Plant material and growth conditions
The explants were obtained from 20- to 30-year-old mature tree of S. persica growing near to the University campus. The explants were washed under running tap water for 20 min to remove any adherent particles. Thoroughly washed explants were then immersed in 1 % (v/v) Teepol, a liquid detergent for 2–3 min, and thereafter surface sterilized in ethanol for 30 s. The explants were immersed in 0.1 % (w/v) aqueous solution of HgCl2 for 10 min, rinsed with distilled water and then suitable size nodal explants (~1 cm) were inoculated on to the medium. Murashige and Skoog (1962) (MS) medium contained 3 % sucrose, 0.8 % agar with different combinations and concentrations of plant growth regulators. The pH was adjusted to 5.8 and autoclaved at 121 °C for 20 min. Organic supplements like coconut milk (10 %) and all vitamins (twofold) were used for the improvement of callus growth and friability. The callus was then separated from the initial explants and subcultured every 30–35 days. The callus was maintained on MS medium with combinations of 2,4,5-T and BAP, 0.5 mg/l each, 3 % (w/v) sucrose, double vitamins and 0.8 % (w/v) agar.
For salt stress experiment, different NaCl concentrations (0, 50, 100 and 200 mM) were added in MS medium and 40 ml medium was poured in 100-ml wide-mouth conical flasks. The callus (2.0 g) was inoculated in each flask and these cultures were incubated at 25 ± 0.2 °C under a 16 h d−1 photoperiod with 50 μmol m−2 s−1 irradiance. Fresh weight (FW) and dry weight (DW) were determined after 30-day growth
วัสดุปลูกและเงื่อนไขในการเจริญเติบโตของชิ้นส่วนที่ได้รับจาก 20 ไปที่ต้นไม้ 30 ปีเป็นผู้ใหญ่ของเอส persica เติบโตใกล้กับมหาวิทยาลัย ชิ้นถูกล้างภายใต้การใช้น้ำประปาเป็นเวลา 20 นาทีเพื่อขจัดอนุภาคสาวกใด ๆ ชิ้นล้างให้สะอาดแล้วแช่ใน 1% (v / v) Teepol, น้ำยาซักผ้าสำหรับ 2-3 นาทีและหลังจากนั้นพื้นผิวผ่านการฆ่าเชื้อในเอทานอลเป็นเวลา 30 วินาที ชิ้นส่วนที่ถูกแช่อยู่ใน 0.1% (w / v) สารละลายของ HgCl2 เป็นเวลา 10 นาทีล้างด้วยน้ำกลั่นและขนาดที่เหมาะสมแล้วชิ้นสำคัญ (~ 1 ซม) ได้รับเชื้อไปยังสื่อ อาหารสูตร (1962) (MS) กลางมี 3% ซูโครสวุ้น 0.8% กับชุดที่แตกต่างกันและความเข้มข้นของสารควบคุมการเจริญเติบโตของพืช พีเอชที่ได้รับการปรับให้ 5.8 และนึ่งฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิ 121 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 นาที อาหารเสริมอินทรีย์เช่นกะทิ (10%) และวิตามินทั้งหมด (สองเท่า) ถูกนำมาใช้ในการปรับปรุงการเจริญเติบโตของแคลลัสและกร่อน แคลลัสที่ได้รับการแยกออกจากกันแล้วจากชิ้นส่วนเริ่มต้นและต่อเชื้อทุก 30-35 วัน แคลลัสที่ได้รับการเก็บรักษาไว้ในสูตร MS ที่มีการรวมกันของ 2,4,5-T และ BAP 0.5 mg / l แต่ละ, 3% (w / v) น้ำตาลซูโครสวิตามินคู่และ 0.8% (w / v) วุ้นสำหรับความเครียดเกลือ การทดลองความเข้มข้นที่แตกต่างกันโซเดียมคลอไรด์ (0, 50, 100 และ 200 มิลลิเมตร) มีการเพิ่มใน MS ขนาดกลางและขนาด 40 มลถูกเทใน 100 มิลลิลิตรกว้างปากขวดรูปกรวย แคลลัส (2.0 กรัม) ที่ได้รับการฉีดวัคซีนในแต่ละขวดและวัฒนธรรมเหล่านี้ถูกบ่มที่ 25 ± 0.2 ° C ภายใต้ 16 hd-1 ช่วงแสง 50 ไมโครโมล M-2 s-1 รังสี น้ำหนักสด (FW) และน้ำหนักแห้ง (DW) ได้รับการพิจารณาหลังจากที่การเจริญเติบโต 30 วัน
การแปล กรุณารอสักครู่..
วัสดุปลูกและเงื่อนไขการเจริญเติบโต
เนื้อเยื่อที่ได้จาก 20 - 30 ปี ต้นไม้ของ S . การทดสอบความเป็นผู้ใหญ่เพิ่มขึ้นใกล้มหาวิทยาลัยวิทยาเขต เนื้อเยื่อที่ถูกล้างภายใต้น้ำไหล 20 นาทีเพื่อลบใด ๆที่ติด อนุภาค ล้างให้สะอาดแล้วแช่อาหารใน 1% ( v / v ) ทีโพล , ผงซักฟอกแบบเหลว 2 – 3 นาทีและหลังจากนั้นฟอกฆ่าเชื้อในเอทานอล 30 S . เนื้อเยื่อที่ถูกแช่อยู่ใน 0.1% ( w / v ) สารละลายของ hgcl2 10 นาทีล้างด้วยน้ำกลั่น และขนาดที่เหมาะสมสร้างเนื้อเยื่อ ( ~ 1 ซม. ) ปลูกเชื้อบนตัวกลาง อาหารสูตร Murashige และ Skoog ( 1962 ) ( MS ) medium ซึ่งประกอบด้วยซูโครส 3 เปอร์เซ็นต์ 0.8% วุ้นกับชุดค่าผสมที่แตกต่างกันและความเข้มข้นของสารควบคุมการเจริญเติบโตของพืชที่ pH 5.8 และ ปรับสังเคราะห์ที่ 121 °องศาเซลเซียส 20 นาที ผลิตภัณฑ์เสริมอาหารอินทรีย์เช่นกะทิ ( 10% ) และวิตามิน ( สองเท่า ) ใช้เพื่อปรับปรุงการเจริญเติบโตของแคลลัสและจอมปลอม . อาหารก็แยกจากเนื้อเยื่อที่เริ่มต้นและ subcultured ทุกๆ 30 - 35 วัน แคลลัสบนอาหารสูตร MS ที่ถูกรักษาด้วยการรวมกันของ 2,4,5-t และ BAP 0.5 มิลลิกรัมต่อลิตรละ3% ( w / v ) ซูโครส , วิตามินคู่และ 0.8 % ( w / v ) วุ้น
สำหรับการทดสอบความเครียดเกลือ ความเข้มข้นของเกลือที่แตกต่างกัน ( 0 , 50 , 100 และ 200 mm ) เพิ่มในอาหาร MS และ 40 ml ) เทลงในขวดปากกรวยกว้าง 100 ml . อาหาร ( 2.0 G ) เป็นเชื้อในแต่ละขวด แล้ววัฒนธรรมเหล่านี้อุณหภูมิ 25 ° C ± 0.2 ภายใต้ 16 H D − 1 ต่อ 50 μ mol m − 2 s − 1 ดังกล่าว .น้ำหนักสดและน้ำหนักแห้ง ( FW ) ( DW ) ซึ่งหลังจาก 30 วันการเจริญเติบโต
การแปล กรุณารอสักครู่..