Carbohydrate
Polymers
87 (2012) 2496–
2504
Contents
lists
available
at
SciVerse
ScienceDirect
Carbohydrate
Polymers
j
ourna
l
ho
me
pag
e:
www.elsevier.com/locate/carbpol
Yeast
(1-3),(1-6)-
d
-glucan
films:
Preparation
and
characterization
of
some
structural
and
physical
properties
Miroslav
Novák
a
,
∗
,
Andriy
Synytsya
a
,
Ondrej
Gedeon
b
,
Petr
Slepi
ˇ
cka
c
,
Václav
Procházka
b
,
Alla
Synytsya
d
,
Ji
ˇ
rí
Blahovec
e
,
Anna
Hejlová
e
,
Jana
ˇ
Copíková
a
a
Department
of
Carbohydrate
Chemistry
and
Technology,
Institute
of
Chemical
Technology
in
Prague,
Technická
5,
166
28
Prague
6-Dejvice,
Czech
Republic
b
Department
of
Glass
and
Ceramics,
Institute
of
Chemical
Technology
in
Prague,
Technická
5,
166
28
Prague
6-Dejvice,
Czech
Republic
c
Department
of
Solid
State
Engineering,
Institute
of
Chemical
Technology
in
Prague,
Technická
5,
166
28
Prague
6-Dejvice,
Czech
Republic
d
Department
of
Analytical
Chemistry,
Institute
of
Chemical
Technology
in
Prague,
Technická
5,
166
28
Prague
6-Dejvice,
Czech
Republic
e
Czech
University
of
Life
Sciences,
Kam
́
ycká
129,
165
21
Prague-Suchdol,
Czech
Republic
a
r
t
i
c
l
e
i
n
f
o
Article
history:
Received
30
December
2010
Received
in
revised
form
4
May
2011
Accepted
8
November
2011
Available online 19 November 2011
Keywords:
Yeast
-glucan
films
Structure
Physical
properties
Ageing
a
b
s
t
r
a
c
t
Cell
wall
polysaccharide
suspensions
(mainly
-glucan)
was
isolated
from
baker’s
yeasts
(
Saccharomyces
cerevisiae
)
and
used
for
the
preparation
of
films.
Glycerol
was
added
as
a
plasticizer.
Purity
and
composi-
tion
of
the
films
were
tested
by
elemental
analysis,
enzymatic
assay
of
-
and
-glucans,
monosaccharide
composition
analysis
(total
hydrolysis,
HPAEC)
and
vibration
spectroscopy
(FTIR,
FT
Raman).
Surface
properties
and
the
degree
and
type
of
crystallinity,
together
with
ageing
effects,
were
estimated
by
scan-
ning
electron
microscopy
(SEM),
atomic
force
microscopy
(AFM)
and
X-ray
diffraction
(XRD).
Mechanical
and
thermal
properties
were
characterized
by
tensile
tests
and
difference
scanning
calorimetry
(DSC),
respectively.
The
prepared
films
were
water
insoluble,
compact,
non-porous,
exhibit
no
pronounced
crystallinity
and
consist
of
granular-like
and
fibre
microstructures,
which
could
be
assigned
as
cell
wall
residues
and
released
polysaccharide
macromolecules.
Certain
structural
changes
in
the
film
surface
dur-
ing
one-year
shelf
storage
can
be
related
to
reorientation
and
decomposition
of
surface
macromolecules
due
to
reaction
with
the
ambient
atmosphere,
rather
than
to
crystallization
phenomena.
© 2011 Elsevier Ltd. All rights reserved.
1.
Introduction
Films
formed
from
biologically
active
substances
are
used
as
an
alternative
to
textile
based
materials.
These
modern
wound
dress-
ing
are
usually
composed
by
polysaccharides,
e.g.
,
chitin
(
Su
et
al.,
1997,
1999
),
chitosan
(
Howling
et
al.,
2001
)
and/or
(1-3),(1-6)-
d
-
glucan
(
Kofuji
et
al.,
2010
),
in
certain
cases
combined
with
other
suitable
substances,
e.g.
,
gelatine
(
Lee,
Jeon,
Lee,
Cho,
et
al.,
2003
),
collagen
(
Delatte
et
al.,
2001
),
and
gelatine
and
hyaluronic
acid
(
Lee,
Jeon,
Lee,
Lee,
et
al.,
2003
).
Cell
wall
-glucan,
a
potent
immunomodulator
isolated
from
yeasts
or
higher
fungi
(
Novák
&
V
ˇ
etvi
ˇ
cka,
2009
),
has
been
reported
to
increase
collagen
deposition
and
tissue
tensile
strength
in
experimental
models
of
wound
repair
(
Duo,
Leiying,
Williams,
&
Browder,
2002
).
According
to
an
earlier
proposed
mecha-
nism,
-glucan
supports
wound
healing
by
macrophage
activation
(
Ovington,
1998
).
Macrophages
are
vital
in
the
inflammatory
phase
of
healing,
providing
phagocytosis
and
secretion
of
cytokines
∗
Corresponding
author.
Tel.:
+420
220443116.
E-mail
address:
novaks@vscht.cz
(M.
Novák).
that
promote
the
formation
of
the
new
tissue
(
Portera
et
al.,
1997
).
Other
products
of
cytokines,
fibroblasts,
play
a
particularly
important
role
in
the
generation
of
the
new
skin
tissue.
Recent
data
have
shown
the
presence
of
-glucan
receptors
on
normal
human
dermal
fibroblasts,
thus
possibility
of
direct
stimulation
of
fibroblast
collagen
biosynthesis
(
Duo
et
al.,
2002;
Son
et
al.,
2005
).
The
biological
benefits
of
-glucan
on
wound
healing
is
thus
well
known.
In
practical
use
the
immunological
benefits
represent
only
one
side
of
the
problem
for
dressings
or
skin
substitutions
based
on
-glucan
films.
The
package
of
-glucan
macromolecules
in
a
film
depends
on
their
conformation,
which
determines
the
pres-
ence
of
ordered
or
disordered
structures.
It
is
generally
believed
that
biologically
active
preparations
should
contain
-glucan
in
the
triple-helix
conformation
(
e.g.
,
Bohn
&
BeMiller,
1995
),
how-
ever
it
is
known
that
the
-glucan
helices
dissociate
into
random
coils
when
the
strength
of
the
bonds
keeping
the
helix
together
are
decreased
below
a
critical
limit
(
Sletmoen
&
Stokke,
2008
):
the
triple
helix
of
-glucan
is
unravelled,
e.g.
,
by
increased
temperature
and/or
high
pH
(
Miura
et
al.,
1995;
Saitô
et
al.,
1991;
Young
&
Jacobs,
1998
);
after
some
time
the
non-crystalline
stage
slowly
renaturated
to
the
crystalline
one
(
McIntire
&
Brant,
1998;
Sletmoen
&
Stokke,
0144-8617/$
–
see
front
matter
©
2011 Elsevier Ltd. All rights reserved.
doi:
10.1016/j.carbpol.2011.11.031
M.
Novák
et
al.
/
Carbohydrate
Polymers
87 (2012) 2496–
2504
2497
Fig.
1.
Scheme
of
preparation
of
yeast
-glucan
films.
2008
).
High
pH
and
temperature
are
common
conditions
during
-
glucan
isolation
processes,
so
freshly
prepared
-glucan
is
probably
denatured.
Knowledge
of
physicochemical,
morphological
and
mechanical
properties
of
-glucan
films,
e.g.
,
a
shape
of
surface,
porosity
and,
last
not
least,
a
tensile
strength,
enables
appreciation
of
suitabil-
ity
of
the
material
for
intended
application,
as
well
as
tracing
of
mechanisms
of
healing.
Modern
physical
methods,
vibration
spec-
troscopy
(FTIR
and
FT
Raman),
scanning
electron
microscopy
(SEM)
(
Simi
&
Abraham,
2010
)
and
atomic
force
microscopy
(AFM)
(
Abu-
Lail
&
Camesano,
2003;
Ding
&
Himmel,
2006;
Morgan,
Roberts,
Tendler,
Davies,
&
Williams,
1999
)
represent
necessary
tools
for
film
characterization.
In
this
study
-glucan
films
were
prepared
from
cell
wall
polysaccharide
suspensions
isolated
from
baker’s
yeasts
(
Saccha-
romyces
cerevisiae
).
Structure
and
physical
properties
of
these
films
were
examined
by
elemental
analysis,
enzymatic
assay
of
-
and
-glucans,
vibration
spectroscopy
(FTIR,
FT
Raman),
microscopic
methods
(SEM,
AFM),
X-ray
diffraction
(XRD),
tensile
test
and
ther-
mal
analysis
(DSC).
Structural
changes
of
the
films
during
ageing
are
to
some
extent
also
studied
in
this
paper.
2.
Materials
and
methods
2.1.
Preparation
of
yeast
ˇ
-glucan
films
The
scheme
of
preparation
of
yeast
-glucan
films
is
shown
in
Fig.
1
.
Intact
cells
of
commercial
baker’s
yeasts
(
S.
cerevisiae
)
were
used
for
isolation
of
the
cell
wall
material
by
alkali
digestion
(6%
aq.
NaOH)
followed
by
centrifugal
separation
of
the
cell
wall
residues
according
to
the
method
of
Manners,
Masson,
and
Paterson
(1973)
.
The
isolated
material
was
assigned
as
-glucan
because
it
contained
this
polysaccharide
as
the
main
component,
mixed
with
small
amount
of
other
polysaccharides.
Yeast
-glucan
films
were
prepared
from
the
isolated
material
by
re-suspending
in
water
at
the
concentration
corresponding
to
an
area
density
of
10
mg
cm
−
2
.
Glycerol
(25%
related
to
weight
of
the
solid
phase)
was
added
as
a
plasticizer
directly
into
the
suspension
before
drying.
The
suspen-
sion
was
poured
onto
a
metal
dish
with
known
area
and
then
dried
out
at
65
◦
C
in
a
hot-air
oven
for
2
h.
After
drying,
films
were
peeled
off
and
examined.
For
ageing
studies,
films
were
stored
at
steady
air-conditioned
laboratory
conditions
at
known
temperature
and
air
humidity,
protected
from
direct
light
and
dust
deposition.
All
chemicals
were
used
as
received.
Water
used
in
the
experiments
was
purified
by
reverse
osmosis
and
deionization.
2.2.
Analyses
of
film
composition
Content
of
carbon,
hydrogen
and
nitrogen
in
the
parent
yeast
-glucan
as
well
as
yeast
-glucan
films
was
performed
on
the
Ele-
mentar
Vario
EL
III
analyzer
(Elementar
Analysensysteme
GmbH,
Germany).
Monosaccharide
composition
was
detected
after
1-h
hydroly-
sis
by
3
M
trifluoroacetic
acid
(TFA)
at
100
◦
C.
After
removal
of
TFA
the
monosaccharides
were
analysed
by
High
Performance
Anion-Exchange
Chromatography
system
with
pulsed
amperomet-
ric
detection
(HPAEC-PAD),
Dionex
BIO
LC
(Dionex,
USA),
equipped
with
an
analytical
column
2
mm
×
250
mm
CarboPac
PA1,
guard
column
2
mm
×
50
mm
CarboPac
PA1
(Dionex
Corporation,
USA)
and
a
gradient
pump
(Dionex
Corporation
Sunnyvale,
USA),
with
mobile
phase
16
mmol
NaOH.
Content
of
total,
-
and
-glucans
was
determined
by
an
enzy-
matic
kit
KYBGL
(Megazyme
International
Ireland
Ltd.).
Content
of
-glucans
was
calculated
as
a
difference
between
the
deter-
mined
contents
of
total
glucans
(obtained
by
acidic
hydrolysis)
and
-glucans
(obtained
by
enzymatic
hydrolysis).
2.3.
Solubility
in
water
Dry
films
were
weighed
and
immersed
into
50
ml
of
distilled
water
containing
traces
of
sodium
azide
(0.02%,
w/v)
and
agitated
very
slowly
at
25
◦
C
for
24
h.
Then
the
films
were
removed,
dried
at
60
◦
C
and
weighed
again.
The
solubility
was
calculated
as
per
cents
of
weight
loss.
2.4.
Tensile
tests
The
specimens
for
mechanical
testing
were
rectangular
strips
90
mm
×
10
mm;
their
actual
thickness
and
width
were
measured
with
a
micrometer
(average
from
five
different
points)
or
by
stereo
microscopy
(average
from
three
different
points),
respectively.
Before
testing
the
strips
were
conditioned
for
at
least
15
days
at
room
temperature
in
closed
chambers
with
fixed
relative
humid-
ity
(RH)
of
43%
over
saturated
solution
of
potassium
carbonate.
The
equilibrium
RH
was
checked
by
a
hygrometer
(Thermo-Hygro-
Barometer/Logger
COMET
D4141).
Moisture
content
in
the
films
stored
at
the
same
คาร์โบไฮเดรตโพลิเมอร์87 (2012) 2496-2504เนื้อหารายการพร้อมใช้งานที่SciVerseScienceDirectคาร์โบไฮเดรตโพลิเมอร์เจournalโฮฉันปลายแห่งe:www.elsevier.com/locate/carbpolเชื้อยีสต์(1-3),(1-6)-d-glucanภาพยนตร์:เตรียมสอบและจำแนกของบางโครงสร้างและมีอยู่จริงคุณสมบัติMiroslavNovákมี,∗,อันดรีย์Synytsyaมี,OndrejGedeonบี,อ่างSlepiˇckac,เมืองProcházkaบี,แขกผู้เข้าพักSynytsyad,จิˇríBlahovecอี,แอนนาHejlováอี,JanaˇCopíkováมีมีแผนกของคาร์โบไฮเดรตเคมีและเทคโนโลยีสถาบันของสารเคมีเทคโนโลยีในปรากTechnická516628กรุงปราก6-Dejviceเชกสาธารณรัฐบีแผนกของแก้วและเซรามิกส์สถาบันของสารเคมีเทคโนโลยีในปรากTechnická516628กรุงปราก6-Dejviceเชกสาธารณรัฐcแผนกของเป็นของแข็งรัฐวิศวกรรมสถาบันของสารเคมีเทคโนโลยีในปรากTechnická516628กรุงปราก6-Dejviceเชกสาธารณรัฐdแผนกของวิเคราะห์เคมีสถาบันของสารเคมีเทคโนโลยีในปรากTechnická516628กรุงปราก6-Dejviceเชกสาธารณรัฐอีเชกมหาวิทยาลัยของชีวิตวิทยาศาสตร์กำ ́ycká12916521ปราก-Suchdolเชกสาธารณรัฐมีrtฉันclอีฉันnfoบทความประวัติ:ได้รับ30ธันวาคม2010ได้รับในแก้ไขปรับปรุงแบบฟอร์มการ4อาจ2011ยอมรับ8พฤศจิกายน2011มีออนไลน์ 19 2554 พฤศจิกายนคำสำคัญ:เชื้อยีสต์-glucanฟิล์มโครงสร้างมีอยู่จริงคุณสมบัติอายุมีบีstrมีctเซลล์ผนังpolysaccharideหยุดให้บริการ(ส่วนใหญ่-glucan)มีแยกต่างหากจากของเบเกอร์yeasts(Saccharomycescerevisiae)และใช้สำหรับที่เตรียมสอบของฟิล์มกลีเซอรมีเพิ่มเป็นมีกระด้างไนลความบริสุทธิ์และcomposi-สเตรชันของที่ฟิล์มมีทดสอบโดยธาตุการวิเคราะห์เอนไซม์ในระบบวิเคราะห์ของ-และ-glucansmonosaccharideองค์ประกอบวิเคราะห์(ผลรวมไฮโตรไลซ์HPAEC)และสั่นสะเทือนก(FTIRฟุตรามัน)พื้นผิวคุณสมบัติและที่ปริญญาและชนิดของcrystallinityเข้าด้วยกันมีอายุผลมีโดยประมาณโดยสแกน-หนิงอิเล็กตรอนmicroscopy(SEM),อะตอมกองทัพmicroscopy(AFM)และเอ็กซ์เรย์การเลี้ยวเบน(XRD)เครื่องจักรกลและความร้อนคุณสมบัติมีลักษณะโดยแรงดึงทดสอบและความแตกต่างการสแกนcalorimetry(DSC),ตามลำดับที่เตรียมฟิล์มมีน้ำไม่ละลายกระชับไม่ใช่-porousแสดงไม่ใช่การออกเสียงcrystallinityและประกอบด้วยของเหมือน granularและเส้นใยmicrostructuresซึ่งสามารถมีกำหนดให้เป็นเซลล์ผนังตกค้างและนำออกใช้polysaccharidemacromoleculesแน่นอนโครงสร้างการเปลี่ยนแปลงในที่ฟิล์มพื้นผิวdur-ไอเอ็นจีหนึ่งปีชั้นวางสินค้าจัดเก็บข้อมูลสามารถมีที่เกี่ยวข้องถึงreorientationและแยกส่วนประกอบของพื้นผิวmacromoleculesครบกำหนดถึงปฏิกิริยามีที่แวดล้อมบรรยากาศค่อนข้างกว่าถึงตกผลึกปรากฏการณ์การ© 2011 Elsevier จำกัด สงวนลิขสิทธิ์ทั้งหมด1แนะนำฟิล์มก่อตั้งขึ้นจากชิ้นใช้งานอยู่สารมีใช้เป็นมีทางเลือกถึงสิ่งทอตามวัสดุเหล่านี้ทันสมัยบาดแผลเครื่องแต่งกาย-ไอเอ็นจีมีโดยทั่วไปประกอบด้วยโดยpolysaccharidesเช่น,ไคทิน(Suร้อยเอ็ดal.,ปี 1997ปี 1999),ไคโตซาน(เห่าหอนร้อยเอ็ดal.,ปี 2001)และ/หรือ(1-3),(1-6)-d-glucan(Kofujiร้อยเอ็ดal.,2010),ในแน่นอนกรณีรวมมีอื่น ๆเหมาะสมสารเช่น,gelatine(ลีเจินลีช่อร้อยเอ็ดal.,2003),คอลลาเจน(Delatteร้อยเอ็ดal.,ปี 2001),และgelatineและhyaluronicกรด(ลีเจินลีลีร้อยเอ็ดal.,2003).เซลล์ผนัง-glucanมีมีศักยภาพimmunomodulatorแยกต่างหากจากyeastsหรือสูงเชื้อรา(Novák&Vˇetviˇckaปี 2009),มีถูกรายงานถึงเพิ่มขึ้นคอลลาเจนสะสมและเนื้อเยื่อแรงดึงความแข็งแรงในทดลองแบบจำลองของบาดแผลซ่อมแซม(DuoLeiyingวิลเลียมส์&Browder2002).ตามถึงมีก่อนหน้านี้การนำเสนอกลไก-nism-glucanสนับสนุนบาดแผลรักษาโดยmacrophageเปิดใช้งาน(Ovingtonปี 1998).บังเอิญมีสำคัญในที่อักเสบขั้นตอนการของรักษาให้phagocytosisและหลั่งของcytokines∗ที่สอดคล้องผู้เขียนโทร.:420220443116อีเมลที่อยู่:novaks@vscht.cz(ม.Novák)ที่ส่งเสริมการที่ผู้แต่งของที่ใหม่เนื้อเยื่อ(Porteraร้อยเอ็ดal.,ปี 1997).อื่น ๆผลิตภัณฑ์ของcytokinesfibroblastsเล่นมีโดยเฉพาะอย่างยิ่งสำคัญบทบาทในที่รุ่นของที่ใหม่ผิวเนื้อเยื่อล่าสุดข้อมูลมีแสดงที่สถานะการออนไลน์ของ-glucanreceptorsบนปกติมนุษย์ผิวหนังfibroblastsดังนั้นความเป็นไปได้ของโดยตรงกระตุ้นของfibroblastคอลลาเจนการสังเคราะห์(Duoร้อยเอ็ดal.,2002สนร้อยเอ็ดal.,ปี 2005).ที่ทางชีวภาพประโยชน์ของ-glucanบนบาดแผลรักษามีดังนั้นดีรู้จักกันในปฏิบัติใช้ที่ภูมิคุ้มกันประโยชน์เป็นตัวแทนเท่านั้นหนึ่งด้านข้างของที่ปัญหาสำหรับแผลหรือผิวทดแทนตามบน-glucanฟิล์มที่แพคเกจของ-glucanmacromoleculesในมีฟิล์มขึ้นอยู่กับบนของพวกเขาconformationซึ่งกำหนดที่บริษัท-enceของสั่งหรือdisorderedโครงสร้างการมันมีโดยทั่วไปเชื่อกันว่าที่ชิ้นใช้งานอยู่เตรียมควรประกอบด้วย-glucanในที่ทริปเปิลเกลียวconformation(เช่น,Bohn&BeMiller1995),วิธี-เคยมันมีที่รู้จักกันที่ที่-glucanhelicesdissociateเข้าไปในสุ่มขดลวดเมื่อที่ความแข็งแรงของที่พันธบัตรรักษาที่เกลียวเข้าด้วยกันมีลดลงด้านล่างมีสำคัญจำกัด(Sletmoen&Stokkeปี 2008):ที่ห้องทริปเปิลเกลียวของ-glucanมีunravelledเช่น,โดยเพิ่มขึ้นอุณหภูมิและ/หรือสูงค่า pH(มิอุระร้อยเอ็ดal.,1995Saitôร้อยเอ็ดal.,1991หนุ่มสาว&เจคอปส์ปี 1998);หลังจากบางเวลาที่ไม่มีผลึกขั้นตอนช้าrenaturatedถึงที่ผลึกหนึ่ง(McIntire&Brantปี 1998Sletmoen&Stokke0144-8617 / $–ดูหน้าเรื่อง© จำกัด Elsevier 2011 สงวนลิขสิทธิ์ทั้งหมดดอย:10.1016/j.carbpol.2011.11.031ม.Novákร้อยเอ็ดอัล/คาร์โบไฮเดรตโพลิเมอร์87 (2012) 2496-25042497ฟิก1โครงร่างของเตรียมสอบของเชื้อยีสต์-glucanฟิล์มปี 2008).สูงค่า pHและอุณหภูมิมีทั่วไปเงื่อนไขในระหว่างการ-glucanแยกกระบวนการดังนั้นสดใหม่เตรียม-glucanมีคงdenatured การความรู้ของphysicochemicalสัณฐานและเครื่องจักรกลคุณสมบัติของ-glucanภาพยนตร์เช่น,มีรูปร่างของพื้นผิวporosityและสุดท้ายไม่น้อยมีแรงดึงความแข็งแรงเปิดใช้งานเพิ่มค่าของsuitabil-ityของที่วัสดุสำหรับมีวัตถุประสงค์โปรแกรมประยุกต์เป็นดีเป็นสืบค้นกลับของกลไกของรักษาทันสมัยมีอยู่จริงวิธีการสั่นสะเทือนข้อมูลจำเพาะ-troscopy(FTIRและฟุตรามัน),การสแกนอิเล็กตรอนmicroscopy(SEM)(Simi&อับราฮัม2010)และอะตอมกองทัพmicroscopy(AFM)(อาบู-Lail&Camesano2003ดิง&Himmelปี 2006มอร์แกนโรเบิตส์Tendlerเดวีส์&วิลเลียมส์ปี 1999)เป็นตัวแทนความจำเป็นเครื่องมือสำหรับฟิล์มจำแนกในนี้ศึกษา-glucanฟิล์มมีเตรียมจากเซลล์ผนังpolysaccharideหยุดให้บริการแยกต่างหากจากของเบเกอร์yeasts(Saccha-romycescerevisiae).โครงสร้างและมีอยู่จริงคุณสมบัติของเหล่านี้ฟิล์มมีตรวจสอบโดยธาตุการวิเคราะห์เอนไซม์ในระบบวิเคราะห์ของ-และ-glucansสั่นสะเทือนก(FTIRฟุตรามัน),กล้องจุลทรรศน์วิธีการ(SEMAFM),เอ็กซ์เรย์การเลี้ยวเบน(XRD),แรงดึงทดสอบและเธอ-อัปวิเคราะห์(DSC)โครงสร้างการเปลี่ยนแปลงของที่ฟิล์มในระหว่างการอายุมีถึงบางขอบเขตนอกจากนี้ศึกษาในนี้กระดาษ2วัสดุและวิธีการ2.1เตรียมสอบของเชื้อยีสต์ˇ-glucanฟิล์มที่โครงร่างของเตรียมสอบของเชื้อยีสต์-glucanฟิล์มมีแสดงในฟิก1.เหมือนเดิมเซลล์ของพาณิชย์ของเบเกอร์yeasts(S ได้cerevisiae)มีใช้สำหรับแยกของที่เซลล์ผนังวัสดุโดยอัลคาไลย่อยอาหาร(6%aq.NaOH)ตามโดยแรงเหวี่ยงแยกของที่เซลล์ผนังตกค้างตามถึงที่วิธีการของมารยาทMassonและทเทอร์(1973).ที่แยกต่างหากวัสดุมีกำหนดให้เป็น-glucanเนื่องจากมันประกอบด้วยนี้polysaccharideเป็นที่หลักส่วนประกอบผสมมีขนาดเล็กยอดเงินของอื่น ๆpolysaccharidesเชื้อยีสต์-glucanฟิล์มมีเตรียมจากที่แยกต่างหากวัสดุโดยการระงับในน้ำที่ที่ความเข้มข้นที่สอดคล้องถึงมีที่ตั้งความหนาแน่นของ10มิลลิกรัมซม.−2.กลีเซอร(25%ที่เกี่ยวข้องถึงน้ำหนักของที่เป็นของแข็งระยะ)มีเพิ่มเป็นมีกระด้างไนลโดยตรงเข้าไปในที่ระบบกันสะเทือนก่อนที่จะแห้งที่suspen-นมีpouredบนมีโลหะจานมีที่รู้จักกันที่ตั้งและแล้วแห้งออกที่65◦Cในมีอากาศร้อนเตาอบสำหรับ2hหลังจากแห้งฟิล์มมีปอกเปลือกปิดและตรวจสอบสำหรับอายุการศึกษาฟิล์มมีเก็บไว้ที่มั่นคงเครื่องปรับอากาศห้องปฏิบัติการเงื่อนไขที่ที่รู้จักกันอุณหภูมิและอากาศความชื้นได้รับการป้องกันจากโดยตรงแสงและฝุ่นละอองสะสมทั้งหมดเคมีภัณฑ์มีใช้เป็นได้รับการน้ำใช้ในที่ทดลองมีบริสุทธิ์ที่โดยย้อนกลับosmosisและdeionization2.2วิเคราะห์ของฟิล์มองค์ประกอบเนื้อหาของคาร์บอนไฮโดรเจนและไนโตรเจนในที่หลักเชื้อยีสต์-glucanเป็นดีเป็นเชื้อยีสต์-glucanฟิล์มมีดำเนินการบนที่เอเล-mentarVariorfaceIIIวิเคราะห์(ElementarAnalysensystemeGmbHเยอรมนี)Monosaccharideองค์ประกอบมีตรวจพบหลังจาก1 hhydroly-sisโดย3Mtrifluoroaceticกรด(TFA)ที่100◦คหลังจากการเอาออกของTFAที่monosaccharidesมีanalysedโดยสูงประสิทธิภาพการทำงานAnion ExchangeChromatographyระบบมีสูงamperomet-ricตรวจสอบ(HPAEC แผ่น),DionexไบโอLC(Dionexสหรัฐอเมริกา),การติดตั้งมีมีวิเคราะห์คอลัมน์2มม.×250มม.CarboPacPA1ยามคอลัมน์2มม.×50มม.CarboPacPA1(Dionexคอร์ปอเรชั่นสหรัฐอเมริกา)และมีการไล่ระดับสีปั๊ม(DionexบริษัทSunnyvaleสหรัฐอเมริกา),มีโทรศัพท์มือถือขั้นตอนการ16mmolNaOHเนื้อหาของรวม-และ-glucanswasdeterminedbyanenzy-matickitKYBGL(MegazymeInternationalIrelandLtd.).Contentof-glucanswascalculatedasadifferencebetweenthedeter-minedcontentsoftotalglucans(obtainedbyacidichydrolysis)and-glucans(obtainedbyenzymatichydrolysis).2.3.SolubilityinwaterDryfilmswereweighedandimmersedinto50mlofdistilledwatercontainingtracesofsodiumazide(0.02%,w/v)andagitatedveryslowlyat25◦Cfor24h.Thenthefilmswereremoved,driedat60◦Candweighedagain.Thesolubilitywascalculatedaspercentsofweightloss.2.4.TensiletestsThespecimensformechanicaltestingwererectangularstrips90mm×10mm;theiractualthicknessandwidthweremeasuredwithamicrometer(averagefromfivedifferentpoints)orbystereomicroscopy(averagefromthreedifferentpoints),respectively.Beforetestingthestripswereconditionedforatleast15daysatroomtemperatureinclosedchamberswithfixedrelativehumid-ity(RH)of43%oversaturatedsolutionofpotassiumcarbonate.TheequilibriumRHwascheckedbyahygrometer(Thermo-Hygro-Barometer/LoggerCOMETD4141).Moisturecontentinthefilmsstoredatthesame
การแปล กรุณารอสักครู่..
