้ใหม่สำหรับการตรึงเอนไซม์ที่ประกอบด้วยอนุภาคนาโน Fe3O4 แม่เหล็กเคลือบด้วยชั้นของอนุภาคนาโนทองคำ (AuNPs) ได้รับการแสดงให้เห็นถึง อนุภาคนาโนทองทำหน้าที่เป็นแกนด์กลางที่ trypsin ถูกตรึงพลิกกลับ เครื่องปฏิกรณ์ตรึง trypsin นี้ถูกนำมาใช้สำหรับการย่อยอาหารของโปรตีนมาตรฐานที่ได้รับการประสบความสำเร็จภายใน 15 นาที หลังจากการย่อยอาหารที่อนุภาคนาโนโหลด trypsin ถูกกู้คืนจากการผสมปฏิกิริยาโดยใช้แม่เหล็ก เปปไทด์ในการแยกย่อยได้รับการพิจารณาแล้วใช้ HPLC และ MALDI-TOF มวลสาร คุ้มครองลำดับของ 93.8%, 90.9% และ 54.1% ถูกตั้งข้อสังเกตสำหรับ myoglobin ค cytochrome และซีรั่มอัลบูมิวัวตามลำดับ ได้รับการออกแบบใหม่ของเรา AuNP @ Fe3O4 เอนไซม์ nanosystem เร่งเปิดใช้งานอย่างมีนัยสำคัญของเอนไซม์เป็นตัวเร่งปฏิกิริยา นอกจากนี้เรายังตั้งข้อสังเกตที่มีประสิทธิภาพสูงขึ้นเมื่อเทียบกับการย่อยอาหารในการแก้ปัญหาโดยใช้ trypsin ฟรีและมีเครื่องปฏิกรณ์ผลิตโดยใช้เทคนิคการตรึงธรรมดาเช่นการมีปฏิสัมพันธ์ไฟฟ้าสถิตพันธะโควาเลนต์และการก่อตัวของคีเลตเชิงซ้อนโลหะ นอกจากนี้การใช้อนุภาคนาโนทองเป็นแกนด์กลางฟื้นฟูเปิดใช้งานของเอนไซม์และการฟื้นตัวของกิจกรรมในระบบของเราได้ง่ายๆโดยการลอก trypsin ใช้งานจากอนุภาคนาโนทองคำโดยใช้โซเดียม borohydride ตามด้วยการตรึงของ trypsin สด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผู้ให้บริการที่ใช้สำหรับการตรึงเอนไซม์ที่ประกอบด้วยอนุภาคนาโน fe3o4 แม่เหล็กเคลือบด้วยชั้นของอนุภาคทองระดับนาโนเมตร ( aunps ) ได้แสดงให้เห็นถึง อนุภาคนาโนของทองในฐานะที่เป็นระบบกลางที่เป็นเอนไซม์ซึ่งพลิกกลับได้เคลื่อนไหว นี้เป็นเครื่องปฏิกรณ์ตรึงเอนไซม์ที่ใช้ย่อยโปรตีนที่เป็นมาตรฐานได้ภายใน 15 นาที หลังจากการย่อยการเปลี่ยนแปลงโหลดนาโนหายจากปฏิกิริยาผสมใช้แม่เหล็ก และ เปปไทด์ ในย่อยแล้วหาได้โดยใช้ HPLC และ maldi-tof แมสสเปกโทรเมตรี ลำดับคลุมของที่เกี่ยวกับร้อยละ 90.9 ร้อยละ 54.1 % และพบไมโอโกลบินมั่มสำหรับ , และอัลบูมิน ตามลำดับเราออกแบบใหม่ aunp @ fe3o4 nanosystem ใช้เอนไซม์เร่งที่สำคัญของเอนไซม์เร่งปฏิกิริยา นอกจากนี้เรายังสังเกตประสิทธิภาพสูงเมื่อเทียบกับการใช้เอนไซม์ในการย่อยโซลูชั่นฟรีและเครื่องปฏิกรณ์ผลิตโดยใช้เทคนิคการผลิตปกติเช่นปฏิสัมพันธ์ไฟฟ้าสถิตไชยทัต และการก่อตัวของสารประกอบเชิงซ้อน ชุบโลหะ นอกจากนี้การใช้อนุภาคนาโนของทองเป็นลิแกนด์กลางเปิดใช้งานใหม่ของเอนไซม์และการฟื้นตัวของกิจกรรมในระบบของเราโดยเพียงแค่การปอกทริปงานจากอนุภาคนาโนของทองที่ใช้โซเดียมบอโรไฮไดรด์ตามด้วยการตรึงเอนไซม์สด