7.3.8.3 Chemicals and reagents
• Methanol (Carl Roth GmbH, Germany, Art.No. 7342.1)
• Hydrochloric acid (fuming 37%, Carl Roth GmbH, Germany, Art.No. 4625.2)
• Ferulic Acid (Fluka Chemie GmbH, Belgium, EcNo. 2086797)
• Folin-Ciocalteu phenol reagent (diluted 1:10, Sigma-Aldrich Chemie GmbH,
Germany, F9252-500ML)
• Sodium carbonate (anhydrous, Carl Roth GmbH, Germany, Art.No. A135.2)
62
7.3.8.4 Procedure
Approximately 2.5 g ± 0.1 mg of each sample were weighed into 50 ml tubes (triple
determination) and the solvent was prepared for the extract.
Solvent:
85 parts of ethanol + 15 parts of 1 M HCl in 1000 ml volumetric flask.
Then, 20 ml of the solvent were added to each sample, mixed on a vortex mixer and
then they were mixed for 20 min on a tube rotator. Subsequently, the tubes were
centrifuged at 4000 rpm for 5 min and the supernatants were filtered through folded
filters into 50 ml Erlenmeyer flasks. This step was conducted twice. So, at the end, two
supernatants were concentrated in the 50 ml Erlenmeyer flask and the flask has been
made up to the mark with solvent. Then, 0.120 ml of each sample extract were
transferred into 2 ml reaction tubes and 0.600 ml diluted Folin-Ciocalteu reagent were
added to each reaction tube and mixed on a vortex mixer. After 2 min, 0.960 ml
Na2CO3 were added to the solution, mixed on a vortex mixer and incubated in a water
bath at 50 °C for 5 min. The samples changed their colour to blue. The samples of the
hulls got dark blue and so the extract had to be diluted (1:3 dilution). The samples of
the flour and press cake were not limpid and so they were diluted 1:2. The diluted and
undiluted solutions and the blanks were transferred into macro-cuvettes and
measured photometrically at 760 nm. The calculation was conducted according to eq.
12 and 13. For the calculation, the absorption of ferulic acid, shown in fig. 6 was
needed.
7.3.8.5 Calculation
a: ferulic acid equivalents [mg/ml]: (absorption sample - absorption blank)/4.8721 *
dilution factor
7.3.8.3 สารเคมีและสารเคมี
•เมทานอล (คาร์ลโรท GmbH ประเทศเยอรมนี, Art.No. 7,342.1)
•กรดไฮโดรคลอ (ไอ 37%, คาร์ลโรท GmbH ประเทศเยอรมนี, Art.No. 4,625.2)
• Ferulic Acid (Fluka Chemie GmbH, เบลเยียม , EcNo. 2086797)
• Folin-Ciocalteu ฟีนอลสาร (ปรับลด 1:10 Sigma-Aldrich Chemie GmbH,
เยอรมนี F9252-500ML)
•โซเดียมคาร์บอเนต (ปราศจากคาร์ลโรท GmbH ประเทศเยอรมนี, Art.No. A135.2)
62
7.3.8.4 ขั้นตอน
ประมาณ 2.5 กรัม± 0.1 mg ของแต่ละตัวอย่างถูกชั่งใส่ 50 มลหลอด (Triple
มุ่งมั่น) และตัวทำละลายกำลังเตรียมพร้อมสำหรับการสกัด.
ตัวทำละลาย:
85 ส่วนของเอทานอล 15 + ส่วนของ 1 M HCl 1000 มล. ขวดปริมาตร .
จากนั้น 20 มล. ของตัวทำละลายที่ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละตัวอย่างผสมในเครื่องผสมน้ำวนและ
แล้วพวกเขาก็ถูกผสมเป็นเวลา 20 นาทีในการหมุนหลอด ต่อมาหลอดที่ถูก
หมุนเหวี่ยงที่ 4000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 5 นาทีและ supernatants ถูกกรองผ่านพับ
ฟิลเตอร์ลงในขวด 50 มล Erlenmeyer ขั้นตอนนี้ได้ดำเนินการเป็นครั้งที่สอง ดังนั้นในตอนท้ายสอง
supernatants มีความเข้มข้นใน 50 มล Erlenmeyer ขวดและขวดที่ได้รับการ
สร้างขึ้นเพื่อทำเครื่องหมายกับตัวทำละลาย จากนั้น 0.120 มล. ของสารสกัดแต่ละตัวอย่างถูก
โอนเป็น 2 ml ในการเกิดปฏิกิริยาและ 0.600 มิลลิลิตรเจือจาง Folin-Ciocalteu สารที่ถูก
เพิ่มเข้ามาในแต่ละหลอดเกิดปฏิกิริยาและผสมในเครื่องผสมน้ำวน หลังจากนั้น 2 นาที 0.960 มล
Na2CO3 ถูกเพิ่มเข้าไปในการแก้ปัญหาเกี่ยวกับการผสมเครื่องผสมน้ำวนและบ่มในน้ำ
อาบน้ำที่ 50 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที ตัวอย่างการเปลี่ยนแปลงสีของพวกเขาเป็นสีฟ้า ตัวอย่างของ
ลำตัวมีสีน้ำเงินเข้มและเพื่อให้สารสกัดจะต้องมีการปรับลด (1: 3 เจือจาง) กลุ่มตัวอย่างที่ใช้
แป้งเค้กและกดที่ไม่ชัดเจนและเพื่อให้พวกเขาได้รับการเจือจาง 1: 2 เจือจางและ
การแก้ปัญหาการเจือปนและช่องว่างที่ถูกโอนเข้ามหภาค cuvettes และ
วัด photometrically ที่ 760 นาโนเมตร การคำนวณได้ดำเนินการตาม EQ.
ที่ 12 และ 13 ในการคำนวณการดูดซึมของกรด ferulic ที่แสดงในรูป 6
จำเป็น.
7.3.8.5 การคำนวณ
A: ferulic เทียบเท่ากรด [mg / ml]: (ตัวอย่างการดูดซึม - การดูดซึมที่ว่างเปล่า) /4.8721 *
ปัจจัยที่ทำให้เจือจาง
การแปล กรุณารอสักครู่..

7.3.8.3 เคมีและสารเคมี- เมทานอล ( คาร์ล Roth GmbH , Germany , art.no . 7342.1 )( ไอ - กรดเกลือ 37% คาร์ล Roth GmbH , Germany , art.no . 4625.2 )- กรด ferulic ( fluka CHEMIE GmbH , เบลเยียม ecno . 2086797 )บริการ folin สารเคมีเจือจาง 1 : 10 ciocalteu ฟีนอล ( ซิกม่า Aldrich CHEMIE GmbH ,f9252-500ml ) เยอรมนี- โซเดียม คาร์บอเนต ( Anhydrous คาร์ล Roth GmbH , Germany , art.no . a135.2 )627.3.8.4 ขั้นตอน±ประมาณ 2.5 กรัม 0.1 มิลลิกรัม จำนวนประมาณ 50 มิลลิลิตร ในแต่ละท่อ ( ทริปเปิ้ลความมุ่งมั่น ) และตัวทำละลายได้เตรียมสารสกัดตัวทำละลาย :ส่วนของเอทานอล 85 + 15 ส่วน 1 M HCl ใน 1000 มล. ปริมาตรขวดงั้น 20 มิลลิลิตร ละลายเพิ่มแต่ละตัวอย่าง ผสมกับ Vortex Mixer และจากนั้นก็ผสม 20 นาทีบนหลอด rotator . ต่อมาท่อคือระดับที่ 4 , 000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 5 นาที และ supernatants ถูกกรองผ่านพับตัวกรองเป็น 50 ml ขวดเออร์เลนเมเยอร์ . ขั้นตอนนี้ดำเนินการ 2 ครั้ง แล้วในที่สุด สองsupernatants มีความเข้มข้นใน 50 ml ขวดและขวดเหล้าถูกเออร์เลนเมเยอร์สร้างขึ้นเพื่อทำเครื่องหมายด้วยตัวทำละลาย จากนั้น 0.120 ml สารสกัดของแต่ละตัวอย่างโอนเข้า 2 มิลลิลิตรปฏิกิริยาท่อและ 0.600 กรัม folin ciocalteu รีเอเจนต์ถูกเจือจางเพิ่มไปยังแต่ละปฏิกิริยาหลอด และผสมกับ Vortex Mixer . หลังจาก 2 นาที , 0.960 มลNa2CO3 ถูกเพิ่มไปยังโซลูชั่นที่ผสมในเครื่องผสม และบ่มในน้ำ .นํ้าที่ 50 ° C เป็นเวลา 5 นาที โดยเปลี่ยนสีเป็นสีฟ้า ตัวอย่างของเปลือกมีสีเข้มและเพื่อสกัดก็จะเจือจาง ( 1 : 3 ( ) ตัวอย่างของแป้งและกดเค้กไม่ชัดแจ้งและดังนั้นพวกเขาจึงถูกเจือจาง 1 : 2 . ที่เจือจางแล้วโซลูชั่นการเจือปนและช่องว่างถูกย้ายลงในแมโครคิวเวทท์ และวัด photometrically ที่ 760 นาโนเมตร การคำนวณดำเนินการตามอีคิว12 และ 13 สำหรับการคำนวณการดูดซึมของกรด ferulic , แสดงในรูปที่ 6 คือต้องการ7.3.8.5 การคำนวณA : กรด ferulic เทียบเท่า [ mg / ml ] : ( คือตัวอย่างว่าง - การดูดซึม / 4.8721 *ปัจจัยเจือจาง
การแปล กรุณารอสักครู่..
