2.3. Culturing and treatment of SNO

2.3. Culturing and treatment of SNO cells
For the culturing of the SNO cells, the following materials were
used. The Dulbecco’s modified Eagles medium (DMEM) was
prepared by using MilliQ water (18 MX cm), Hank’s balanced salt
solution (HBSS), foetal calf serum (FCS), trypsin/versene, penicillin/
streptomycin/fungizone mixture and gentamycin were all
purchased from Highveld Biologicals (Lyndhurst, South Africa).
All the materials, including sterile pipettes, centrifuge tubes, culturing
flasks (75 cm3, 3 cm3) and 96-well plates were purchased
from Corning Incorporated.
All materials used for the biological treatment of the cells were
required to be at a temperature of 37 C. The DMEM, HBSS and
trypsin/versene were all placed in the thermostated water bath
at 37 C before the experiments were commenced. The SNO cancer
cell line (ATCC, Cat No CCL-185) was derived from a cell carcinoma
that originated from an indigenous black African male from South
Africa [21]. The cells were explanted and cultured into the cell line.
The SNO cells were cultured in a flask (75 cm3) in an incubator
(Thermo Scientific HERAcell 150i CO2 incubator) at 37 C, using
DMEM (25 mM glucose, 1 mM sodium pyruvate and 6 mM
glutamine) media which was supplemented with 20% FCS, 1.6%
pencillin/streptomycin/fungizone mixture and 0.4% gentamycin.
When the cells adhered to the flask and reached full confluency,
the spent media was discarded and the cells washed twice with
HBSS (10 cm3). Following the washing step, the cells were lifted
with trypsin (7 cm3) for 7 min in the incubator. The trypsin was
inactivated by the addition of DMEM media, which after the cells
were pelleted and collected using centrifugation (Thermo Scientific
Heraeus Biofuge Primo R centrifuge) at 2200 rpm (634g) for 4 min.
The pellet was resuspended in DMEM media (5 cm3) and the concentration
of the cells was determined using a Trypan Blue dye
(Invitrogen, Oregon, USA) and a TC10TM Automated cell counter
(Biorad, Hercules, CA). The silver(I) complex solutions were heated
in a Labnet International Accu BlockTM digital dry bath at 70 C an
hour prior to treatment.
A cell concentration of 2 105 cell/cm3 were seeded in petri
dishes (3 cm3) and allowed to adhere for 24 h at 37 C using a
humidity of 5% CO2. The following day, the old media was discarded
and the cells were treated with complexes 1 and 2, using
a final concentration of 10 lM. This concentration was achieved
by the preparation of 1 mM stock solution of the silver(I) complexes
in culture grade DMSO. The complexes’ stock solution
(10 lL from the 1 mM) was added to the media, to give a final concentration
of 10 lM in 1 mL of treatment media, with 1% DMSO.
The cells were incubated for 24 h at 37 C in a 5% CO2 environment.
The control treatments include; untreated control, vehicle control
(cells treated with 1% DMSO), apoptotic control (100 lM cisplatin)
and necrotic control (5% H2O2). The % viability of the cells after
treatment was determined by the alamarBlue viability assay. This
assay involves a 100 lL suspension of treated cells in triplicate in a
96-well plate. The alamarBlue dye (10 lL) was added in the
absence of light, followed by an incubation for 2–3 h at 37 C and
5% CO2 humidity. The fluorescence of the samples were measured
using a Synergy HT Multi-Detection Microplate reader at an excitation
and emission wavelengths of k 530 nm and k 590 nm, respectively.
The % viability was determined based on the fluorescence of
the untreated control.
3. Results and discussion
3.1. Synthesis of the complexes
The synthesis of silver(I) benzyldiphenylphosphine complexes
is typically done in a solvent such as acetonitrile. The reaction
requires the dissolution of the phosphine ligand in acetonitrile
and upon the addition of the silver thiocyanate; the mixture is
heated under reflux until all solids dissolved. This method can be
used to synthesise the 1:2 M ratio product. Using equimolar
amounts of silver salt and phosphine ligand will result in partially
dissolved silver salt, resulting in the formation of mixed products.
The synthesis of the 1:1 M ratio product requires a mixture of
pyridine and acetonitrile (1:20) in order to dissolve the silver salt.
Unfortunately only the synthesis of the 1:2 product yielded
suitable crystals for single crystal X-ray diffraction analysis. The
synthesis of complex 2 resulted in an acetonitrile solvate product,
which has been confirmed with FTIR, NMR and single crystal X-ray
diffraction.
The shift in the FTIR absorbance peak of the SCN anion indicates
the complex formation. Upon coordination of the ligand to the

2.3. Culturing and treatment of SNO cells
For the culturing of the SNO cells, the following materials were
used. The Dulbecco’s modified Eagles medium (DMEM) was
prepared by using MilliQ water (18 MX cm), Hank’s balanced salt
solution (HBSS), foetal calf serum (FCS), trypsin/versene, penicillin/
streptomycin/fungizone mixture and gentamycin were all
purchased from Highveld Biologicals (Lyndhurst, South Africa).
All the materials, including sterile pipettes, centrifuge tubes, culturing
flasks (75 cm3, 3 cm3) and 96-well plates were purchased
from Corning Incorporated.
All materials used for the biological treatment of the cells were
required to be at a temperature of 37 C. The DMEM, HBSS and
trypsin/versene were all placed in the thermostated water bath
at 37 C before the experiments were commenced. The SNO cancer
cell line (ATCC, Cat No CCL-185) was derived from a cell carcinoma
that originated from an indigenous black African male from South
Africa [21]. The cells were explanted and cultured into the cell line.
The SNO cells were cultured in a flask (75 cm3) in an incubator
(Thermo Scientific HERAcell 150i CO2 incubator) at 37 C, using
DMEM (25 mM glucose, 1 mM sodium pyruvate and 6 mM
glutamine) media which was supplemented with 20% FCS, 1.6%
pencillin/streptomycin/fungizone mixture and 0.4% gentamycin.
When the cells adhered to the flask and reached full confluency,
the spent media was discarded and the cells washed twice with
HBSS (10 cm3). Following the washing step, the cells were lifted
with trypsin (7 cm3) for 7 min in the incubator. The trypsin was
inactivated by the addition of DMEM media, which after the cells
were pelleted and collected using centrifugation (Thermo Scientific
Heraeus Biofuge Primo R centrifuge) at 2200 rpm (634g) for 4 min.
The pellet was resuspended in DMEM media (5 cm3) and the concentration
of the cells was determined using a Trypan Blue dye
(Invitrogen, Oregon, USA) and a TC10TM Automated cell counter
(Biorad, Hercules, CA). The silver(I) complex solutions were heated
in a Labnet International Accu BlockTM digital dry bath at 70 C an
hour prior to treatment.
A cell concentration of 2  105 cell/cm3 were seeded in petri
dishes (3 cm3) and allowed to adhere for 24 h at 37 C using a
humidity of 5% CO2. The following day, the old media was discarded
and the cells were treated with complexes 1 and 2, using
a final concentration of 10 lM. This concentration was achieved
by the preparation of 1 mM stock solution of the silver(I) complexes
in culture grade DMSO. The complexes’ stock solution
(10 lL from the 1 mM) was added to the media, to give a final concentration
of 10 lM in 1 mL of treatment media, with 1% DMSO.
The cells were incubated for 24 h at 37 C in a 5% CO2 environment.
The control treatments include; untreated control, vehicle control
(cells treated with 1% DMSO), apoptotic control (100 lM cisplatin)
and necrotic control (5% H2O2). The % viability of the cells after
treatment was determined by the alamarBlue viability assay. This
assay involves a 100 lL suspension of treated cells in triplicate in a
96-well plate. The alamarBlue dye (10 lL) was added in the
absence of light, followed by an incubation for 2–3 h at 37 C and
5% CO2 humidity. The fluorescence of the samples were measured
using a Synergy HT Multi-Detection Microplate reader at an excitation
and emission wavelengths of k 530 nm and k 590 nm, respectively.
The % viability was determined based on the fluorescence of
the untreated control.
3. Results and discussion
3.1. Synthesis of the complexes
The synthesis of silver(I) benzyldiphenylphosphine complexes
is typically done in a solvent such as acetonitrile. The reaction
requires the dissolution of the phosphine ligand in acetonitrile
and upon the addition of the silver thiocyanate; the mixture is
heated under reflux until all solids dissolved. This method can be
used to synthesise the 1:2 M ratio product. Using equimolar
amounts of silver salt and phosphine ligand will result in partially
dissolved silver salt, resulting in the formation of mixed products.
The synthesis of the 1:1 M ratio product requires a mixture of
pyridine and acetonitrile (1:20) in order to dissolve the silver salt.
Unfortunately only the synthesis of the 1:2 product yielded
suitable crystals for single crystal X-ray diffraction analysis. The
synthesis of complex 2 resulted in an acetonitrile solvate product,
which has been confirmed with FTIR, NMR and single crystal X-ray
diffraction.
The shift in the FTIR absorbance peak of the SCN anion indicates
the complex formation. Upon coordination of the ligand to the

0/5000

จาก: -

เป็น: -

ผลลัพธ์ (ไทย) 1: [สำเนา]

คัดลอก!

2.3. นำไปเลี้ยง และรักษาเซลล์ SNOสำหรับนำไปเลี้ยงเซลล์ SNO วัสดุต่อไปนี้ถูกใช้ แก้ไข Dulbecco การแก้ไข Eagles ปานกลาง (DMEM)เตรียม โดยใช้น้ำ MilliQ (18 MX ซม.), สมดุลเกลือของแฮงค์โซลูชัน (HBSS) ยาเพนนิซิลลิน เซรั่มบ่อย ๆ น่อง (FCS), ทริปซิ น/versene /gentamycin และ streptomycin/fungizone ส่วนผสมทั้งหมดซื้อจาก Biologicals Highveld (โรงแรมโฮล์ม แอฟริกาใต้)วัสดุทั้งหมด รวมทั้งปิเปตปลอดเชื้อ เครื่องหมุนเหวี่ยงหลอด นำไปเลี้ยงซื้อขวด (75 cm3, 3 cm3) และแผ่น 96 หลุมจาก Corning รวมวัสดุที่ใช้สำหรับการรักษาทางชีวภาพของเซลล์ทั้งหมดได้จำเป็นต้องที่อุณหภูมิ 37 c DMEM, HBSS และทริปซิ น/versene ทั้งหมดถูกวางในอ่างน้ำควบคุมอุณหภูมิที่ 37 C ก่อนการทดลองได้เริ่มขึ้น มะเร็ง SNOสายเซลล์ (ATCC แมวไม่ใช่ CCL-185) ได้มาจากเซลล์ร้ายที่มาจากการชนดำแอฟริกาชายจากใต้แอฟริกา [21] เซลล์ explanted และล้างบรรทัดเซลล์เซลล์ SNO ถูกล้างในขวดแก้ว (75 cm3) ในตู้อบที่(ตู้อบเทอร์โม HERAcell วิทยาศาสตร์ 150i CO2) ที่ 37 C ใช้DMEM (กลูโคส 25 มม. pyruvate โซเดียม 1 มม. และ 6 มม.สื่อ glutamine) ซึ่งถูกเสริม ด้วย 20% FCS, 1.6%gentamycin ผสมและ 0.4% pencillin/streptomycin/fungizoneเมื่อปฏิบัติตามนั้นแตก และเซลล์ถึง confluency ฉบับสมบูรณ์ใช้สื่อได้ถูกละทิ้ง และเซลล์ล้างสองครั้งด้วยHBSS (10 cm3) ต่อไปนี้ขั้นตอนการซักผ้า เซลล์ถูกยกเลิกกับทริปซิน (7 cm3) สำหรับในตู้อบ 7 นาที ทริปซินถูกยก โดยสื่อ DMEM ซึ่งหลังจากเซลล์มีสัตว์ และเก็บรวบรวมใช้หมุนเหวี่ยง (วิทยาศาสตร์เทอร์โมหมุนเหวี่ยงก๊าซ Biofuge Primo R) ที่ 2200 rpm (634 กรัม) 4 นาทีเม็ดถูก resuspended ใน DMEM สื่อ (5 cm3) และความเข้มข้นของเซลล์ที่กำหนดโดยใช้สี Trypan Blue(Invitrogen โอเรกอน สหรัฐอเมริกา) และเคาน์เตอร์เซลล์อัตโนมัติ TC10TM(Biorad เฮอร์คิวลิส CA) การแก้ปัญหาที่ซับซ้อน silver(I) ถูกทำให้ร้อนใน Labnet ประเทศ Accu BlockTM ดิจิตอลแห้งอ่างที่ 70 C เป็นชั่วโมงก่อนการรักษาความเข้มข้นของเซลล์ 2 105 เซลล์/cm3 ถูกเตรียมในการเพาะอาหาร (3 cm3) และอนุญาตให้การยึดเกาะสำหรับ 24 ชั่วโมงที่ 37 C ใช้เป็นความชื้น 5% CO2 วัน สื่อเก่าถูกละทิ้งและเซลล์ได้รับการรักษา ด้วยคอมเพล็กซ์ 1 และ 2 การใช้ความเข้มข้นสุดท้าย 10 lM ความเข้มข้นนี้สำเร็จโดยเตรียมของหุ้น 1 มม.ของคอมเพล็กซ์ silver(I)ในวัฒนธรรมระดับ DMSO แก้ไขปัญหาสต็อกของคอมเพล็กซ์(10 lL จาก 1 มิลลิเมตร) ถูกเพิ่มไปยังสื่อ การให้ความเข้มข้นสุดท้าย10 lM ในรักษาสื่อ กับ 1% DMSO 1 mLเซลล์ได้รับการกกสำหรับ 24 ชั่วโมงที่ 37 C ในสภาพแวดล้อม 5% CO2การรักษาควบคุมรวม ได้รับการรักษาควบคุม ควบคุมยานพาหนะควบคุม apoptotic (เซลล์รักษา ด้วย 1% DMSO), (100 lM cisplatin)และควบคุม necrotic (5% H2O2) ชีวิต%ของเซลล์หลังรักษาถูกกำหนด โดยการทดสอบศักยภาพ alamarBlue นี้ทดสอบเกี่ยวข้องกับการระงับจะ 100 เซลล์บำบัดลข้อในการแผ่น 96 หลุม สีย้อม alamarBlue (10 lL) ในการขาดของแสง ตาม ด้วยการบ่มสำหรับ 2 – 3 ชั่วโมงที่ 37 C และความชื้น 5% CO2 ถูกวัดการเรืองแสงของตัวอย่างใช้อ่าน Microplate ตรวจจับหลาย HT Synergy ที่กระตุ้นการและปล่อยความยาวคลื่นของ k 530 nm และ k 590 nm ตามลำดับกำหนดในเชิง%อิงเรืองแสงของตัวควบคุมที่ได้รับการรักษา3. ผล และการอภิปราย3.1. การสังเคราะห์ของคอมเพล็กซ์การสังเคราะห์ silver(I) benzyldiphenylphosphine คอมเพล็กซ์โดยทั่วไปในตัวทำละลายเช่น acetonitrile การเกิดปฏิกิริยาต้องมีการสลายตัวของลิแกนด์ phosphine ใน acetonitrileและ เมื่อเพิ่ม thiocyanate เงิน ส่วนผสมความร้อนภายใต้ไหลย้อนจนของแข็งทั้งหมดละลาย วิธีนี้สามารถใช้ในการ synthesise สินค้าอัตราส่วน 1:2 M ใช้ equimolarจำนวนเงินเกลือและ phosphine ลิแกนด์จะมีผลบางส่วนละลายเกลือเงิน ส่งผลให้การก่อตัวของผลิตภัณฑ์ผสมการสังเคราะห์ของผลิตภัณฑ์อัตราส่วน 1:1 เมตรต้องใช้ส่วนผสมของpyridine และ acetonitrile (1:20) เพื่อละลายเกลือเงินแต่เฉพาะการสังเคราะห์ผลิตภัณฑ์ 1:2 ผลผลึกที่เหมาะสมสำหรับคริสตัลวิเคราะห์การเลี้ยวเบนรังสีเอ็กซ์ การส่งผลให้การสังเคราะห์ซับซ้อน 2 ผลิตภัณฑ์การ solvate acetonitrileซึ่งได้รับการยืนยัน ด้วย FTIR, NMR และคริสตัล X-rayเลี้ยวเบนบ่งชี้ว่า การเปลี่ยนแปลงในจุดสูงสุดของค่า FTIR ของไอออน SCNการก่อตัวที่ซับซ้อน เมื่อมีการประสานงานของลิแกนด์ให้การ

การแปล กรุณารอสักครู่..

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:[สำเนา]

คัดลอก!

2.3 การเพาะเลี้ยงและการรักษาของเซลล์ SNO
สำหรับเพาะเลี้ยงเซลล์ SNO ที่วัสดุที่ถูก
นำมาใช้ ของ Dulbecco การแก้ไขอินทรีกลาง (DMEM) ถูก
จัดทำขึ้นโดยใช้ MilliQ น้ำ (18 MX เซนติเมตร) เกลือสมดุลของแฮงค์
วิธีการแก้ปัญหา (HBSS) ทารกในครรภ์ลูกวัวซีรั่ม (FCS) trypsin / versene, penicillin /
streptomycin / สารผสม fungizone และ Gentamycin ทุกคน
ซื้อ จาก Highveld Biologicals (เฮิร์สต, แอฟริกาใต้)
วัสดุทั้งหมดรวมทั้งปิเปตหมันหลอด centrifuge, เลี้ยง
ขวด (75 cm3 3 cm3) และแผ่น 96 หลุมที่ซื้อมา
จาก บริษัท Corning
วัสดุทั้งหมดที่ใช้สำหรับการรักษาทางชีวภาพของเซลล์ที่ถูก
ต้องเป็นที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส DMEM,
HBSS และ trypsin / versene ถูกวางไว้ทั้งหมดที่อยู่ในอ่างน้ำ thermostated
ที่ 37 องศาเซลเซียสก่อนการทดลองได้เริ่ม มะเร็ง SNO
เซลล์สาย (ATCC, แมวไม่มี CCL-185) ที่ได้มาจากเซลล์มะเร็ง
ที่เกิดจากชนพื้นเมืองแอฟริกันสีดำชายจาก South
Africa [21] เซลล์ถูก explanted และเพาะเลี้ยงในสายมือถือ
เซลล์ SNO เพาะเลี้ยงในขวด (75 cm3) ในศูนย์บ่มเพาะ
(Thermo Scientific HERAcell 150i CO2 ศูนย์บ่มเพาะ) ที่ 37 องศาเซลเซียสโดยใช้
DMEM (25 มิลลิเมตรกลูโคส 1 มิลลิไพรูโซเดียมและ 6 มิ
กลูตา) สื่อซึ่งได้รับการเสริมด้วย 20 FCS%, 1.6%
pencillin / streptomycin / สารผสม fungizone และ Gentamycin 0.4%
เมื่อเซลล์ยึดติดกับขวดและถึง confluency เต็มรูปแบบ
สื่อการใช้จ่ายที่ถูกทิ้งและเซลล์ล้างครั้งที่สองกับ
HBSS (10 cm3) ต่อไปนี้ขั้นตอนการซักผ้าเซลล์ถูกยก
ด้วย trypsin (7 cm3) เป็นเวลา 7 นาทีในศูนย์บ่มเพาะ trypsin ถูก
ยกเลิกโดยนอกเหนือจากสื่อ DMEM ซึ่งหลังจากที่เซลล์
ถูกเม็ดและเก็บรวบรวมโดยใช้การหมุนเหวี่ยง (Thermo Scientific
Heraeus Biofuge Primo R centrifuge) ที่ 2,200 รอบต่อนาที (634g) 4 นาที
เม็ดถูก resuspended ใน DMEM สื่อ (5 cm3) และความเข้มข้น
ของเซลล์ถูกกำหนดโดยใช้สีย้อม Trypan สีฟ้า
(Invitrogen, ออริกอนสหรัฐอเมริกา) และเคาน์เตอร์เซลล์ TC10TM อัตโนมัติ
(Biorad ดาว, CA)
เงิน (I) แก้ปัญหาที่ซับซ้อนถูกความร้อน ในห้องอาบน้ำแห้งดิจิตอล Labnet นานาชาติ Accu BlockTM ที่ 70 องศาเซลเซียส
ชั่วโมงก่อนที่จะมีการรักษา
ความเข้มข้นของเซลล์ 2? 105 เซลล์ / cm3 เมล็ดใน Petri
อาหาร (3 cm3) และได้รับอนุญาตให้เป็นไปตามเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสโดยใช้
ความชื้น 5% CO2 วันรุ่งขึ้นสื่อเก่า ๆ ได้ถูกทิ้ง
และเซลล์ได้รับการรักษาด้วยคอมเพล็กซ์ที่ 1 และ 2 โดยใช้
ความเข้มข้นสุดท้ายของ 10 LM ความเข้มข้นนี้ก็ประสบความสำเร็จ
จากการจัดทำ 1 มิลลิแก้ปัญหาสต็อกของเงิน (I) คอมเพล็กซ์
ในวัฒนธรรม DMSO เกรด คอมเพล็กซ์ 'แก้ปัญหาหุ้น
(10 ll จาก 1 มิลลิเมตร) ถูกบันทึกอยู่ในสื่อที่ให้ความเข้มข้นสุดท้าย
10 LM ใน 1 มิลลิลิตรของสื่อการรักษาด้วย 1% DMSO
เซลล์ที่ถูกบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสในสภาพแวดล้อมที่ CO2 5%
การรักษาควบคุมรวมถึง; การควบคุมการรับการรักษาควบคุมยานพาหนะ
(เซลล์รับการรักษาด้วย 1% DMSO), เครื่องควบคุม apoptotic (100 LM cisplatin)
และการควบคุมเศษ (5% H2O2) ศักยภาพของเซลล์% หลังจาก
การรักษาที่ถูกกำหนดโดย alamarBlue? การทดสอบความมีชีวิต นี้
การทดสอบที่เกี่ยวข้องกับการระงับ 100 LL ของเซลล์ในการรักษาเพิ่มขึ้นสามเท่าใน
แผ่น 96 หลุม alamarBlue? สีย้อม (10 LL) ถูกเพิ่มเข้ามาใน
กรณีที่ไม่มีของแสงตามมาด้วยการฟักตัวประมาณ 2-3 ชั่วโมงที่ 37 องศาเซลเซียสและ
5% ความชื้น CO2 เรืองแสงของกลุ่มตัวอย่างถูกวัด
โดยใช้เครื่องอ่าน Synergy HT Multi-ตรวจหาไมโครในการกระตุ้น
และการปล่อยความยาวคลื่น 530 นาโนเมตร K And K 590 นาโนเมตรตามลำดับ
ศักยภาพ% ที่เหลือขึ้นอยู่กับการเรืองแสงของ
การควบคุมการรับการรักษา
3. ผลการทดลองและการอภิปราย
3.1 การสังเคราะห์คอมเพล็กซ์
การสังเคราะห์สีเงิน (I) คอมเพล็กซ์ benzyldiphenylphosphine
มักจะกระทำในตัวทำละลายเช่น acetonitrile ปฏิกิริยาที่
ต้องมีการสลายตัวของแกนด์ฟอสฟีนใน acetonitrile
และเมื่อนอกเหนือจาก thiocyanate เงินนั้น ส่วนผสมที่มี
ความร้อนภายใต้กรดไหลย้อนจนถึงของแข็งทั้งหมดที่ละลายในน้ำ วิธีการนี้สามารถ
ใช้ในการสังเคราะห์ 1: สินค้าอัตราส่วน 2 M ใช้ equimolar
ปริมาณของเกลือเงินและฟอสฟีนแกนด์จะมีผลในบางส่วน
เกลือละลายเงินผลในรูปแบบของผลิตภัณฑ์ที่ผสม
การสังเคราะห์ 1:
M 1 อัตราส่วนสินค้าต้องมีส่วนผสมของ ไพริดีนและ acetonitrile (01:20) เพื่อที่จะละลายเกลือเงิน
แต่น่าเสียดายที่มีเพียงการสังเคราะห์ของ 1: 2 ผล
ผลึกที่เหมาะสมสำหรับการวิเคราะห์การเลี้ยวเบนผลึกเดี่ยวเอ็กซ์เรย์
สังเคราะห์ที่ 2 ส่งผลให้สินค้า acetonitrile ละลาย,
ซึ่งได้รับการยืนยันด้วย FTIR, NMR และผลึกเดี่ยว X-ray
การเลี้ยวเบน
การเปลี่ยนแปลงในการดูดกลืนแสงสูงสุด FTIR ของไอออน SCN บ่งชี้ว่า
การก่อตัวที่ซับซ้อน เมื่อการประสานงานของแกนด์ไป สังเคราะห์ที่ 2 ส่งผลให้สินค้า acetonitrile ละลาย, ซึ่งได้รับการยืนยันด้วย FTIR, NMR และผลึกเดี่ยว X-ray การเลี้ยวเบน การเปลี่ยนแปลงในการดูดกลืนแสงสูงสุด FTIR ของไอออน SCN บ่งชี้ว่าการก่อตัวที่ซับซ้อน เมื่อการประสานงานของแกนด์ไป สังเคราะห์ที่ 2 ส่งผลให้สินค้า acetonitrile ละลาย, ซึ่งได้รับการยืนยันด้วย FTIR, NMR และผลึกเดี่ยว X-ray การเลี้ยวเบน การเปลี่ยนแปลงในการดูดกลืนแสงสูงสุด FTIR ของไอออน SCN บ่งชี้ว่าการก่อตัวที่ซับซ้อน เมื่อการประสานงานของแกนด์ไป

การแปล กรุณารอสักครู่..

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:[สำเนา]

คัดลอก!

2.3 การเพาะเลี้ยงและการรักษาและเซลล์สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์และวัสดุ ดังต่อไปนี้ใช้ ของดัลเบโค่แก้ไขนกอินทรีขนาดกลาง ( dmem ) คือเตรียมโดยใช้ milliq น้ำ ( 18 MX ซม. ) , แฮงค์สมดุลเกลือโซลูชั่น ( hbss ) foetal น่อง เซรั่ม ( FCS ) เอนไซม์เพนนิซิลลิน / versene / ,การประเมินผลการปฏิบัติงาน / fungizone ส่วนผสมเจนตาไมซินทั้งหมดซื้อจาก Highveld ทุกอย่าง ( Lyndhurst , แอฟริกาใต้ )วัสดุทั้งหมดรวมถึงการเป็นหมัน ปิเปต , เครื่องปั่นเหวี่ยงหลอดขวด ( 75 cm3 3 cm3 ) และ 96 แผ่น ซื้อดีจาก Corning Incorporated .วัสดุทั้งหมดที่ใช้สำหรับการรักษาทางชีวภาพของเซลล์คือต้องที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส dmem hbss , และรูป / versene ทั้งหมดอยู่ใน thermostated น้ำอาบที่อุณหภูมิ 37 ก่อนการทดลองเริ่มต้น ที่และมะเร็งเซลล์เส้น ( ATCC แมวไม่ ccl-185 ) ได้มาจากเซลล์มะเร็งที่มาจากประเทศแอฟริกาใต้สีดำชายจากแอฟริกา [ 21 ] เซลล์ก็ explanted และเพาะเลี้ยงในเซลล์ไลน์เซลล์และเพาะเลี้ยงในขวดแก้ว ( 75 cm3 ) ในตู้ฟักไข่( เทอร์โมวิทยาศาสตร์ heracell 150i CO2 Incubator ) ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส โดยใช้dmem ( กลูโคส โซเดียมไพรูเวท 25 มม. 1 มม. และ 6 มม.กลูตามีน ) สื่อที่ถูกเสริมด้วย 20% FCS , 1.6 %pencillin / ยารักษา / fungizone ส่วนผสมและ 0.4% เจนตาไมซิน .เมื่อเซลล์ยึดติดกับขวด แล้วถึง confluency เต็ม ,การใช้สื่อที่ถูกทิ้งและเซลล์ล้างสองครั้งด้วยhbss ( 10 cm3 ) ตามล้างเซลล์ถูกขั้นตอนกับทริป ( 7 cm3 ) 7 นาทีในตู้ฟักไข่ การเปลี่ยนแปลง คือการศึกษาและ dmem สื่อ ซึ่งหลังจากที่เซลล์เป็นเม็ด และรวบรวมการปั่น ( เทอร์โมวิทยาศาสตร์Heraeus biofuge Primo R centrifuge ) ที่ 2 , 200 รอบต่อนาที ( 634g ) เป็นเวลา 4 นาทีเม็ดเป็น resuspended ใน dmem สื่อ ( 5 cm3 ) และความเข้มข้นของเซลล์ถูกกำหนดโดยใช้ไตรแพนสีฟ้าสี( Invitrogen , Oregon , USA ) และ tc10tm เครื่องนับเซลล์อัตโนมัติ( biorad , Hercules , CA ) ซิลเวอร์ ( I ) โซลูชั่นที่ซับซ้อน อุ่นใน labnet นานาชาติ ACCU blocktm ดิจิตอลบริการอาบน้ำที่อุณหภูมิ 70 Cชั่วโมงก่อนการรักษาเซลล์ความเข้มข้น 2 105 ลิตรถูก seeded ในเซลล์เพาะเลี้ยงอาหาร ( 3 cm3 ) และอนุญาตให้ยึดมั่นตลอด 24 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส โดยใช้ความชื้น CO2 5% วันรุ่งขึ้น สื่อเก่า ถูกทิ้งและเซลล์ได้รับการรักษากับ คอมเพล็กซ์ 1 และ 2 ใช้ความเข้มข้นสุดท้าย 10 ไมโครเมตร สมาธินี้ได้โดยการเตรียมการของ 1 มิลลิเมตรหุ้นโซลูชั่นของซิลเวอร์ ( I ) สารประกอบเชิงซ้อนใน DMSO ชั้นวัฒนธรรม หุ้นโซลูชั่น คอมเพล็กซ์ '( 10 จะจาก 1 มิลลิเมตร ) คือการเพิ่มสื่อ ให้มีความเข้มข้นสุดท้าย10 ใน 1 มิลลิลิตรโดยสื่อการรักษาด้วย 1% DMSO .เซลล์ที่ถูกบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส ในบรรยากาศคาร์บอนไดออกไซด์ 5 เปอร์เซ็นต์การรักษาควบคุม ได้แก่ การควบคุมและการควบคุมยานพาหนะ( เซลล์ที่ได้รับการรักษาด้วย 1% DMSO ) ในกลุ่มที่มีการควบคุม ( 100 LM เคมีบำบัด )และควบคุมอาการ ( 5% H2O2 ) และความมีชีวิตของเซลล์ หลังจากการกำหนด alamarblue ความมีชีวิต ตามลำดับ นี้การทดสอบที่เกี่ยวข้องกับ 100 จะระงับการรักษาเซลล์ทั้งสามใบใน96 ครับจาน การ alamarblue ย้อม ( 10 จะถูกเพิ่มในการขาดของแสง ตามด้วยการบ่มเป็นเวลา 2 – 3 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส5% CO2 ความชื้น เรืองแสงของการเก็บรวบรวมข้อมูลการใช้ระบบ HT หลายพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทยที่กระตุ้นการอ่านความยาวคลื่น 530 nm และปล่อย K และ K 590 nm ตามลำดับ% 1 ถูกกำหนดบนพื้นฐานของการเรืองแสงของการควบคุมการปนเปื้อน3 . ผลและการอภิปราย3.1 . การสังเคราะห์สารประกอบเชิงซ้อนการสังเคราะห์สารประกอบเชิงซ้อนซิลเวอร์ ( I ) benzyldiphenylphosphineมักจะทำในตัวทำละลาย เช่น ไน . ปฏิกิริยาต้องมีการละลายของฟอสฟีน ) โตไนไตรล์และเมื่อเพิ่มของไทโอไซยาเนตเงิน ; ผสมอุ่นใต้ย้อนจนของแข็งละลาย วิธีการนี้สามารถใช้สังเคราะห์ M อัตราส่วน 1 : 2 ผลิตภัณฑ์ ๆโดยใช้เกลือจํานวนเงินและฟอสฟีน ) จะส่งผลให้ในบางส่วนเกลือละลายเงิน เป็นผลให้การสร้างของผลิตภัณฑ์ผสมการสังเคราะห์ของผลิตภัณฑ์มีอัตราส่วน 1 : 1 M เป็นส่วนผสมของไพริดีน และ ไน ( 1 : 20 ) เพื่อให้เกลือละลายเงินแต่น่าเสียดายที่เพียง 2 ผลิตภัณฑ์จากการสังเคราะห์ผลึกที่เหมาะสมสำหรับผลึกเดี่ยวการเลี้ยวเบนของรังสีเอกซ์ในการวิเคราะห์ ที่การสังเคราะห์ที่ซับซ้อน 2 ให้กลายเป็นไนโซลเวตผลิตภัณฑ์ซึ่งได้รับการยืนยันด้วย FTIR , NMR และ X-ray ผลึกเดี่ยวการเลี้ยวเบนการเปลี่ยนแปลงใน ( การดูดกลืนแสงสูงสุดของระบบไอออน บ่งชี้ว่าการสร้างที่ซับซ้อน เมื่อการประสานงานของลิแกนด์กับ

การแปล กรุณารอสักครู่..

ภาษาอื่น ๆ

การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.